川芎嗪衍生物F3的抗血栓作用研究

发布时间：2020-08-11 11:03

【摘要】：心脑血管疾病是脑部血管疾病和心脏血管疾病的总称,是世界范围内危害人类生命健康的第一杀手,包括高脂血症、脑卒中、脑梗死、血液黏稠、高血压、动脉粥样硬化等疾病。病理性血栓使血管闭塞从而影响血液的正常供应,导致缺血性脑卒中、心肌梗死等缺血性心血管疾病的发生。而血小板的激活是动脉血栓形成的主要诱因。血小板是由骨髓巨核细胞的胞质脱落形成的胞质小块,是一种无核血细胞,在生理性止血、维持血管的完整性以及某些病理过程,如动脉粥样硬化、血栓形成、不稳定性心绞痛、炎症反应、阿尔兹海默病和肿瘤转移等过程中起着重要作用。在正常的生理条件下,健康的血液脉络系统释放出抑制信号,使血小板处于静息状态,当出血、炎症、吸烟、过量饮酒、糖尿病、高血压以及肥胖等外界刺激因素作用时,血小板伸出伪足,产生聚集、变形、黏附和颗粒内容物的释放等反应。药物是抗血小板活化的重要方法,抗血小板药物是治疗血栓的重要策略。然而,目前临床常用的抗血小板药物有氯吡格雷抵抗、阿司匹林的胃肠道反应以及出血等不良反应。川芎嗪是从中药川芎提取分离出来的生物碱,具有保护血管内皮、抗血小板活化、抗氧化应激等多种药理作用,临床主要用于闭塞性心脑血管疾病。然而,川芎嗪有半衰期短、药理活性不强、体内代谢快、生物利用度低等不足之处。因此,根据药物化学中的拼合原理,将川芎嗪作为先导化合物,组合肉桂酸,合成得到新型川芎嗪酚酯类衍生物F3。本课题将研究川芎嗪衍生物F3的抗血小板活性及抗血栓作用。1.F3对体外血小板聚集的影响:应用比浊法检测F3对不同激动剂诱导大鼠体外血小板聚集的作用。分离大鼠富血小板血浆,加入F3预处理(终浓度为6.5μM、12.5μM、25μM、50μM和1100μM),分别加入诱导剂凝血酶、花生四烯酸、胶原以及二磷酸腺苷,记录血小板最大聚集率。2.F3对体内血小板聚集的影响:大鼠分为空白对照组、F3给药组(50 mg/kg,25 mg/kg和6.25mg/kg)和川芎嗪(200mg/kg)阳性对照组。灌胃给药2小时后,腹主动脉取血,制备PRP和PPP,比浊法检测F3对不同激动剂诱导大鼠体内血小板聚集的作用。3.F3对小鼠尾出血时间的影响:小鼠分为F3(87.5mg/kg、175mg/kg、350 mg/kg)给药组、浓度为0.5%的羧甲基纤维素钠(0.5%CMC-Na)空白对照组和氯吡格雷(30 mg/kg)阳性对照组,F3灌胃2 h后,自尾尖处剪去小鼠尾端2～3 mm,置于温度为37℃的生理盐水中,记录小鼠的尾部出血时间。4.F3对电刺激大鼠颈总动脉血管闭塞的作用:大鼠随机分为空白对照组(0.5%CMC-Na)、川芎嗪阳性对照组(200 mg/kg)和F3给药组(6.25 mg/kg、25 mg/kg、50 mg/kg),分离大鼠颈总动脉,1.5 mA电流刺激颈总动脉7分钟,记录血管阻塞时间。5.F3对花生四烯酸诱导小鼠肺栓塞死亡的保护作用:小鼠随机分为空白对照组,F3给药组(87.5 mg/kg、、175 mg/kg、350 mg/kg),川芎嗪阳性对照组(400 mg/kg)。灌胃给药2小时后,尾静脉注射花生四烯酸(20 mg/kg),观察3分钟内小鼠的死亡数量。6.F3对大鼠动静脉旁路血栓湿重的作用:大鼠随机分为0.5%空白对照组(0.5%CMC-Na)、川芎嗪阳性对照组(200 mg/kg)、F3给药组(6.25 mg/kg,25 mg/kg,50 mg/kg),建立大鼠体外动静脉血流旁路循环,观察15分钟后0号线上血栓湿重。7.体内代谢初步研究:大鼠灌胃给药,药后lh和2 h后各颈静脉窦取血2 ml,经处理后高效液相色谱法分析F3的体内代谢物。实验结果1.F3对大鼠体外血小板聚集的作用:F3对二磷酸腺苷、凝血酶、胶原和花生四烯酸诱导的大鼠体外血小板聚集均没有抑制作用。2.F3对大鼠体内血小板聚集的影响:F3可明显抑制花生四烯、胶原和二磷酸腺苷酸诱导的大鼠体内血小板聚集,然而,对凝血酶诱导的大鼠体内血小板聚集并无明显的抑制作用。3.F3对小鼠尾出血时间的影响:当F3的给药剂量为175 mg/kg和350 mg/kg时,可以明显延长昆明小鼠尾部出血时间。4.F3对电刺激大鼠颈总动脉血管闭塞的作用:当F3给药剂量为50mg/kg时,可明显延长颈总动脉血管阻塞时间,提示F3对动脉血栓的形成具有明显的抑制作用。5.F3对花生四烯酸诱导小鼠肺栓塞的影响:当F3给药剂量为175 mg/kg和350 mg/kg可明显降低小鼠死亡率,提高小鼠的存活率,提示F3对肺栓塞具有保护作用。6.F3对大鼠动静脉旁路血栓湿重的作用:当F3给药剂量为50 mg/kg可明显降低大鼠动静脉旁路血栓湿重,说明F3对大鼠动静脉旁路血栓的形成具有抑制作用。7.体内代谢产物的初步研究:未发现F3在体内代谢为川芎嗪。结论:F3能明显抑制胶原、花生四烯酸和二磷酸腺苷诱导的大鼠体内血小板聚集,延长小鼠尾部出血时间,并且抑制多种动物模型中血栓的形成,提示F3具有抗血小板活性和抗血栓的作用。
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285

【相似文献】