人参皂苷Rd对人胃癌细胞的抑制作用及机制研究

发布时间：2020-08-12 21:19

【摘要】：目的:研究人参皂苷Rd对两种人胃癌SGC-7901和MKN-45细胞增殖及凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法:1.采用MTT法,观察GS-Rd对于人胃癌细胞SGC-7901和MKN-45在不同浓度和不同作用时间下对其细胞增殖的影响;2.利用平板克隆法验证人胃癌细胞在不同浓度GS-Rd的干预下对于细胞集落形成的影响;3.流式细胞术检测GS-Rd在不同浓度不同时间段内对于两种人胃癌细胞凋亡率和细胞周期的影响;4.Western blot法检测GS-Rd对于人胃癌SGC-7901和MKN-45细胞系凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3和Caspase-9以及周期重要蛋白Cyclin D1的表达情况。结果:1.对人胃癌细胞SGC-7901和MKN-45给与浓度为40、80、120、160、200μg/mL的人参皂苷Rd作用不同的时间(24 h、48 h、72 h)之后发现,人参皂苷Rd在不同浓度不同的时间段内对人胃癌细胞SGC-7901和MKN-45均有抑制作用,且随着给药浓度的增加和作用时间的延长其抑制效果也明显的增强,具有明显的时间-剂量依赖性,48 h的IC_(50)是SGC-7901为86.963±0.230μg/mL,MKN-45为71.698±2.162μg/mL,在72 h时GS-Rd对于两种细胞的抑制率分别达到最高;2.利用平板克隆法检测GS-Rd对人胃癌细胞增殖的影响后发现:Rd对两种胃癌细胞集落的形成均有明显的抑制作用,与Control组相比,给药组克隆的体积和数量随Rd浓度升高而逐渐减少,具有剂量依赖性;3.流式细胞术检测结果显示GS-Rd对人胃癌细胞SGC-7901和MKN-45凋亡具有较明显的促进作用,凋亡以晚凋为主,与Control组相比,两种细胞的凋亡率均逐渐升高,具有时间-剂量依赖性;4.细胞周期检测结果显示GS-Rd作用于人胃癌细胞48 h后G0/G1期的比率上升,而S期和M期的比率变化没有显著趋势。5.Western blot法检测结果显示凋亡相关蛋白Bax的表达水平升高、Bcl-2表达水平下降、Caspase-3和Caspase-9表达水平都升高,而周期蛋白cyclin D1的表达水平下降。结论:实验结果表明:人参皂苷Rd对人胃癌细胞SGC-7901和MKN-45都具有较为明显的抑制作用,具有显著的时间-剂量依赖性;Rd可促进胃癌细胞的凋亡,并可能通过阻滞细胞周期于G1期来抑制增殖,其作用机制可能是通过上调促凋亡蛋白Bax的表达,降低凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达,降低Bcl-2/Bax的比率,进而调控下游蛋白分子Caspase家族中Caspase-3的活化,激活凋亡受体Caspase-9的表达,使细胞发生凋亡。
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5
【图文】：

大学硕士学位论文 人参皂苷 Rd 对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及分子 平板克隆法分析 GS-Rd 对人胃癌细胞 SGC-7901 和 MKN-45 细胞增殖的平板克隆试验结果显示，两种胃癌细胞阴性组和给药组的细胞克隆形成显的差异，给药组的细胞集落数明显要小于阴性组的集落数，且集落的显的小于阴性组；在给药组之间，随着药物浓度的增加，其集落的数量著减少和缩小，呈现出明显的剂量依赖性，如图 3-3，实验组与对照组著性差异（P < 0.05），各实验组之间比较也有显著性差异（P < 0.05），察到 GS-Rd 对胃癌 MKN-45 细胞克隆数的影响最大，如图 3-4 和图 3-5

人参皂苷 Rd 对胃癌细胞增殖和凋亡的癌细胞 SGC-7901 和 MKN-45 相关蛋白表达的影响C-7901 和 MKN-45 细胞中 Bcl-2 家族蛋白的影响 3-11，Western Blot 检测结果显示，和 Control 组相比KN-45 和 SGC-7901 细胞中 Bax 的相对表达量显著少，Bcl-2/Bax的比率随Rd浓度的增加而减少如（表6显著性（P＜0.05），浓度越高显著性越大。

显著性（P＜0.05），浓度越高显著性越大。Rd对人胃癌细胞MKN-45中Bax和Bcl-2表达量的影响（Me：*P ＜ 0.05，**P ＜ 0.01，***P ＜ 0.001

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本文编号：2791041