古钩藤质量分析与抗肝损伤作用的研究

发布时间：2020-08-13 21:08

【摘要】：目的:对古钩藤的质量分析以及古钩藤提取液对D-GalN所致小鼠化学性肝损伤的保护作用进行初步研究。方法:(1)按照2015年版《中国药典》通则药品质量分析研究方法对古钩藤茎叶进行紫外光谱、红外光谱和薄层色谱鉴别,以及水分、灰分和浸出物的检查。(2)应用高效液相色谱法测定古钩藤叶中咖啡酸的含量。(3)利用HPLC法对古钩藤水提液进行指纹图谱研究。(4)以古钩藤不同极性的提取物为研究对象,采用D-GalN建立小鼠化学性肝损伤模型,观察其对各组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)及肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及肝脏病理组织学变化的影响。结果:(1)确定了古钩藤茎叶紫外、红外以及薄层鉴别的方法;古钩藤药材茎,水分不高于13.01%,不低于6.27%,总灰分不高于15.32%,不低于6.15%,酸不溶性灰分不高于0.55%,不低于0.17%,浸出物不高于11.75%,不低于5.21%;古钩藤药材叶,水分不高于10.37%,不低于4.82%,总灰分不高于23.14%,不低于9.06%,酸不溶性灰分不高于3.96%,不低于0.13%,浸出物不高于19.92%,不低于10.8%。(2)应用高效液相色谱法测定古钩藤叶中咖啡酸的含量,方法学的考察结果表明,各项考察结果的RSD值均小于3%,10批古钩藤叶中咖啡酸的含量在0.0965%~0.4772%之间。(3)建立了古钩藤水提取液指纹图谱的共有模式,共标定了13个共有峰,10批不同产地图谱与对照指纹图谱相似度均在0.9以上。(4)古钩藤提取物能降低小鼠血清ALT、AST活性(P0.05),能升高小鼠肝匀浆中SOD的活性(P0.05),降低MDA的水平(P0.05)。结论:(1)本次实验对古钩藤茎叶质量分析进行了初步研究,可以为其今后的质量控制以及质量标准的制定提供科学依据。(2)初步建立HPLC法测定古钩藤叶中咖啡酸的含量,该方法准确可靠,线性关系良好,精密度高,可用于古钩藤药材的质量评价。(3)建立了古钩藤水提液指纹图谱的共有模式,该方法特征性强,准确可靠,方法学考察均符合要求,可为古钩藤药材的质量评价提供依据。(4)古钩藤提取液对D-GalN所致小鼠化学性肝损伤具有一定的保护作用。
【学位授予单位】：广西中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285;R284.1
【图文】：

指纹图谱,钩藤,聚类分析,茎粉

10批古钩藤叶聚类分析图

红外光谱图,钩藤,聚类分析

图 1-21 10 批古钩藤茎聚类分析图由聚类分析图可知，10 批古钩藤叶分为三大类，杨美、十万大山、石埠、罗村、谭纹村、高峰为一类；马村、苏b\村、新苏村为一类；武鸣为一类。10 批古钩藤茎分为三大类，马村、苏b\村、新苏村、武鸣为一类；十万大山、石埠、罗村、高峰为一类；杨美、谭纹村为一类。综上所述，古钩藤茎叶红外鉴别方法可暂定为：精密称取古钩藤粉末 1g，按 1:200 的比例与溴化钾混合，置烘箱干燥 30min 后，取出于红外灯下在玛瑙乳钵中研磨均匀，于手动压片机上压至透明的薄片。经FT-IR 光谱进行测定，扫描次数 16，分辨率 8，扣除 H2O 和 CO2的干扰，光谱扫描范围是 4000~400cm-1，记录古钩藤茎、叶粉末的红外光谱图。

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称取 10 批广西境内不同产地古钩藤叶粉末各 1g，分别加入 30%甲ml，超声提取 1h，滤过，取续滤液作为供试品溶液。精密称取绿原照品5mg，精密加入甲醇10ml，制成浓度为0.5mg/ml的对照品贮备液 2015 年版《中国药典》第四部通则 0502 薄层色谱法进行实验，分取供试品溶液及对照品溶液约半管（吸样毛细管），用点状方式点样别点于同一硅胶 GF254薄层板上，以体积比正丁醇-冰醋酸-纯水（4：1为展开剂展开，展距约 7cm 时取出，晾干，置 254nm 的紫外光下供试品溶液及对照品溶液并进行 TLC 实验，供试品色谱中，在与对薄层色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，结果见图 1-22。

【参考文献】