菟丝子醇提物对绝经后骨质疏松症大鼠miR-21-5p、FasL表达的影响

发布时间：2020-08-19 12:18

【摘要】：【目的】通过检测菟丝子醇提物治疗的绝经后骨质疏松症大鼠模型股骨组织miR-21-5p和FasL表达水平,探究菟丝子醇提物对绝经后骨质疏松症的影响及可能存在的分子机制。【方法】将100只雌性SPF级SD大鼠随机分为10组,其中2月龄大鼠10只,6月龄大鼠90只,即2月龄正常组、6月龄正常组、假手术组、模型组、雌激素组、阿仑膦酸钠组、菟丝子提取物组、菟丝子醇提物低、中、高剂量组,除2月龄正常组适应性饲养两周后直接取材检测外,其它各组大鼠均在用药12周后取材检测。模型组和用药组采用去卵巢手术造模,假手术组只切除1cm3大小的脂肪组织,正常组不做处理。除2月龄正常组外,各组大鼠从手术后两周末起按0.5ml/100g的灌胃体积开始给药,6月龄正常组、假手术组灌胃生理盐水;菟丝子醇提物低、中、高剂量组灌胃菟丝子醇提物,给药剂量分别为0.7g/kg,1.4g/kg,2.8g/kg;菟丝子提取物组灌胃菟丝子提取物,给药剂量为0.35g/kg;阿仑膦酸钠组灌胃阿仑膦酸钠,给药剂量为6.3mg/kg;雌激素组灌胃己烯雌酚,给药剂量为0.0225mg/kg。上述6月龄组均采用16号灌胃针灌胃给药,阿仑膦酸钠组每周灌胃一次,其它各组每天灌胃一次,用药12周后取材。在用药第12周末,每组选取3只大鼠进行双能X线骨密度检测;取材后观察各组大鼠子宫指数、血浆碱性磷酸酶ALP的变化情况;股骨组织进行HE染色以观察骨小梁变化情况;实时荧光定量法(realtime-PCR)测定大鼠股骨组织miR-21-5p的相对表达量;蛋白免疫印迹法(western blotting)测定大鼠股骨组织FasL蛋白的相对表达量。【结果】1.子宫指数:与6月龄正常组比较,假手术组大鼠子宫指数无明显变化;与假手术组比较,模型组大鼠子宫指数明显下降(P0.05);与模型组比较,雌激素组、菟丝子提取物组、菟丝子醇提物低、中、高剂量组大鼠子宫指数均明显升高(P0.05);与菟丝子提取物组比较,菟丝子醇提物中剂量组大鼠子宫指数无明显变化。2.股骨骨密度:与6月龄正常组比较,假手术组大鼠股骨骨密度无明显变化;与假手术组比较,模型组大鼠股骨骨密度明显降低(P0.05);与模型组比较,雌激素组、阿仑膦酸钠组、菟丝子提取物组、菟丝子醇提物低、中、高剂量组大鼠股骨骨密度均显著增加(P0.05);与2月龄正常组比较,6月龄正常组大鼠股骨骨密度略降低,差异无统计学意义(P0.05)。3.股骨病理形态:与6月龄正常组比较,假手术组无明显变化;与假手术组比较,模型组大鼠骨小梁明显变薄,间隔增宽,互不相连,少量不连续、杂乱游离端、排列不齐,皮质区出现严重的松质骨改变;与模型组比较,雌激素组、阿仑膦酸钠组大鼠骨小梁间距变宽,皮质区松质骨改变不明显;菟丝子提取物组、菟丝子醇提物高剂量组骨小梁间距稍变宽,皮质区松质骨改变较明显;菟丝子醇提物低、中剂量组骨小梁间距变宽,皮质区出现轻微的松质骨改变。4.对血浆碱性磷酸酶ALP的影响:与6月龄正常组比较,假手术组无明显变化;与假手术组比较,模型组大鼠血浆碱性磷酸酶ALP含量略升高(P0.05);与模型组比较,雌激素组、阿仑膦酸钠组、菟丝子提取物组、菟丝子醇提物低、中、高剂量组大鼠血浆碱性磷酸酶ALP含量均有一定程度的升高(P0.05);与2月龄正常组比较,6月龄正常组大鼠血浆碱性磷酸酶ALP含量略降低(P0.05)。5.对miR-21-5p相对表达量的影响:与6月龄正常组比较,假手术组大鼠股骨组织miR-21-5p相对表达量无明显变化;与假手术组比较,模型组大鼠股骨组织miR-21-5p相对表达量明显升高(P0.05);与模型组比较,雌激素组、阿仑膦酸钠组、菟丝子提取物组、菟丝子醇提物低、中、高剂量组大鼠股骨组织miR-21-5p相对表达量均降低,其中雌激素组、菟丝子醇提物低、中剂量组差异显著,结果有统计学意义(P0.05)。6.对FasL蛋白相对表达量的影响:与6月龄正常组比较,假手术组大鼠股骨组织FasL蛋白相对表达量无明显变化;与假手术组比较,模型组大鼠股骨组织中FasL蛋白相对表达量明显升高(P0.05);与模型组比较,雌激素组、阿仑膦酸钠组、菟丝子提取物组、菟丝子醇提物低、中、高剂量组大鼠股骨组织FasL蛋白相对表达量均降低,其中雌激素组、菟丝子醇提物低、中剂量组差异明显,结果有统计学意义(P0.05)。【结论】菟丝子醇提取物可能通过下调大鼠股骨组织内miR-21-5p的表达水平,引起FasL蛋白水平升高,从而达到防治绝经后骨质疏松症的作用。
【学位授予单位】：云南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5
【图文】：

图 1 菟丝子提取物与黄酮菟丝子醇提物黄酮类化合物比例en Cuscutae extract 代表菟丝子提取物，Semen Cuscutae alcohol extract 代表菟丝雌激素的配置

去卵巢手术大鼠

大鼠股骨骨密度注：左图显示大鼠X线影像图；右图显示大鼠股骨绘制区域，1代表右侧股骨，2代表左侧股骨

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本文编号：2797079