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叉分蓼总黄酮提取分离鉴定及安全性初步评价

发布时间:2020-08-21 19:57
【摘要】:目的:叉分蓼是蒙古人民常用的药材,以其根部和全草入药。其味酸、苦、涩,性凉、稀、轻、糙、钝,具有清热,止泻之功效,经配伍后还可治疗肠炎、痢疾、呕吐、骨质疏松、水火烫伤及多种肿瘤,临床效果显著,除了应用于组方中,还作为民间常见野菜,也有望开发成饮品,但作为药材来讲鲜有文章报道其食用的安全性。因此本论文以蒙药材叉分蓼为研究对象,采用回流提取技术从叉分蓼中提取黄酮类化合物,对其提取、纯化工艺进行优化,并对分离得到的黄酮类化合物进行结构鉴定;并对其进行体内的经口急性毒性和重复剂量短期毒性研究,为叉分蓼进一步开发的必要性提供试验依据,为解决蒙药材资源短缺问题和可持续发展尽绵薄之力。方法:以TFP含量和TFP纯度作为考察指标,采用单因素实验结合Box-Behnken中心组合设计方法分别优化叉分蓼中总黄酮的提取、纯化工艺;对经纯化后的TFP以柱层析法进行分离,得到单体化合物,并且采用UPLC-MS/MS技术确定单体化合物结构。采用小鼠经口急性毒性实验及大鼠重复剂量28天经口毒性实验对叉分蓼提取物的体内安全性进行评价。结果:确定的最佳提取工艺为:乙醇浓度70%,料液比1:10,提取时间2.2 h,提取温度74℃,TFP得率为2.42±0.05%;最佳纯化工艺为:叉分蓼提取液22 mL,调pH为5,以2 mL/min的流速用65%的乙醇进行洗脱,纯化后TFP的纯度为39.88%±0.19%。之后采用UPLC-MS/MS技术综合软件数据库及文献报道确定单体化合物结构,TFP主要由7种黄酮类化合物组成,分别为槲皮素,杨梅素,山奈酚,扁蓄苷,金丝桃苷,异槲皮苷及芸香苷。急性毒性试验中各剂量组小鼠行为、活动、饮食、排泄等均未见明显异常。体重变化空白组和对照组也无显著差异(p0.05),解剖观察小鼠的重要脏器(心、肝、脾、肺、肾)外形颜色、大小比例等也未见异常,试验期间未出现小鼠死亡情况,根据急性毒性剂量分级表数值判定叉分蓼实际无毒;在重复剂量28天经口毒性实验中,大鼠的精神活动状态,进食饮水以及排泄等均未发现异常,体重、主要脏器指数变化差异不显著(p0.05),28天内未出现大鼠死亡情况,血液学指标及血生化指标与阴性对照组比较均无显著性差异(p0.05)。结论:蒙药材叉分蓼主要含有黄酮类成分,叉分蓼未见急性毒性与短期毒性,说明其在正常给药剂量下是基本安全的,是可以利用的优质的蒙药资源。
【学位授予单位】:黑龙江中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:R284;R285
【图文】:

叉分蓼,全草,传统药,民族医药


发展民族医药产业不仅也是我国传统药产业应对性需求[62]。蒙医药历史分,也被评为国家级非物,对常见病及多发病的疗关注与重视。然而,由于,还是在研发上,都相对要意义,而且具有广阔的aceae)蓼\l(Polygonum草入药,是蒙古族人民常土,夏、秋二季采收其全阴山山脉、兴安北部及南、住宅附近及路旁,多零

黄酮类化合物


黑龙江中医药大学硕士学位论文、丙氨酸、精氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、胧、酪氨酸等。其中微量元素有 Mg、P、KAl、Si、Mo、Co、Mn 等,维生素有抗坏机酸有:苹果酸、柠檬酸、琥珀酸等[19]。进展vonoids)在自然界中广泛存在,其基本结链结构的氧化程度及饱和程度、B 环的连黄酮类(flavones)、黄酮醇类(flavonols)、异黄酮(isoflavone)、查尔酮(chalcones)和花

标准曲线,总黄酮测定,标准曲线,叉分蓼


酮含量测定方法准曲线的绘制2.3.2 项下所述进行试验,如图 2-1,所得回归方程为:y=29.175,表明在浓度为 0.008~0.024mg/ml 范围内具有良好的线性关系。表 2-7.叉分蓼提取液浓度与吸光度Table 2-7. Polygonum divaricatum L. extract concentration and absorbance准溶液 ml 浓度 mg/ml 吸光度(平均1.0 0.008 0.2241.5 0.012 0.3592.0 0.016 0.4502.5 0.020 0.5723.0 0.024 0.701

【参考文献】

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本文编号:2799796

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