益肾通络方对膜性肾病大鼠肾保护作用及对Ezrin和Synaptopodin蛋白表达的影响
发布时间：2020-08-23 13:07
【摘要】：目的:通过动物实验,观察不同剂量益肾通络方对膜性肾病大鼠一般情况、生化指标及肾脏病理的影响,为临床治疗膜性肾病提供理论依据。方法:1.选用健康雄性SD大鼠60只,适应性喂养1周后,测24小时尿蛋白定量(24-hour urinary total Protein,24hUTP)均阴性(5mg),随机分为正常组(NG)10只,造模组50只。2.造模组用尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白建立膜性肾病模型,结束后,测24hUTP,造模成功。3.造模组大鼠随机分为模型组(MG)、西药组(BG)、中药低剂量组(ZLG)、中药中剂量组(ZMG)、中药高剂量组(ZHG),每组各10只。4.中药组予益肾通络方(6.61g/kg/d、13.22g/kg/d、26.44g/kg/d)灌胃治疗,西药组予盐酸贝那普利(10 mg/kg/d),模型组和正常组予等容量蒸馏水,连续4周。5.观察大鼠一般情况,治疗4周末测24hUTP,腹主动脉取血,测血生化指标,留取肾组织,光镜、免疫荧光、电镜观察大鼠肾脏病理变化,免疫组化、real-time PCR检测Ezrin、Synaptopodin在肾脏中的表达。结果:1.一般情况与NG比较,MG大鼠毛发欠光泽、精神萎靡、反应迟钝、摄食减少等,部分有腹部水肿。与模型组相比,各治疗组大鼠情况好转。2.各组大鼠24h-UTP比较模型组24h-UTP较NG明显升高(P0.05)。各治疗组较MG显著降低(P0.05);与BG比较,ZLG偏高(P0.05),ZMG、ZHG无明显差异(P0.05);与ZLG相比,ZMG、ZHG下降明显(P0.05)。3.各组血生化指标比较与NG相比,模型组TP、ALB明显降低,TC和TG均明显升高(P0.05)。与MG相比,各治疗组TP、ALB明显升高,TC、TG明显降低(P0.05);与BG比较,ZLG的TP、ALB偏低,TC、TG偏高(P0.05),ZMG、ZHG差异不明显(P0.05);与ZLG比较,ZMG、ZHG升高TP、ALB,降低TC、TG效果较明显(P0.05);各组大鼠之间BUN、Scr差异无统计学意义(P0.05)。4.各组大鼠肾脏病理变化NG大鼠肾小球结构形态无明显改变。MG大鼠光镜下肾小球上皮下嗜复红蛋白沉积,基底膜弥漫增厚,钉突形成;治疗组病理改变轻微。免疫荧光:NG肾小球无荧光表现;MG见lgG、C3呈颗粒状沿毛细血管袢弥漫性沉积,荧光强度明显;治疗组荧光强度较弱。电镜显示:NG足突清晰、排列整齐;MG基底膜弥漫增厚,上皮下大量电子致密物沉积,足突广泛融合或消失,钉突形成。治疗组较模型组,病理改变轻微。5.免疫组化NG:ezrin、synaptopodin均主要表达于肾小球,沿毛细血管袢呈点线状分布,ezrin在肾小管中少量表达。与NG相比,MG二者表达均减弱(P0.05);各治疗组与MG相比,二者表达增强(P0.05);与BG比较,ZLG中二者的表达偏弱(P0.05),ZMG、ZHG差异不显著(P0.05);与ZLG比,ZMG、ZHG的表达较强(P0.05)。6.Real-time PCR与NG相比,ezrin、synaptopodin mRNA在MG的表达水平均下调(P0.05);各治疗组与MG相比,二者的表达均上调(P0.05);与BG比,ZLG中二者的表达水平偏低(P0.05),ZMG、ZHG差异不明显;与ZLG比较,ZMG、ZHG的表达水平较高(P0.05)。结论:1.益肾通络方可明显升高膜性肾病大鼠的TP、ALB水平,显著降低膜性肾病大鼠的24hUTP、TC、TG水平。2.益肾通络方可以抑制膜性肾病大鼠肾小球基底膜免疫复合物沉积及基底膜增厚,可减少足突融合等肾脏病理损伤。3.益肾通络方可能通过上调膜性肾病大鼠肾组织ezrin、synaptopodin蛋白及ezrin、synaptopodin mRNA的表达,从而减轻足细胞损伤,减少蛋白尿,保护肾组织,延缓膜性肾病进展。
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5
【图文】：
图 1 24 小时尿蛋白定量 图 2 各组血总蛋白和白蛋白Fig.1 The 24h-UTP in six groups Fig.2 The TP andALB in six groups图 3 血总胆固醇和甘油三酯 图 4 血尿素氮和血肌酐Fig.3 The TC and TG in six groups Fig.4 The BUN and Scr in six group
图 1 24 小时尿蛋白定量 图 2 各组血总蛋白和白蛋白Fig.1 The 24h-UTP in six groups Fig.2 The TP andALB in six groups图 3 血总胆固醇和甘油三酯 图 4 血尿素氮和血肌酐Fig.3 The TC and TG in six groups Fig.4 The BUN and Scr in six group
图 3 血总胆固醇和甘油三酯 图 4 血尿素氮和血肌酐Fig.3 The TC and TG in six groups Fig.4 The BUN and Scr in six group图 5 ezrin、synaptopodin 免疫组化结果 图 6 ezrin、synaptopodinPCR 结果Fig.5 The Immunohistochemical results Fig.6 The real-time PCR results oof Ezrin and Synaptopodin Ezrin and Synaptopodin
本文编号：2801561
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5
【图文】：
图 1 24 小时尿蛋白定量 图 2 各组血总蛋白和白蛋白Fig.1 The 24h-UTP in six groups Fig.2 The TP andALB in six groups图 3 血总胆固醇和甘油三酯 图 4 血尿素氮和血肌酐Fig.3 The TC and TG in six groups Fig.4 The BUN and Scr in six group
图 1 24 小时尿蛋白定量 图 2 各组血总蛋白和白蛋白Fig.1 The 24h-UTP in six groups Fig.2 The TP andALB in six groups图 3 血总胆固醇和甘油三酯 图 4 血尿素氮和血肌酐Fig.3 The TC and TG in six groups Fig.4 The BUN and Scr in six group
图 3 血总胆固醇和甘油三酯 图 4 血尿素氮和血肌酐Fig.3 The TC and TG in six groups Fig.4 The BUN and Scr in six group图 5 ezrin、synaptopodin 免疫组化结果 图 6 ezrin、synaptopodinPCR 结果Fig.5 The Immunohistochemical results Fig.6 The real-time PCR results oof Ezrin and Synaptopodin Ezrin and Synaptopodin
【参考文献】
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本文编号：2801561
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