鹿茸多肽提取工艺的优化及抗氧化、促愈合功效的研究

发布时间：2020-08-28 16:07

【摘要】：鹿茸,是梅花鹿或马鹿的雄鹿未骨化而带茸毛的幼角,含磷脂、糖脂、脂肪酸、蛋白质等成分,具有免疫调节、防癌、抗骨质疏松、抗炎等多种药理活性。近些年来,因天然多肽类成分在皮肤抗衰老产品中的应用变得广泛,使天然多肽越来越受到关注。因此,本课题以提取鹿茸中生物活性多肽为切入点,以不同组份多肽的抗氧化活性、促细胞增殖及促胶原蛋白分泌为筛选条件,获得能够促进小鼠成纤维细胞(NIH/3T3)增殖和胶原蛋白分泌的鹿茸多肽,并进行机制研究,旨在提高鹿茸多肽的提取率,体现鹿茸的药用价值,对鹿茸进一步开发利用具有指导性意义。主要研究内容和结果如下:1、以鹿茸为原料,采用超声提取法对鹿茸多肽提取进行单因素考察及响应面优化的实验设计,最终获得鹿茸多肽的最佳提取工艺为:超声时长46min,pH值5.8,料液比15倍,乙醇浓度46%。2、将通过Sephadex G-25除盐后的鹿茸多肽通过膜分离技术得到1-3kDa、3-5kDa、5-10kDa三段鹿茸多肽,利用MALDI-TOF-MS确定其分子量。3、分别通过抗氧化、NIH/3T3增殖及胶原蛋白分泌实验检测鹿茸多肽的活性。实验结果表明,与空白组比较,1-3kDa的鹿茸多肽的抗氧化能力最好,3-5kDa的鹿茸多肽的促NIH/3T3细胞的增殖效果最好,5-10kDa的鹿茸多肽的促胶原蛋白分泌的效果最好。4、对1-10kDa的鹿茸多肽进行NIH/3T3增殖能力和胶原蛋白分泌的影响及机制研究。与对照组相比,1-10kDa的鹿茸多肽能够促进NIH/3T3细胞的增殖,促进胶原蛋白的分泌及细胞划痕的愈合;Western blotting法和免疫荧光法检测NIH/3T3细胞的p-ERK1/2和TGF-β_1表达均增加,说明其机理可能是通过激活ERK1/2的磷酸化和TGF-β_1的表达实现。
【学位授予单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R284;R285
【图文】：

图 1.1 料液比对鹿茸多肽提取的影响1 Effect of material-liquid ratio on extraction of pilose antl鹿茸多肽含量的影响 确定料液比条件为 1：12，固定 pH 值为 5、超声时不同的乙醇浓度对多肽含量的影响。将该不同条。由图 1.2 可知，鹿茸多肽含量随着乙醇浓度的增，在乙醇浓度为 60%时达到最高，故采用乙醇浓2。

图 1.1 料液比对鹿茸多肽提取的影响 of material-liquid ratio on extraction of pilose antler p肽含量的影响比条件为 1：12，固定 pH 值为 5、超声时长乙醇浓度对多肽含量的影响。将该不同条件.2 可知，鹿茸多肽含量随着乙醇浓度的增加浓度为 60%时达到最高，故采用乙醇浓度为

图 1.3 pH 值对鹿茸多肽提取的影响Fig.1.3 Effect of pH on the extraction of pilose antler poly对鹿茸多肽含量的影响验分别确定料液比条件为 1:12，乙醇浓度为 60%察不同的超声时长对多肽含量的影响。将该不同条定。由图 1.4 可知，在 10-40 min 时，多肽含量随 min 时又开始缓慢下降，故选用超声时长 40 min 进

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本文编号：2807809