鹅掌柴三萜类成分及其主要药效学研究

发布时间：2020-08-29 10:15

　　五加科鹅掌柴属植物鹅掌柴Schefflera octophylla(Lour.)Harms,广泛分布于华南地区,其茎、叶、根皮及花蜜作为民间药常被用于治疗感冒、疼痛、炎症和保肝等。鹅掌柴的茎和叶是福建省特色中药“七叶莲片”和“七叶莲注射液”的药材基源,但是目前对鹅掌柴的有效成分及药理作用的基础研究还很缺乏。另一方面,随着药材市场需求量不断增长,不仅使野生鹅掌柴资源过度开懫,而且有其它非鹅掌柴来源的药材混入市场,导致药材品质不一,急需建立能客观反映药材质量的评价标准以确保药材质量可控。因此,为深入探索中药鹅掌柴的质量评价方法和有效成分质量标准,实现中药材的科学合理利用,基于前期研究基础,本文着重从以下几个方面进行研究探讨。1.鹅掌柴三萜成分(total triterpenoids of Schefflera octophylla,SOTT,鹅掌柴总三萜化合物)的提取工艺优化及单体化合物的分离鉴定1)在乙醇体积浓度、提取时间、液料比及提取次数四个单因素实验的基础上,通过响应面法对SOTT提取工艺进行优化,并建立数学模型,利用模型方程优化出SOTT提取的最佳工艺参数为乙醇体积浓度80%、提取时间100 min、液料比10:1、提取3次。经实际验证的SOTT最大提取率为2.29%。2)采用反复柱层析及HPLC制备法从SOTT中分离出9个化合物,经过测定理化常数及光谱解析技术鉴定9个均为羽扇豆烷型五环三萜类化合物,其中1个为新化合物,2个为首次从鹅掌柴植物中分离鉴定出来。2.鹅掌柴三萜类有效成分的含量分析与药材评价1)用HPLC法测定不同基源的药材中三种含量丰富且有抗炎活性的三萜化合物(SOT-3:白桦脂酸-3-硫酸酯;SOT-4:南五加萜酸;SOT-8:南五加萜酸-28-O-α-L-鼠李糖基-(1-4)-O-β-D-葡萄糖基-(1-6)-β-D-葡萄糖苷)含量。结果表明:源于鹅掌柴的药材中的三萜化合物的含量均高于其他植物(鹅掌藤、密脉鹅掌柴、广西鹅掌柴)来源的药材,以前未用作药材的鹅掌柴果实中的三种化合物的含量高于茎叶部位。因此,建议SOTT特别是SOT-4可作为考察鹅掌柴药材的质量指标,鹅掌柴果实亦应被推荐为药用。3.鹅掌柴三萜的抗炎、抗肿瘤等主要药效学研究1)体外药效学试验(a)抗炎作用实验利用脂多糖刺激RAW264.7巨噬细胞建立炎症细胞模型,研究SOTT及各个单体对巨噬细胞分泌炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6和炎症介质NO,抗炎因子IL-10的影响。结果显示:SOTT及9个单体化合物均有不同程度的抑制LPS诱导的Raw-264.7细胞释放NO的作用;通过降低细胞中致炎因子IL-1β、TNF-α、IL-6、NO水平和促进细胞抗炎因子IL-10的水平而减轻炎症反应。(b)抗肿瘤作用:用SOTT干预三种肝癌细胞HuH7、HepG2及SMMC-7721后,均呈现细胞活力抑制作用。其机制可能是通过调控Bcl-2家族蛋白的表达诱导而促进肝癌细胞凋亡的。2)体内药效学试验(a)SOTT对CCl_4致小鼠急性肝损伤的保护作用:SOTT能调节肝损伤后的氧化应激状态,减轻损伤后的脂质过氧化,增强肝脏的抗氧化能力,抑制肝损伤效应因子CYP2E1的过度表达。(b)鹅掌柴三萜中分离到的单体SOT-4(HLEDA)对无水乙醇诱导大鼠急性胃溃疡的维护作用实验。SOT-4能减轻无水乙醇导致的大鼠胃黏膜损伤程度,提高血清或组织中GSH、SOD、CAT、GSH-Px、IL-10、NP-SH和PGE2含量或活力,降低MDA、NO、TNF-α和IL-6的水平,增加胃组织中COX-1、COX-2 mRNA表达量和Hsp70、Bcl-2蛋白表达量,降低Bax的蛋白表达量,从而对胃黏膜起维护作用。本研究系统评价了鹅掌柴三萜的药用价值及质量考查标准,为进一步合理开发利用中药鹅掌柴提供了科学依据。
【学位单位】：华侨大学
【学位级别】：博士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R284;R285
【部分图文】：

鹅掌柴,药材,植物,七叶莲

图 1-1 鹅掌柴植物及药材Fig 1-1 Photos of S.octophylla samples根据福建省药品标准（1988 年版）规定，中药“七叶莲片”的标准编Q/WS12-88 中记载如表 1-1:表 1-1 福建省中药药品标准（1988 年版）“七叶莲片”[1]Tab 1-1 Fujian provincial drug standard for Qiyelianpian【处方】七叶莲（药材：鹅掌柴、或或密脉鹅掌柴之茎枝叶） 6【制法】七叶莲干燥叶 6 千克→粉碎；茎枝→第一次水煎 3 小时→第水煎 2 小时→水煎液过滤→滤液→浓缩→提取→叶粉加入适将淀粉混合并造粒，干燥并压制成片剂得七叶莲片 1000 片。【性状】绿褐色，片剂,味略苦。【检查】应符合片剂各项规定【功能与主治】祛风除湿，活血止痛。适用于各种疼痛，风湿，神经痛，胃

七叶莲,注射液,制剂,标签

图 1-2 七叶莲制剂（注射液）标签Fig 1-2 Pictures of Qiyelian injection labels另外，七叶莲注射液曾以医院门诊部自制制剂的形式出现，用于治疗风湿骨痛、胃痛、腹痛、外伤疼痛及各种神经性疼痛。1.2 鹅掌柴化学成分及药理作用研究概述1.2.1 三萜类迄今为止，已从鹅掌柴中分离出49个三萜类单体化合物，且均为五环三萜类化合物（Pentacyclic Triterpenoids，PTs）。按化合物结构类型，有lupane-typ（羽扇豆烷型）、oleanane-type（齐墩果烷型）和ursane-type（乌苏烷型）等三类，骨架结构见图1-3 ～ 1-5。1.2.1.1 羽扇豆烷型

诱导细胞凋亡,作用机制,野鸦,醇酸

图 1-6 白桦酸诱导细胞凋亡作用机制[50]Fig 1-6 The mechanism of apoptosis induced by betulinic acidden 等[51]实验证实了姜黄素和 3-乙酰基-11-酮-β-乳香脂酸（AKBA瘤细胞增殖，诱导细胞凋亡并阻止细胞周期，诱导细胞周期相表达量上调、致癌性 miR-27a 表达量下调，从而可以抑制大鼠体抗新生血管形成n 等[52 ]等人它还可以抑制牛动脉内皮细胞的增殖。坡模醇酸（ PPA）是从野鸦椿提取分离得到的一种五环三萜酸，它可以下调乳CR4 蛋白的表达并阻止肿瘤的迁移；发现熊果酸和齐墩果酸均能血管生成的活化、增殖、迁移及小管形成的各个阶段，亦能抑皮细胞增殖。坡模醇酸（Pomolic acid, PA）是从野鸦椿提取分环三萜酸，可以下调乳腺癌细胞内 CXCR4 蛋白表达，防止肿瘤

【参考文献】