引经药物介导三七对大鼠慢性肾纤维化的作用研究

发布时间：2020-09-01 07:18

　　 目的:“引经归经”理论是中医方药学药性理论体系构成之一,归经即药物对机体某些脏腑经络的特殊性选择作用,引经即可以引导与之同用的其他药物直达其归属脏腑经络。据此可推断出引经药物具有潜在的靶向作用。本研究拟探讨引经药物介导抗肾纤维化中药三七对慢性肾脏病(Chronic kidney disease,CKD)模型大鼠肾脏纤维化的作用及其机制。方法:依据中医“引经归经”理论,将120只雄性SD大鼠随机分为:正常对照组(Normal control group,NOR,n=20)、慢性肾脏病模型组(CKD,n=20)、三七组(radix notoginseng group,RN,n=20)、三七联合引肺经药物组:三七桔梗组(radix notoginseng plus platycodi group,RNP,n=20)、三七联合引肾经药物组:三七肉桂组(radix notoginseng plus cinnamon group,RNC,n=20)、三七联合引血下行药物组:三七牛膝组(radix notoginseng plus radix cyathula group,RNR,n=20)。除正常对照外,其余5组均采用阿霉素联合腺嘌呤制作CKD大鼠模型,建模成功后,RN组予以中剂量三七、RNP组予以中剂量三七及等量桔梗、RNC组予以中剂量三七及等量肉桂、RNR组予以中剂量三七及等量牛膝干预CKD大鼠,NOR组和CKD组连续4周予以同等体积生理盐水灌胃。药物干预2,4周后收集尿液,检测24小时尿蛋白定量;4周后处死大鼠,测定血肌酐(Serum Creatinine,Scr)、尿素氮(Blood Urea nitrogen,bun)水平,取肾脏组织做苏木素-伊红染色(hematoxylin euphorbiastaning,he)、马松染色(massonstaning,masson)观察各组大鼠肾脏组织病理学改变,应用酶联免疫吸附法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,elisa)检测各组大鼠血清、尿液中转化生长因子(transformgrowthfactor,tgf-β)含量,应用免疫组织化学法检测肾组织纤连蛋白(fibronectin,fn)、层粘连蛋白(laminin,ln)表达,用蛋白质印迹(westetnblot,wb)检测肾脏组织tgf-β、平滑肌肌动蛋白(ɑ-smoothmuscleactin,ɑ-sma)表达。结果:与正常对照大鼠相比,ckd大鼠24小时尿蛋白定量明显增多(p0.01),肾功能减退,血scr(p0.01),bun(p0.01)显著升高,肾脏胶原的沉积增多(p0.05),肾间质出现严重纤维化表现,血清、尿液中tgf-β含量显著增多(p0.05),肾组织tgf-β(p0.01)、ɑ-sma(p0.01)、fn、ln表达显著升高。相较与模型组,药物干预后肾功改善,血scr(p0.01),bun(p0.01)显著降低,肾组织病理损伤程度减轻,胶原的沉积明显减少(p0.05),肾间质纤维化程度降低,血液中、尿液中tgf-β含量呈现不同水平降低,肾组织ɑ-sma(p0.05)、tgf-β(p0.05)、fn、ln表达有所回降。加用引肾经药物的rnc组和rnr的作用明显优于三七组和三七加非引肾经药物。结论:引经药物介导三七均能不同程度增强三七作用,延缓阿霉素联合腺嘌呤所致慢性肾脏病模型大鼠肾间质纤维化,机制是下调tgf-β信号转导通路。研究证明引足少阴肾经药物、引血下行药物具有潜在的肾脏药物靶向作用。
【学位单位】：西南医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2017
【中图分类】：R285.5
【部分图文】：

结 果1 慢性肾脏病大鼠模型评估1.1 阿霉素联合腺嘌呤对大鼠一般情况的作用正常对照（NOR 组）大鼠被毛光滑，柔顺，反应机敏，积极饮食，水，无消瘦，腹泻；慢性肾脏病模型（CKD 组）大鼠逐渐出现被毛粗糙掉毛，反应迟钝，进食少，饮水明显增多，活动减少，尿量明显增多部分大鼠尾巴出现红肿溃烂，腹泻，睾丸及四肢水肿，体重进行性下降9 周与 8 周体重差值 t 值：3.947（P<0.01），10 周与 9 周体重差值 t 值5.126（P<0.01），11 周与 10 周体重差值 t 值: 4.714（P<0.01）（见图 1）

.2 阿霉素联合腺嘌呤对大鼠 24 小时尿蛋白定量的影响阿霉素联合腺嘌呤造模 4 周，8 周后，CKD 大鼠 24 小时尿蛋白定量 NOR 大鼠明显增多，第 l 周 t 值：0.001 (P<0.01)，第 4 周 t 值：36.244(P<0.01)，第 8 周 t 值：-20.347 (P<0.01)，24 小时尿蛋白量>100mg/d随造模时间延长显著增多，正常对照组 F 值：0.825 (P<0.01) ，慢性肾病组 F 值：342.534 (P<0.01)（见图 2）。

阿霉素联合腺嘌呤对健康雄性SD大鼠肾脏形态的影响

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本文编号：2809430