脾瘅宁对IGR大鼠胰岛素抵抗及IRS-1酪氨酸磷酸化的影响

发布时间：2020-09-10 08:11

　　 目的:探讨中药复方脾瘅宁对糖调节受损大鼠胰岛素抵抗及骨骼肌细胞中胰岛素受体底物1酪氨酸磷酸化的影响。材料与方法:将100只日龄为60-70天的SPF级Wistar雄性大鼠随机抽取20只作为正常对照组,其余80只作为葡萄糖调节受损造模组,分别喂以基础饲料和高糖高脂饲料,所有大鼠均自由进食水,相对湿度保持在30%-70%,室温控制在18-20℃。喂养12周后对造模组大鼠进行糖耐量试验(OGTT)试验,确定葡萄糖调节受损造模成功后,将造模组中达到葡萄糖调节受损标准的模型大鼠再次随机分成三次,分别为模型组、脾瘅宁治疗组及二甲双胍治疗组。在4组大鼠中每组随机选取6只大鼠进行体重、空腹血糖(FBG)及OGTT2h后血糖测量,并通过正常血糖-高胰岛素钳夹技术中葡萄糖输注速率(GIR)来评价胰岛素抵抗情况,过量麻醉法处死大鼠。每组其余大鼠分别以5ml·kg-1·d-1的蒸馏水、5ml·kg-1·d-1的蒸馏水、10g·kg-1·d-1脾瘅宁汤剂、150mg·kg-1·d-1二甲双胍悬液持续4周经口灌胃给药,均为平均每日1次,治疗后在各组大鼠随机选取6只,行上述相同的操作,后处死大鼠,取出大鼠后肢骨骼肌,-70℃冻存,用蛋白质免疫印迹(western-blot)技术测骨骼肌细胞中酪氨酸磷酸化IRS-1的蛋白表达水平,并分析IRS-1酪氨酸磷酸化水平与胰岛素抵抗之间的相关性。实验结束时,处死所有大鼠。结果:1.对实验大鼠胰岛素抵抗情况的评估:药物干预前,模型对照组、脾瘅宁组及二甲双胍治疗组大鼠葡萄糖输注速率均明显低于正常对照组(P0.01),且三组间GIR均无显著性差异(P0.05);药物干预后,脾瘅宁组及二甲双胍组大鼠GIR均明显低于正常对照组(P0.01),但均明显高于模型对照组(P0.01),且两组间GIR无显著性差异(P0.05)。2.对实验大鼠骨骼肌细胞中IRS-1酪氨酸磷酸化的评估:脾瘅宁组及二甲双胍组大鼠骨骼肌细胞中IRS-1酪氨酸磷酸化水平均低于正常对照组(P0.01或0.05),但均高于模型对照组(P0.01或0.05),且脾瘅宁治疗组与二甲双胍治疗组之间无显著性差异(P0.05)。3.胰岛素抵抗与骨骼肌细胞中受体底物1酪氨酸磷酸化程度之间的相关性:骨骼肌中受体底物1酪氨酸磷酸化程度与GIR呈显著正相关(r=0.762)。结论:1.脾瘅宁可以明显改善糖调节受损模型大鼠胰岛素抵抗的情况。2.脾瘅宁可以显著增加糖调节受损模型大鼠骨骼肌细胞中IRS-1酪氨酸磷酸化水平。3.脾瘅宁可以通过增加糖调节受损模型大鼠骨骼肌细胞中IRS-1酪氨酸磷酸化水平来改善糖调节受损大鼠胰岛素抵抗的情况
【学位单位】：辽宁中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R285.5
【部分图文】：

且两组间骨骼肌细胞中 IRS-1 酪氨酸磷酸化程度无显著性差异（P>0.05），见表 7、图1。此结果表明脾瘅宁及二甲双胍均能提升骨骼肌细胞中 IRS-1 酪氨酸磷酸化蛋白表达水平，且二者治疗效果相当。药物干预后线性分析结果显示：骨骼肌细胞中 IRS-1 酪氨酸磷酸化程度与 GIR 呈正相关（r=0.762），见下图 2，说明胰岛素抵抗程度与骨骼肌细胞中 IRS-1 酪氨酸磷酸化程度之间存在线性关系。脾瘅宁及二甲双胍均能够提升骨骼肌细胞中 IRS-1 酪氨酸磷酸化程度，从而改善胰岛素抵抗。表 7 各组大鼠间骨骼肌细胞中 IRS-1 酪氨酸磷酸化比较（ x±s）组别 N 给药后正常对照组模型对照组脾瘅宁治疗组6660.46±0.740.20±0.40**0.36±0.06△二甲双胍治疗组 6 0.31±0.62**△△注：与正常对照组比较，**P<0.01；与模型对照组比较，△P<0.01，△△P<0.05。

酪氨酸磷酸化的IRS-1与GIR的相关性散点图

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本文编号：2815587