网络药理学探究神效瓜蒌散治疗乳腺癌作用机制

发布时间：2020-09-12 21:10

　　 目的:通过网络药理学探究神效瓜蒌散治疗乳腺癌的机制。方法:1、选取SKBR-3乳腺癌细胞,加入0μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、300μg/ml和400μg/ml等不同剂量神效瓜蒌散水提物,使用台盼蓝法连续计数6天观察神效瓜蒌散水提物对SKBR-3乳腺癌细胞增殖的影响。2、选取SKBR-3乳腺癌细胞,实验分组同上,培养72h,采用MTS实验的方法观察神效瓜蒌散水提物对乳腺癌细胞增殖的影响。3、选取SKBR-3乳腺癌细胞,实验分组同上,通过划痕实验观察神效瓜蒌散对乳腺癌细胞迁移的影响。4、网络药理学分析,从TCMSP数据库、TCMID数据库等数据库获得神效瓜蒌散的有效成分和相应靶点,通过网络数据库TTD和相关文献中获得乳腺癌的发病和治疗靶点,通过Cytoscape软件制作对应中药的成分-靶点网络图,预测神效瓜蒌散作用于乳腺癌的机制。5、通过Western blot检测经神效瓜蒌散处理过的乳腺癌SKBR-3细胞的ERα蛋白表达情况,以验证网络药理学预测的神效瓜蒌散作用于乳腺癌的机制。结果:1、台盼蓝法结果不同剂量神效瓜蒌散(0μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、300μg/ml和400μg/ml)作用于乳腺癌SKBR-3细胞后,可以看见从50μg/ml的浓度细胞数目就开始减少,且在第3天细胞数目开始明显减少,并呈剂量、时间依赖性(P0.05)。2、MTS实验结果不同剂量神效瓜蒌散(0μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、300μg/ml和400μg/ml)作用于乳腺癌SKBR-3细胞72h后,发现随着神效瓜蒌散浓度的增加,OD值呈剂量依赖性下降(P0.05)。3、划痕实验结果不同剂量神效瓜蒌散(0μg/ml、100μg/ml、200μg/ml)作用于乳腺癌SKBR-3细胞24h后,发现随着神效瓜蒌散浓度的增加,各加药组细胞迁移的距离明显减少。4、网络药理学神效瓜蒌散的瓜蒌、甘草、当归、乳香和没药5个成分,通过TCMSP数据库、TCMID数据库等数据库筛选到有效成分265个和相关靶点2305个,乳腺癌通过TTD数据库和相关文献筛选到靶点一共121个,通过Cytoscape软件构建的神效瓜蒌散成分靶点网络可以推测神效瓜蒌散通过ER、HSP90、PTGS2等靶点作用于乳腺癌发挥其抗肿瘤作用。5、Western blot实验通过Western blot实验观察到加入不同浓度的神效瓜蒌散(0、100、200μg/m L)后,随着药物剂量的增加,ERα逐渐减少(P0.05)。结论:1、神效瓜蒌散能够在体外抑制乳腺癌细胞SKBR-3的增殖和迁移。2、神效瓜蒌散可能主要通过抑制ER内分泌、炎症等通路治疗乳腺癌。
【学位单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R285
【部分图文】：

天津医科大学硕士学位论文细胞的增殖具有抑制作用，并且呈剂量、时间依赖性。1.2.3 划痕实验结果 为了初步探索神效瓜蒌散对乳腺癌 SKBR-3 细胞迁移的影响，本研究采用了划痕实验的方法。划痕实验设置了对照组、不同剂量神效瓜蒌散（100μg/ml、200μg/ml）组，在乳腺癌 SKBR-3 细胞加入上述不同浓度组的神效瓜蒌散培养 24 后，拍照实验结果见图 3，从图中可以看出对照组的乳腺癌SKBR-3 细胞迁移距离最少，随着神效瓜蒌散剂量的增加乳腺癌 SKBR-3 细胞迁移距离相应增加，由此可以得出神效瓜蒌散可以抑制乳腺癌 SKBR-3 细胞细胞迁移，并且呈剂量依赖性。

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本文编号：2817928