黄藤生物碱片剂制备工艺、质量标准及抗阿尔茨海默症作用研究

发布时间：2020-09-19 08:54

　　本文对中药黄藤生物碱片进行了深入系统研究,包括黄藤生物碱提取工艺、黄藤生物碱片制备工艺、片剂质量标准和稳定性检测以及制剂对阿尔茨海默症模型小鼠的药理作用,为抗阿尔茨海默症五类新药开发提供新的研究思路。以黄藤素和药根碱为指标性成分对黄藤总生物碱的提取工艺进行研究,采用HPLC法以黄藤中盐酸巴马汀和药根碱的含量之和为指标,通过CCD响应面法确定最佳提取工艺条件。将所取得的黄藤生物碱与适宜辅料混匀,采用粉末直接压片法进行压片,通过单因素考察其填充剂用量比例、压片压力、崩解剂用量及润滑剂的用量,来确定最佳片剂制备工艺,并对制剂进行质量标准研究及稳定性考察。采用ELISA法检测黄藤生物碱片剂对D-半乳糖联合AlCl_3所致AD模型小鼠血液中MDA、SOD、CAT、NO含量及脑匀浆中的AchE、ChAT、GSH-PX和P-Tau活性的影响。实验优选得到黄藤总生物碱最佳提取工艺条件为:乙醇体积分数55%,液料比10:1,加热回流提取3次,每次1.8 h。黄藤生物碱片的最佳制备工艺条件为:黄藤生物碱用量占片剂比例的34%,选用预胶化淀粉和微晶纤维素作为片剂的填充剂,预胶化淀粉用量占片剂比例的40%,微晶纤维素用量占片剂比例的20%,选用羧甲基淀粉钠和低取代羟丙基纤维素作为崩解剂,羧甲基淀粉钠用量占片剂比例的3%,低取代羟丙基纤维素用量占片剂比例的2%;润滑剂硬脂酸镁占片剂比例的0.8%。将黄藤生物碱与辅料混合均匀后,在8~9kn压片压力下制片。采用薄层色谱法对黄藤生物碱片中黄藤素和药根碱进行鉴别,检视下得到清晰斑点,通过HPLC法测定制剂中黄藤素和药根碱的含量,初步建立了黄藤生物碱片质量评价方法。并对黄藤生物碱片进行了高温试验、高湿试验、加速试验和长期试验,对制剂性状、薄层鉴别、硬度、脆碎度、崩解时限及有效成分含量进行考察,结果表明各项指标均符合要求,初步确定黄藤生物碱片剂有效期为1年。在对D-半乳糖联合AlCl_3所致AD模型小鼠药研究中发现,黄藤生物碱片剂可以提高小鼠Y迷宫自发交替反应率,降低小鼠血清中MDA和NO含量,提高小鼠血清中SOD和CAT活性,并可以抑制AD小鼠脑中AchE活性,降低P-Tau活性,提高脑中ChAT、GSP-PX活性,实验结果表明黄藤生物碱片剂可以改善小鼠的记忆学习能力,提高其抗氧化能力及神经递质活性。综上所述,本文对中药新药黄藤生物碱片剂进行了全面系统研究,以期为抗阿尔茨海默症新药开发提供了新的研究思路。
【学位单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R283.6;R285
【部分图文】：

色谱图,色谱图,定容,盐酸巴马汀

流量 1 mL/min；进样量 10 μL。1.2.1.1 对照品溶液的配制精密称取 2.00 mg 盐酸巴马汀，加甲醇定容于 10 mL 量瓶中，配制成 0.2mg/mL 准品溶液，备用。精密称取 5 .00mg 药根碱，加甲醇定容于 100 mL 容量瓶中，配制成mg/mL 的标准品溶液，备用。分别精密称取两种标准品溶液 1.0 mL 置同一 10 mL 容中混合，加甲醇定容，配制成质量浓度为 0.02 mg/mL 和 0.005 mg/mL 的盐酸巴马汀根碱的混合对照品溶液。1.2.1.2 供试品溶液的制备称取黄藤药材粉末 10.00 g，加入体积分数为 60%的乙醇，液料比 10:1，加热回取 1 h，放冷，过滤，取冷冻干燥提取物 0.50 mg 置于 10 mL 量瓶中，甲醇定容至刻度摇匀，即得。1.2.1.3 专属性考察精密吸取“1.2.1.1”项下混合对照品和“1.2.1.2”项下供试品溶液各 10 μL，通过液相色谱仪进行测定。结果，两者在相同位置处均有吸收，分离度均大于 1.5，理论数不低于 3000。HPLC 色谱图见图 1.1。

黄藤,体积分数,乙醇,和药

79.63 76.90 155.29 99.2179.52 76.90 154.87 99.01藤素721.07 722.31 1441.76 99.8999.38 0.88698.64 722.31 1432.08 100.78703.56 722.31 1411.34 98.98736.26 722.31 1411.63 98.91679.63 722.31 1377.58 98.27712.75 722.31 1427.69 99.45.2 黄藤总生物碱回流提取的单因素试验结果.2.1 乙醇体积分数的影响当乙醇体积分数低于 60%时，黄藤中黄藤素和药根碱的总含有量逐渐增多；当乙数为 60%时，黄藤中黄藤素和药根碱的总含有量最高，且这两种生物碱在提取物含量最大；随着乙醇体积分数的增大，黄藤中黄藤素和药根碱的总含有量减少，取物中所占的百分含量也略微降低；因此，中心组合试验将乙醇体积分数~75%。结果见图 1.2。

黄藤,提取时间,中心组合,总生物碱

图 1.3 液（ml）料（g）比对黄藤总生物碱含量的影响Fig.1.3 Effect of solvent-to-solid on contents of fibrauretinin and jatrorrhizine.3 提取时间的影响藤在加热回流提取 2h 时，总生物碱含有量最高且在提取物中的百分含量最大，时间的延长而降低。分析原因可能是长时间的加热，使得有效成分遭到破坏所致中心组合试验将提取时间设在 1~2.5 h。结果见图 1.4。图 1.4 提取时间比对黄藤总生物碱含量的影响Fig.1.4 Effect of extraction time on contents of fibrauretinin and jatrorrhizine

【参考文献】