马甲子的提取纯化工艺及其特性研究

发布时间：2020-09-28 06:39

　　马甲子(Paliurus ramosissimus(Lour.)Poir)为鼠李科马甲子属植物,主含三萜类,总黄酮和香豆素类成分,用于治疗疮痈溃疡,解毒消肿等。经课题组前期研究发现,白桦脂酸和马甲子素为马甲子中具有较好抗肿瘤活性的化学成分。以该两种成分为指标,首先对半仿生法提取马甲子的各工艺参数进行单因素考察,进一步采用L9(3~4)正交试验进行优化,最终确定提取工艺为:鲜叶粉碎,经5倍量95%乙醇,在pH为2条件下回流提取80 min,药渣继续在pH为8条件下回流提取40 min,合并两次提取液,放冷过滤,浓缩并冷冻干燥成浸膏,结果表明,该工艺稳定可行。经工艺对比,半仿生法优于冷浸法,优于超声法。通过比较不同大孔树脂对白桦脂酸和马甲子素的静态吸附及动态吸附试验,选用AB-8型大孔树脂,并得出最佳纯化工艺参数为:马甲子素浓度16.07μg/mL,白桦脂酸浓度为1023μg/mL,以3 mL/min的速度上样,上样量为0.4 g醇提物/g干树脂,马甲子素和白桦脂酸的吸附率分别为87.1%和82.03%;用900 mL85%乙醇以3 mL/min的速度洗脱,马甲子素和白桦脂酸的洗脱率分别为88.23%和73.52%。相比于醇提物,该有效部位中马甲子素的含量提高了8倍,白桦脂酸的含量提高了5倍,同时,纯化过程除去了大量的色素类成分,使其有效部位的性状也得到改善。现分别对马甲子醇提物、乙酸乙酯部位和有效部位进行体外抗肿瘤活性检测,并对马甲子进一步分离纯化,得到8个单体成分,MTT法检测抗肿瘤活性。结果显示,以白桦脂酸为母核的五环三萜类衍生物马甲子素、马甲子素A、马甲子素B和messagenic acid B均表出较好的抑制肿瘤增殖作用,且存在双取代强于单取代,单取代强于母核的特性。初步建立了马甲子有效部位的质量标准,拟定马甲子有效部位中马甲子素和白桦脂酸的含量分别不少于0.7%和40%,并对3批马甲子有效部位同时进行加速试验及长期稳定性试验考察,结果表明,各项检查均符合规定。
【学位单位】：成都中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2017
【中图分类】：R284.2
【部分图文】：

曲线,白桦脂酸,曲线

马甲子素和白桦脂酸的标准曲线

曲线,溶液,白桦脂酸,成都中医药大学

马甲子素溶液（A）和供试品溶液（B）的DVD图谱

白桦脂酸,图谱,溶液,精密度

D图 1.3 白桦脂酸对照品溶液（C）和供试品溶液（D）的 ELSD 图谱2.1.5 精密度考察精密吸取马甲子素浓度为 0.0031 mg·mL-1和白桦脂酸浓度为 0.402 mg·mL-1的对照品溶液各 10 μL，连续进样 6 次，测定马甲子素和白桦脂酸峰面积的 RSD分别为 1.38%、1.04%，表明仪器精密度良好，数据见表 1.2。表 1.2 精密度测定结果NO. 1 2 3 4 5 6 RSD/%马甲子素峰面积88.6 86.7 85.9 89.2 87.3 87.5 1.38白桦脂酸峰面积1731 1766 1742 1759 1783 1756 1.042.1.6 重复性试验

【参考文献】