基于效应成分体内分布法研究吴茱萸黄芩药对归经与靶向关联性

发布时间：2020-09-29 21:26

　　 [目的]:通过初步探讨吴茱萸和黄芩药对归经和靶向关联性,评价吴茱萸“引经报使”作用性质,为临床上联合用药提供借鉴。[方法]:1.查找并摘录本草文献中有关吴茱萸归经和引经的记载,并作分析及整理。2.运用HPLC分别对不同配伍比例浸膏粉中吴茱萸碱、吴茱萸次碱和黄芩苷定量分析。3.基于效应成分体内分布法评价吴茱萸效应成分归经和靶向关联性,并建立效应成分的UPLC-MS/MS分析方法,计算分析效应成分的组织分布及药时曲线图。4.运用UPLC-MS/MS技术检测不同配伍比例情况下,黄芩苷的血浆浓度动态变化,同时建立黄芩苷的血浆定量分析方法,以血药浓度、药时曲线图和主要药动学参数评价吴茱萸对黄芩苷的体内药动学变化。5.利用UPLC-PDA检测技术检测不同配伍比例情况下,组织内黄芩苷浓度动态变化,同时建立黄芩苷的组织定量分析方法,以组织中黄芩苷含量、药时曲线图,及靶向性分析,评价吴茱萸对黄芩苷的体内靶向影响。[结果]:1.通过对本草文献的搜集、归纳分析,发现吴茱萸归经从高到低分别为:肝脾胃大肠肾肺。吴茱萸的引经多为足厥阴肝经。可见吴茱萸的归经和引经和肝脏的活动密切相关。2.建立吴茱萸碱和吴茱萸次碱、黄芩苷的方法学验证,符合体外检测化学成分的要求,并对不同配比进行含量测定,吴茱萸碱的平均含量为3.12mg · g-1、吴茱萸次碱的平均含量为3.09mg · g-1。吴茱萸和黄芩(0:1)、(1:2)、(1:1)、(2:1)中黄芩苷相对含量为 294.04、199.63、159.17、110.95 mg· g-1。3.建立吴茱萸效应成分的肝组织分析方法,各项达到符合要求。在相同时间点的情况下,吴茱萸次碱的肝组织含量、AUC高于吴茱萸碱。4.建立黄芩苷血浆体内分析方法,满足检测要求。通过对不同配伍比例黄芩苷的血药浓度、药时曲线,发现配伍后在起始时间中血药浓度很明显低于配伍前,存在抑制黄芩苷在小肠上端吸收;其余各个组时间点的血药浓度趋势基本相同。主要药动学参数分析认为配伍后各个组明显改变黄芩苷的达峰时间以及达峰浓度,均向后延长以及变小的趋势。5.建立黄芩苷在肝、肺、肾脏器组织的UPLC分析方法,根据肝、肺、肾组织黄芩苷分布,绘制同一脏器不同配比的药时曲线图,同样得出,在开始时间,配伍后各个组黄芩苷的浓度小于配伍前。并计算不同脏器时间点的AUC进行靶向性评价,配伍后对肝脏没有明显的靶向性作用,对肺和肾有一定的靶向性和选择性作用,吴茱萸对黄芩苷无“引药入肝”的作用。[结论]基于本实验研究结果,吴茱萸通过影响黄芩苷在胃肠道的吸收和影响黄芩苷在肝、肺、肾的分布,继而影响模型药物的靶向性。从相对摄取率、总靶向系数和药物分布效率综合评价,黄芩苷对肝无明显的靶向选择性。说明,吴茱萸对模型药物的肝脏靶向选择性可能是特异性的引导作用,对特定类成分其引导作用,无明显的广谱导向作用。
【学位单位】：贵阳中医学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2017
【中图分类】：R284;R285
【部分图文】：

标准曲线,吴茱萸碱,吴茱萸次碱,混合对

茱萸次碱对照品溶液、供试品溶液经高效液相色谱仪检测，按照“２．１色谱条件”，逡逑进样１0４，测定。结果表明，吴茱萸碱、吴茱萸次碱和杂质分离良好，且在出峰逡逑处无杂质干扰，结果见下图１。逡逑＇＊逦＊？■逡逑Ｔ＊．逦－Ｘ．逡逑？ｚ．逦：逡逑：逦１２逦１逦１逡逑１逦Ａ邋Ａ逦ｉｉ＼逦Ａ逡逑？逦ｉｉ逦－ｉｉ逦－ｉｉ逦ｉｉｉ逦Ｓｉ逦ｉｉ逦＇邋ｄｉ邋＇逦ｉｉ逦￡．逦－ｉｉ逦＾ｉ；逦＇逦ｉｅ邋＇逦＇ｏｒ．逡逑１－Ａ逦ｉ－Ｂ逡逑＊？｜逡逑｜逦２逦＇＇邋＼邋ｉ逡逑ｉｌｌ逦，邋Ａ逦Ｕ逦＿Ａ＿Ａ邋＿邋＿逡逑ｉ＇ｉ逦＇＾Ｓ逦－ｉｔ＇邋ｔｉｌ邋￣Ｓｉ邋＇逦＊ｉ逦＇ｒｗ．逦Ｃ￡逦？；逦－ｉｉ逦－ｉｉ邋＇邋＇邋１邋ａｆｔ邋＂ｉｉｉ逦＇？ｒ逡逑１－Ｃ逦１－Ｄ逡逑图Ｉ吴茱萸的专属性图谱逡逑图１－Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ分别为吴茱萸碱和吴茱萸次碱的混合对照品溶液、吴茱萸碱的对照品溶液、吴茱逡逑萸次碱的对照品溶液、样品供试品溶液（１．吴茱萸碱、２．吴茱萸次碱）逡逑２．４．２标准曲线的制备逡逑精密吸取吴茱萸碱和吴茱萸次碱对照品溶液于量瓶中，加甲醇制成吴茱萸碱逡逑３．２６、６．５２、

吴茱萸碱,线性关系,吴茱萸次碱,吴茱萸

吴茱萸碱、吴茱萸次碱分别为Ｙ＝６９１６６Ｘ－４３９８４（ｒ＝０．９９９６），Ｙ＝５５２３４Ｘ－逡逑３７８５７邋（ｒ＝０．９９９７），表明吴茱萸碱、吴茱萸次碱分别在３．２６？２２．８３邋ｐｇｎｎｒ１、逡逑３．０８￣２１．５６阽Ｔｎｌ－１呈线性关系。逡逑表２吴茱萸破线性关系考察表逡逑浓度（ｆｉｇＭｎｌ－１）逦峰面积逦回归方程逦相关系数（ｒ）逡逑３．２６逦２０１３２６逡逑６．５２逦３９７２７１逡逑９．７８逦６２１８１０逡逑１３．０５逦８５４１８７逦Ｙ＝６９１６６Ｘ－４３９８４逦０．９９９６逡逑１６．３１逦１０８０７３１逡逑１９．５７逦１３０７４６７逡逑２２．８３逦１５４７６７２逡逑１８０００００邋ｒ逡逑

标准曲线,黄芩苷

分别将黄芩苷对照品溶液、供试品溶液经高效液相色谱仪检测，按照“２．１色逡逑谱条件”，进样１0叫，测定。结果表明，黄芩苷和杂质分离良好，且在出峰处无逡逑杂质干扰，结果见图４。逡逑－－逡逑－ａ．逡逑Ｓ．逦ｓ．逡逑－邋１逦＊邋１逡逑６邋＇逦八逦二邋４上邋＿＿逦Ａ逦＿邋＾＿逡逑＂ｆｃｉ邋１１邋＇ｉｔ邋＇邋＇ｉｓ逦－ｉｔ逦ｔＳｉ邋＇邋ｉｔ邋＇逦２￡邋＇逦．‘ｉ逦ｔｉｔ逦Ｍｒ逦ｔ＇ｉ逦？？逦？“逦ｉｆｃ逦Ｈｉ逦ｉ６＾逦ｔｔｉ逦ｔＳｉ逦ｒｗ．逡逑４－Ａ逦４－Ｂ逡逑图４黄芩苷的专属性图谱逡逑图４－Ａ、Ｂ分别为黄芩苷对照品溶液、供试品溶液（１．黄芩苷）逡逑２．４．２标准曲线的制备逡逑精密吸取黄芩苷对照品溶液于量瓶中，加０．２％甲酸甲醇溶液制成黄芩苷６．９４、逡逑１３．８９、２０．８４、２７．７９、３４．７４、４１．６８、４８．６３吨？ｍｒ１—系列不同浓度的黄芩苷对照逡逑品溶液。精密＇吸取１0４，按照“２．１色谱条件”进行检测分析。分别以黄芩苷的进逡逑样浓度（ｐｇｎｎｒ１）邋（Ｘ）为横坐标，相应的峰面积（Ｙ）为纵坐标进行线性回归，逡逑得回归方程Ｙ＝２３４６９Ｘ－２４２８４，邋ｒ＝０．９９９９，表明黄芩苷在６．９４？呈线逡逑性关系。逡逑表１１黄芩苷线性关系考察表逡逑浓度峰面积逦回归方程逦相关系数（ｒ）逡逑６．９４逦１４０８５６逡逑１３．８９逦３０５２１８逡逑２０．８４逦４６０５７７逦Ｙ＝２３４６９Ｘ－２４２８４逦０．９９９９逡逑２７．７９逦６２５４６８逡逑３４．７４逦７９０８１４逡逑４１．６８逦９５０１１５

【参考文献】