酒精性肝损伤引起的肝病(Alcoholic liver disease,ALD)已成为仅次于病毒肝炎的第二大肝病,对于ALD的发病机制及其防治日益引起关注。而长期服用临床药物会产生抗药性和一定毒副作用,因此寻找天然有效保肝药物具有重要意义。玉木耳(Auricularia cornea var.Li.),属担子菌门(Basidiomycota),伞菌纲(Agaricomycetes),木耳目(Auriculariales),木耳科(Auriculariaceae),木耳属(Auricularia),是毛木耳(A.cornea Ehrenb.)的白色变异菌株。本课题以玉木耳多糖(A.cornea polysaccharides,APS)和酶提玉木耳多糖(Enzymatic-extractable APS,EAPS)为研究材料,分析了两种多糖的单糖组成和体外抗氧化能力,检测了酒精诱导的急性肝损伤小鼠模型的体内抗氧化、抗炎症和保肝活性。主要结果如下:(1)气相色谱(Gas chromatograph,GC)分析结果显示,APS含有岩藻糖(Fucose,Fuc)、阿拉伯糖(Arabinose,Ara)、木糖(Xylose,Xyl)、甘露糖(Mannose,Man)、半乳糖(Galactose,Gal)和葡萄糖(Glucose,Glu),其质量分数为9.98%、1.55%、32.7%、11.97%、7.65%和36.15%,摩尔比为5.9:1.0:21.1:6.4:2.3:53.7。EAPS含有岩藻糖、核糖(Ribose,Rib)、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖,其质量分数为7.51%、0.78%、20.53%、7.64%、9.33%和54.21%,摩尔比为8.8:1.0:26.4:8.2:10.0:58.1。傅立叶红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FT-IR)分析结果表明,两种多糖均含有多糖的特征吸收峰,且具有α构型的糖苷键。(2)以羟基、超氧阴离子和DPPH自由基清除率及还原力为指标,分析了APS和EAPS的体外抗氧化性活性,两种多糖均具有一定的抗氧化活性,且EAPS的抗氧化活性强于APS。(3)APS和EAPS对ALD小鼠肝脏修复作用。APS和EAPS能降低小鼠血清中的谷草转氨酶(Aspartate transaminase,AST)和谷丙转氨酶(Alanine transaminase,ALT)的活性,降低肝脏中甘油三酯(Triacylglycerols,TG)水平,缓解脂代谢。还能提高小鼠肝脏中的超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)和过氧化氢酶(Catalase,CAT)活性,增强机体对酒精代谢所产生的自由基的清除能力。抑制脂质过氧化产物丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的生成,降低炎症指标诱导型一氧化氮合酶(Inducible nitric oxide synthase,i NOS)、环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2),肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)和白细胞介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)的活性或水平。增强酒精代谢相关酶乙醇脱氢酶(Alcohol dehydrogenase,ADH)、乙醛脱氢酶(Aldehyde dehydrogenase,ALDH)和细胞色素酶(Cytochrome P4502E1,CYP2E1)的活性。另外,小鼠肝脏组织病理学切片结果显示,在两种多糖的干预下,肝损伤症状得到明显恢复。上述结果表明,APS和EAPS可通过提高机体抗氧化能力,改善脂代谢,减轻炎症反应,缓解酒精代谢等途径降低肝组织的损伤程度,对酒精所致小鼠急性肝损伤有明显保护作用。
【学位单位】:山东农业大学
【学位级别】:硕士
【学位年份】:2019
【中图分类】:R285.5
【部分图文】: 山东农业大学硕士学位论文后即得到 6%的苯酚溶液。将配好的溶液转入棕色溶液:准确称取 0.1g 分析纯葡萄糖(预先在 10mL 作为原液,取 10mL 原液,用去离子水定容到 标准葡萄糖溶液。制:分别取 0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0管中,用去离子水定容至 2mL,2mL 去离子水作空L 苯酚和 5mL 浓硫酸,充分震荡摇匀,室温放置 定 OD 值,以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度为纵得到回归方程 y=0.0158x-0.0061,回归系数 R2=0
山东农业大学硕士学位论文PS 单糖组成分析相色谱图如图 2 所示,鼠李糖、岩藻糖、核糖、阿葡萄糖色谱峰保留时间依次为 5.31min、5.57min、6.in 和 12.03min。
in 和 12.03min。图 2 单糖混标气相色谱Fig. 2 Gas chromatography of monosaccharides standards
【参考文献】
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