霍山石斛多糖分离纯化及其益生作用

发布时间：2020-10-13 20:48

　　 霍山石斛,属兰科植物,药用价值极高。主要含有多糖、氨基酸、多酚、生物碱、黄酮等活性成分。现代药理学研究结果证明,霍山石斛多糖有着提高机体免疫力、预防治疗糖尿病、抗氧化、抗病毒、抗肿瘤、抗菌消炎等功能。本论文通过对霍山石斛多糖分离纯化得到了3种主要多糖组分,研究了其对乳酸菌生理活性的影响,得到了促进乳酸菌生长效果最显著的组分DHP1-2,并对其结构组成方面进行了分析研究,后期对多糖组分DHP1-2益生活性进行了进一步的实验研究。主要研究内容如下:1.霍山石斛多糖的分离纯化霍山石斛干粉经水提、醇沉、脱蛋白、脱色得到粗多糖,然后经DEAE-52纤维素阴离子交换柱和琼脂糖CL-6B凝胶柱进一步纯化得到了三种主要多糖组分,分别命名为DHP1-2、DHP2-1和DHP2-2。DHP1-2的回收率为98.3%,DHP2-1的回收率为25.43%、DHP2-2的回收率为70.3%。对得到的DHP1-2、DHP2-1和DHP2-2三种主要多糖组分的益生活性进行了初步的研究,实验结果表明,DHP1-2对嗜酸乳杆菌的生长促进效果最为明显。初步判定DHP1-2的益生效果最好的组分。2.DHP1-2的组成结构研究通过紫外光谱检测发现多糖组分DHP1-2在260～280nm没有吸收峰,说明DHP1-2中不含核酸和蛋白质等杂质。通过红外检测发现,DHP1-2里含有O-H、C-H、C=O、C-O-C和C-O-H等化学键,且含有β-构型的甘露化吡喃糖昔键。通过高效凝胶过滤色谱法(GPC)检测得到DHP1-2的分子量为1080Da,属于分子量较小的多糖。通过液相色谱进行的单糖成分分析显示多糖组分DHP1-2主要由葡萄糖、半乳糖、甘露糖和阿拉伯糖组成,分别占多糖组分DHP1-2的95.37%、1.78%、0.8%、0.6%。核磁图谱分析得到DHP1-2主要由β构型的糖苷键连接而成。3.DHP1-2对乳酸菌生理活性的影响研究了DHP1-2对嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌两种乳酸菌的生物量、还原糖利用、蛋白质合成、产酸能力以及合成胞外多糖能力的影响,结果显示,DHP1-2可以促进乳酸菌增殖,提高益生菌对碳源的利用效率,促进细胞内蛋白质的合成,提高乳酸菌产酸以及合成胞外多糖的能力。模拟胃液的抗消化实验显示,DHP1-2的最大水解率仅为3.12%,α-淀粉酶水解实验显示,DHP1-2的最大水解率仅为4.91%,表明DHP1-2的抗消化能力较强,可以较好的进入肠道中供益生菌利用。DHP1-2对ABTS自由基和DPPH自由基的清除率分别为73.5%和75%,结果显示出DHP1-2有着较好的抗氧化能力。
【学位单位】：安徽工程大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R284.2
【部分图文】：

，—，?，?，＿，＿??１２?３?４?５??脫蛋白次数??图２－１?Ｓｅｖａｇ法脱蛋白??Ｆｉｇ．２－１?Ｄｅｐｒｏｔｅｉｎｉｚａｔｉｏｎ?ｂｙ?Ｓｅｖａｇ?ｍｅｔｈｏｄ??糖的脱色??孔树脂和活性炭脱色的原理都是吸附作用，是物理脱色的方法，单，最主要的是对霍山石斛多糖的结构不会造成破坏，对霍山石性也不会造成影响。本章实验中选取了活性炭和ＬＸＤ－７６２型大多糖多糖进行了脱色方面的比较。以脱色率以及多糖的损失率为如图２－２所示，活性炭的脱色率和多糖损失率分别为８４．８４％和１６２型大孔树脂的脱色率和多糖损失率分别为６５．５２％和１３．２６％。，活性炭的脱色效果要远远高于ＬＸＤ－７６２大孔树脂，活性炭脱色树脂脱色对霍山石斛多糖的损失率要大，不过两种脱色方法对差较小。综合考虑后认为使用活性炭对霍山石斛多糖进行脱色较

２．４．５三种组份多糖益生实验对比??三种组分多糖对嗜酸乳杆菌的益生实验对比如图２－６所示，在三组多糖组分??添加浓度一致的情况下，添加了?ＤＨＰ１－２和ＤＨＰ２－２的两组对嗜酸乳杆菌生长都??起到促进作用，且添加了?ＤＨＰ１－２的实验组促进嗜酸乳杆菌生长效果最为显著，??添加了?ＤＨＰ２－１的实验组对促进嗜酸乳杆菌生长影响不大。由此次实验初步判定??了霍山石斛多糖组分中益生最好的组分是ＤＨＰ１－２。??１７??

２．４．５三种组份多糖益生实验对比??三种组分多糖对嗜酸乳杆菌的益生实验对比如图２－６所示，在三组多糖组分??添加浓度一致的情况下，添加了?ＤＨＰ１－２和ＤＨＰ２－２的两组对嗜酸乳杆菌生长都??起到促进作用，且添加了?ＤＨＰ１－２的实验组促进嗜酸乳杆菌生长效果最为显著，??添加了?ＤＨＰ２－１的实验组对促进嗜酸乳杆菌生长影响不大。由此次实验初步判定??了霍山石斛多糖组分中益生最好的组分是ＤＨＰ１－２。??１７??
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本文编号：2839689