肾病Ⅰ号方总皂苷对单侧输尿管结扎大鼠肾纤维化的影响

发布时间：2020-10-14 05:00

　　 目的 观察肾病Ⅰ号方总皂苷对单侧输尿管结扎(UUO)大鼠肾纤维化的影响,阐明其抗肾纤维化的作用机制,探索中药复方药效物质基础的研究思路。方法 按照随机数字表法,30只大鼠随机分为5组,即:正常组6只,模型组6只,贝那普利组6只,总皂苷组6只,肾病Ⅰ号方组6只。适应性喂养4日后,除正常组外各组行左侧输尿管结扎术。成功造模后第5天开始灌胃,观察干预后各组大鼠一般情况变化,分别于灌胃第14天用代谢笼收集24h尿量,测24h尿蛋白;于灌胃第14天解剖后心脏取血,测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),取左侧肾脏,测量肾重,并计算肾脏肥大指数,肉眼观察肾脏大体外观,光镜下观察肾组织纤维化的病理改变并进行肾小管间质的病理评分,免疫组织化学法(SP)检测肾组织胶原Ⅳ(COL-Ⅳ)的表达情况。结果1.对24h尿量、24h尿蛋白的影响:与正常组比较,在第14天,模型组大鼠24小时尿量、24h尿蛋白明显增加,有统计学差异(P0.05)。与模型组比较,在第14天,'贝那普利组、总皂苷组、肾病Ⅰ号方组大鼠24h尿量、24h尿蛋白明显减少,有统计学差异(P0.05),贝那普利组、总皂苷组、肾病Ⅰ号方组比较无统计学差异(P0.05)。2.对肾重、体质量、肾脏肥大指数的影响:与正常组比较,模型组的体质量明显降低,肾重、肾脏肥大指数明显升高,有统计学差异(P0.05)。与模型组相比,贝那普利组、总皂苷组、肾病Ⅰ号方组大鼠肾重、体质量、肾脏肥大指数均明显减少,有统计学差异(P0.05),贝那普利组、总皂苷组、肾病Ⅰ号方组比较无统计学差异(P0.05)。3.对Scr、BUN的影响:与正常组比较,模型组的Scr、BUN明显升高,有统计学差异(P0.05)。与模型组相比,贝那普利组、总皂苷组、肾病Ⅰ号方组大鼠Scr、BUN的含量均明显减少,有统计学差异(P0.05),贝那普利组、总皂苷组、肾病Ⅰ号方组比较差异无统计学意义(P0.05)。4.肾小管间质损伤指数评分:经肾小管间质损伤指数测定,正常组大鼠肾组织中肾小管间质纤维化指数仅少量表达。模型组肾组织中肾小管间质损伤指数,较正常组明显增加,有统计学差异(P0.05)。贝那普利组、总皂苷组、肾病Ⅰ号方组肾组织亦出现相同的表现,但较模型组明显减少,有统计学差异(P0.05),贝那普利组、总皂苷组、肾病Ⅰ号方组比较差异无统计学意义(P0.05)。5.免疫组织化学法检测肾脏组织COL-Ⅳ:与正常组比较,模型组中COL-Ⅳ广泛表达于肾间质和肾小管中,较正常组明显增加,有统计学差异(P0.05)。贝那普利组、总皂苷组、肾病Ⅰ号方组肾组织亦出现相同的表现,但较模型组明显减少,有统计学差异(P0.05),贝那普利组、总皂苷组、肾病Ⅰ号方组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论1.肾病Ⅰ号方总皂苷能降低UUO模型大鼠的尿量、尿蛋白,抑制肾脏肥大,减少血清Scr、BUN水平等,具有良好的肾脏保护作用。2.肾病Ⅰ号方总皂苷可以改善肾组织的病理表现,延缓肾纤维化的进程,降低UUO大鼠肾组织的损伤作用。3.肾病Ⅰ号方总皂苷可能通过抑制细胞外基质COL-Ⅳ的合成,减少细胞外基质的积聚,从而发挥抗肾纤维化的作用。4.肾病Ⅰ号方总皂苷是肾病Ⅰ号方发挥抗肾纤维化作用的药效物质基础之一。
【学位单位】：浙江中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2017
【中图分类】：R285.5
【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
前言
一、实验研究
    (一) 实验用材
        1. 药物选用
        2. 动物选用
        3. 主要试剂及仪器
    (二) 实验方法及步骤
        1. 主要试剂及药物的调配
        2. 造模分组及治疗处理
        3. 观察大鼠的一般状态
        4. 标本的采集与处理
        5. HE和Masson染色观察肾组织
        6. 免疫组化检测COL-Ⅳ的表达
        7. 数据结果的统计学分析
二、实验结果
    (一) 各组大鼠一般状态的比较
    (二) 各组大鼠24h尿蛋白、24h尿量的比较
    (三) 各组大鼠肾重、体质量、肾脏肥大指数的比较
    (四) 各组大鼠血清BUN、Scr的比较
    (五) 各组大鼠肾脏大体外观的比较
    (六) 各组大鼠肾组织形态及肾小管间质损伤指数的比较
    (七) 各组大鼠肾脏组织Ⅳ型胶原表达的比较
三、分析与讨论
    (一) 肾间质纤维化与Ⅳ型胶原的相关性
    (二) 祖国医学对肾间质纤维化的认识
    (三) 肾间质纤维化动物模型的选择
    (四) 阳性对照组的选择及依据
    (五) 中药复方药效物质基础的研究进展
    (六) 肾病Ⅰ号方总皂苷选择的依据
    (七) 实验创新及不足
四、小结
结论
参考文献
附图
致谢
文献综述 中药皂苷类成分抗肾纤维化的研究进展
    参考文献

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本文编号：2840221