叶生小皮伞不同发酵产物中麦角甾醇和麦角甾酮的含量分析

发布时间：2020-10-15 06:39

　　 为了分析叶生小皮伞菌株ME-1通过不同发酵方式得到的发酵产物中麦角甾醇和麦角甾酮2种活性成分的含量,采用HPLC双波长法测定液体发酵菌丝体和固体发酵产物中的麦角甾醇和麦角甾酮含量。结果表明:麦角甾醇、麦角甾酮分别在0.1～10.0和0.012 3～0.123 0 g,线性良好(R~2=0.999 8、R~2=0.999 6),精密度、稳定性、重复性的RSD均小于2.0%,加样回收率在99.30%～103.93%范围内;含量分析表明,液体发酵菌丝体中麦角甾醇含量为125.0μg/g,麦角甾酮含量为1.2μg/g;固体发酵物中麦角甾醇的含量为37.7μg/g,麦角甾酮的含量为4.8μg/g。由此看出,利用液体发酵方式可在其菌丝体中获得更多的麦角甾醇,而固体发酵产物中的麦角甾铜含量较高。本研究建立了稳定、高效、重现性好的叶生小皮伞活性成分的HPLC双波长分析法,明确了不同发酵方式下不同发酵产物中麦角甾醇和麦角甾酮的差异,为叶生小皮伞的综合评价和质量控制提供了理论依据。
【部分图文】：

薮级哉掌啡芤骸⒙蠼晴尥?哉掌啡芤汉?供试样品溶液，分别按照“1.3”项下的色谱条件，利用高效液相色谱仪进行分析检测。结果显示，叶生小皮伞液体发酵菌丝体和固体发酵产物中均含有麦角甾醇和麦角甾酮。麦角甾醇对照品和麦角甾酮对照品色谱图如图1所示；供试样品色谱图如图2和图3所示。1007550250058.97610152025(a)(b)min响应值（mAU）Responsevalue23.512001150100500010205060min3040时间（min）Time图1麦角甾醇对照品（a）和麦角甾酮对照品（b）的HPLC色谱图Fig.1HPLCchromatogramsofergosterolreferencesub-stance（a）andergosteronereferencesubstance（b）

第4期577550250058.93410152025(a)(b)响应值（mAU）Responsevalue8.98950040030020010000510251520时间（min）Time图2菌丝体（a）和固体发酵产物（b）中麦角甾醇的HPLC色谱图Fig.2HPLCchromatogramsofergosterolinmycelium（a）andsolidfermentationproduct（b）10.07.55.02.50.001023.647203040(a)(b)响应值（mAU）Responsevalue23.622010203040时间（min）Time10.07.55.02.50.0图3菌丝体（a）和固体发酵产物（b）中麦角甾酮的HPLC色谱图Fig.3HPLCchromatogramsofergosteroneinmycelium（a）andsolidfermentationproduct（b）2.2方法学考察2.2.1线性关系考察分别取麦角甾醇、麦角甾酮对照品溶液，依次进样1、2、4、8、10L，测定吸收峰面积，以麦角甾醇、麦角甾酮的进样质量和色谱峰面积分别作为横坐标、纵坐标绘制标准曲线，求得麦角甾醇和麦角甾酮的线性回归方程分别为Y=215942X51911（R2=0.9998）和Y=28058X+2779.8（R2=0.9996），表明麦角甾醇和麦角甾酮分别在0.1~10.0和0.0123~0.1230g线性关系良好。2.2.2精密度试验取麦角甾醇、麦角甾酮对照品溶液，分别按“2.1”项下的方法测定，连续进样测定6次，每次进样10L，分别得到麦角甾醇和麦角甾酮的RSD分别为0.83%和0.55%，RSD均小于2.0%，表明该测量方法精密度良好。2.2.3稳定性试验取ME-1菌丝体和固体发酵产物供试品溶液，分别在配制后0、4、8、12、16、20、24h

5(a)(b)响应值（mAU）Responsevalue8.98950040030020010000510251520时间（min）Time图2菌丝体（a）和固体发酵产物（b）中麦角甾醇的HPLC色谱图Fig.2HPLCchromatogramsofergosterolinmycelium（a）andsolidfermentationproduct（b）10.07.55.02.50.001023.647203040(a)(b)响应值（mAU）Responsevalue23.622010203040时间（min）Time10.07.55.02.50.0图3菌丝体（a）和固体发酵产物（b）中麦角甾酮的HPLC色谱图Fig.3HPLCchromatogramsofergosteroneinmycelium（a）andsolidfermentationproduct（b）2.2方法学考察2.2.1线性关系考察分别取麦角甾醇、麦角甾酮对照品溶液，依次进样1、2、4、8、10L，测定吸收峰面积，以麦角甾醇、麦角甾酮的进样质量和色谱峰面积分别作为横坐标、纵坐标绘制标准曲线，求得麦角甾醇和麦角甾酮的线性回归方程分别为Y=215942X51911（R2=0.9998）和Y=28058X+2779.8（R2=0.9996），表明麦角甾醇和麦角甾酮分别在0.1~10.0和0.0123~0.1230g线性关系良好。2.2.2精密度试验取麦角甾醇、麦角甾酮对照品溶液，分别按“2.1”项下的方法测定，连续进样测定6次，每次进样10L，分别得到麦角甾醇和麦角甾酮的RSD分别为0.83%和0.55%，RSD均小于2.0%，表明该测量方法精密度良好。2.2.3稳定性试验取ME-1菌丝体和固体发酵产物供试品溶液，分别在配制后0、4、8、12、16、20、24h进样分析，记录峰面积，并计算出供试峰面积的RSD
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