芩楼清利丸对变态反应性皮炎大鼠血清及皮损炎症作用的实验研究

发布时间：2020-10-15 10:42

　　 目的:建立大鼠变态反应性接触性皮炎(Allergic contact dermatitis,ACD)模型,探讨零楼清利丸治疗变态反应性接触性皮炎的作用机理及作用靶点。方法:1将40只雄性SD大鼠随机分为四组,每组各10只,设空白对照组(仅在背部脱毛两处)、模型组(仅建立ACD模型)、治疗组(采用芩楼清利丸灌胃),阳性对照组(采用盐酸西替利嗪片灌胃)。在甲乙脱毛处各外涂0.1%的二硝基氯苯溶液(Dinitrochlorobenzene,DNCB)致敏建立ACD模型,第二次激发后以药物灌胃治疗。治疗组将芩楼清利丸溶于纯净水中灌胃给药,每天2次,阳性对照组将盐酸西替利嗪片溶于纯净水中灌胃给药,每天2次。2两周后取材前评估皮损疗效;取材后,通过HE染色观察各组大鼠皮肤的病理变化;采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测各大鼠血清中白介素-4(interleukin-4,IL-4)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)以及皮损组织中白细胞三烯B4(LeukotrienesB4,LTB4)水平;采用实时荧光定量PCR(RT-PCR法)检测皮损中白细胞三烯受体1(Leukotrienes B4 Receptor 1,BLT1)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-14(Caspase-1 4)表达情况。结果:1大鼠治疗组和阳性对照组皮损红斑、水肿、丘疹、表皮剥脱、苔藓化程度均明显减轻,总有效率为90%,与模型组相比有显著性差异;2 HE染色提示:模型组大鼠背部皮肤轻度角化过度,表皮层、真皮层内有大量炎症细胞浸润;阳性对照组及治疗组角质层变薄,表皮层、真皮层内轻度炎症细胞浸润,较模型组明显减少;3LTB4、BLT1含量比较:模型组LTB4的表达水平较空白组显著上升(P0.01),治疗组和阳性对照组大鼠LTB4的表达水平较模型组大鼠的表达显著下降,治疗组P0.01,阳性对照组P0.05;模型组大鼠皮肤BLT1mRNA的表达水平较空白组显著降低(P0.01),治疗组和阳性对照组大鼠BLT1mRNA的表达水平较模型组大鼠的表达明显上升,但治疗组和阳性对照组与模型组之间差异均无明显统计学意义(P均0.05);4 TNF-α、IL-4含量比较:ELISA结果提示各组大鼠血清中IL-4水平无明显差异(P0.05);模型组TNF-α的表达水平较空白组显著上升(P0.01),治疗组和阳性对照组大鼠TNF-α的表达水平较模型组大鼠的表达显著下降,其中阳性对照组P0.01,治疗组P0.05,这两组之间相比差异没有统计学意义(P0.05);5Caspase-14mRNA含量提示:模型组Caspase-14mRNA的表达水平较空白组显著上升(P0.05),治疗组和阳性对照组大鼠Caspase-14mRNA的表达水平较模型组大鼠的表达显著下降,其中阳性对照组P0.01,治疗组P0.05,这两组之间差异相比无统计学意义(P0.05)。结论:1芩楼清利丸能够降低皮损中LTB4的浓度,一定程度上干预了 LTB4-BLT1炎症通路,对ACD炎症具有抑制作用;2芩楼清利丸可以降低ACD大鼠血清中TNF-α的含量;3 Caspase-14是角质形成细胞特有的成分,主要参与细胞终末分化,形成完整角质层,对维护皮肤屏障的稳态、增殖及分化起重要作用,皮肤受损后Caspase-14的表达增高。芩楼清利丸使治疗组Caspase-14的表达水平较模型组大鼠的表达显著下降,由此推测芩楼清利丸对ACD皮肤屏障恢复可能具有积极作用。
【学位单位】：北京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2017
【中图分类】：R285.5
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
符号说明
第一部分 综述
    综述一 中药治疗变态反应性接触性皮炎的实验研究概况
        参考文献
    综述二 T细胞相关细胞免疫与变态反应性接触性皮炎发病的研究进展
        参考文献
前言
第二部分 研究报告
    实验一 芩楼清利丸对ACD大鼠皮损作用及病理变化的研究
        材料与方法
        结果
        小结
        讨论
    实验二 芩楼清利丸对ACD大鼠皮损LTB4、BLT1、Caspase-14表达的影响
        材料与方法
        结果
        小结
        讨论
    实验三 芩楼清利丸对ACD大鼠模型血清中TNF-α、IL-4表达水平的影响
        材料与方法
        结果
        小结
        讨论
结语
参考文献
致谢
在学期间主要研究成果
个人简介

【参考文献】

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本文编号：2842069