不同类型清热中药的抑菌作用特点比较及应用研究

发布时间：2020-10-16 04:50

　　目的本文研究了不同类型清热中药的抑菌作用特点的异同,进一步获得清热中药的分类的现代数据,并开展清热中药作为抗生素增效剂和益生菌促生长因子的应用开发,旨在为清热药的应用提供实验参考。方法1以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、嗜酸乳杆菌为实验菌株,采用比浊法测定不同类型清热中药的对3株细菌体外的增殖率大小。2采用比浊法测定不同类型清热中药对大肠杆杆菌与金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)。分别绘制清热解毒中药与清热燥湿中药对金黄色葡萄球菌的生长曲线及分别建立了清热解毒中药与清热燥湿中药对金黄色葡萄球菌生长曲线的一级、二级生长模型。3采用棋盘法测定清热复方与头孢拉定、左氧氟沙星、阿莫西林、庆大霉素联用对金黄色葡萄球菌的抑菌作用。利用细胞膜渗透性、糖代谢、磷代谢、AKP的含量测定、SDS-PAGE电泳等方法,来阐述清热复方的抑菌机理。4以清热中药蒲公英作为促生长因子,采用正交法优化嗜酸乳杆菌的基础培养基。结果1清热燥湿中药黄芩、黄连、黄柏抑制金黄色葡萄球菌的增殖,与对照组比较,有显著性差异(P0.05)。清热燥湿中药黄连、黄柏、黄芩能抑制大肠杆菌的增殖,与对照组比较,具有显著性差异(P0.05)。清热解毒中药穿心莲、连翘、板蓝根、菊花、鱼腥草、败酱草、金银花对大肠杆菌无增殖作用,与对照组比较,无显著性差异(P0.05)。清热燥湿中药黄连、黄芩、黄柏对嗜酸乳杆菌有明显抑制作用。其中黄连、黄芩、黄柏与对照组比较,具有显著性差异(P0.05)。清热解毒中药蒲公英、金银花、穿心莲、鱼腥草、败酱草、板蓝根、连翘对嗜酸乳杆菌有明显的增殖作用,与对照组比较,具有显著性差异(P0.05)。2清热燥湿中药黄芩、黄连对金黄色葡萄球菌具有较强的抑菌作用(≤7.81mg/m L),清热燥湿中药黄柏与清热解毒中药金银花、连翘、蒲公英、板蓝根、穿心莲、败酱草对金黄色葡萄球菌具有中等抑菌作用(15.63~62.5 mg/m L)。清热解毒中药黄芩、黄连对大肠杆菌具有较强抑菌作用(≤7.81 mg/m L)。在Gompertz生长预测模型的基础上,建立了在7.81~125 mg/m L条件下金黄色葡萄球菌的μm与质量浓度的有效二级模型。3清热复方分别与头孢拉定、阿莫西林、庆大霉素和左氧氟沙星联用对金黄色葡萄球菌的FIC为0.125、1.00、0.531和0.531。清热解毒复方液作用于菌体6 h后,给药组的电导率比对照组增加了4.88%(P0.05)。清热复方提取液孵育0~8h,各实验节点的吸光度差异均小于0.47%(P0.05)。清热解毒复方与菌液作用0~10 h时,培养液糖浓度与对照组的培养液中糖浓度随作用时间一直降低。在0~12h时,试验组与对照组磷的浓度一直在降低。清热复方液作用于菌体在0~6 h胞外可检测的磷酸酶含量明显增加,且显著高于对照组。清热复方提取液反应16 h后,实验组的可溶性蛋白含量比对照组有明显变化。95000Da处,与对照组相比清热复方组明显增加一条蛋白条带;130000~95000Da之间,对照组比清热复方组明显消失了一条蛋白条带。4采用正交实验优化嗜酸乳的增菌培养基,得出培养基优化的最优组合为:硫酸镁0.58g/L,硫酸锰0.25g/L,酵浸母粉20g/L,磷酸氢二钾2g/L,柠檬酸氢二铵2g/L,番茄汁150ml/L,乙酸钠15g/L,葡萄糖2 g/L,蒲公英粉1.0g/L,p H6.4,加入蒸馏水1000 m L。结论1革兰氏阳性菌比革兰氏阴性菌对清热中药敏感度高。2清热燥湿药主要影响金黄色葡萄球菌的最大比生长速率,清热解毒药主要影响金黄色葡萄球菌的滞后期λ。3清热复方与头孢拉定、庆大霉素、左氧氟沙星、阿莫西林联用可通过协同/相加作用而提高抗菌药的抑菌效果。清热解毒复方抑制金黄色葡萄球菌的生长作用机理主要是清热解毒复方破坏金黄色葡萄球菌的细胞壁、干扰其正常蛋白质表达。4采用正交设计实验优化了嗜酸乳杆菌的增菌培养基,得出增殖培养基的最优组合。
【学位单位】：广东药科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2017
【中图分类】：R285
【部分图文】：

曲线,金黄色葡萄球菌,曲线,浓度曲线