贝牡莪消中药复方对FRTL-5细胞增殖与凋亡影响的实验研究

发布时间：2020-10-18 03:29

　　 研究目的:利用体外细胞培养的研究方法,从细胞水平观察贝牡莪消中药复方对体外细胞培养的FRTL-5细胞增殖和凋亡的影响,探讨以"活血行气,化痰散结"为原则创制的贝牡莪消中药复方对甲状腺肿大的作用机制。研究方法:1、细胞增殖抑制实验对照组为正常L-15完全培养基;实验组分别为浓度为1.Omg/ml、2.Omg/ml、5.0mg/ml、10mg/ml、15mg/ml、20mg/ml 的贝牡莪消培养液。取对数生长期的FRTL-5细胞,接种在96孔板中,加入不同含药浓度的培养基,于24h、48h观察细胞增殖状态,采用CCK-8检测法在酶标仪450nm波长下测定吸光度值(OD值).计算贝牡莪消中药复方对FRTL-5细胞生长抑制率。2、Bax,Bcl-2的mRNA水平检测收集各组细胞,提取RNA,采用实时荧光定量PCR法检测Bax,Bcl-2的mRNA表达。采用SPSS 20.0软件分析不同浓度贝牡莪消中药复方在不同时间对FRTL-5细胞增殖抑制情况及各组细胞Bax,Bc l-2 mRNA的表达数据。结果:1、采用CCK-8检测法测得不同浓度贝牡莪消培养液对FRTL-5细胞增殖具有抑制作用。2、贝牡莪消中药复方能使FRTL-5细胞促凋亡基因Bax的mRNA表达水平明显升高,尤其以浓度为15mg/ml和20mg/ml的贝牡莪消培养液效果明显,以20mg/ml差异最为显著(p0.05),贝牡莪消中药复方能使甲状腺细胞抗凋亡基因Bcl-2的mRNA表达水平下降,以浓度为15mg/ml的贝牡莪消培养液效果最为明显。结论:贝牡莪消中药复方有抑制FRTL-5细胞增殖及促进FRTL-5细胞凋亡的作用,可能是通过上调促凋亡基因及下调抗凋亡基因以达到促进甲状腺细胞凋亡的目的,提示贝牡莪消中药复方治疗甲状腺肿大的机制可能是通过抑制甲状腺细胞增殖及促进甲状腺细胞凋亡而实现。
【学位单位】：黑龙江中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2017
【中图分类】：R285
【文章目录】：
缩略语表
中文摘要
ABSTRACT
前言
文献综述
    1、甲状腺肿大的中医药研究进展
        1.1 病名源流
        1.2 病因病机
        1.3 治疗研究
    2、甲状腺肿大的西医研究概况
        2.1 病因与发病机制
        2.2 诊断
    3、中药调节甲状腺细胞增殖与调亡的作用机制研究进展
        3.1 动物实验类
        3.2 细胞实验类
材料与方法
    1、实验材料和仪器
        1.1 实验细胞
        1.2 实验药物
        1.3 主要仪器
        1.4 主要试剂
        1.5 主要耗材
        1.6 主要试剂的配制
    2、实验方法
        2.1 贝牡莪消培养液的配制
        2.2 FRTL-5细胞的培养
        2.3 CCK-8检测细胞增殖
        2.4 实时荧光定量PCR法检测Bcl-2、Bax的mRNA的表达
        2.5 统计学方法
结果
    1、不同浓度贝牡莪消培养液对FRTL-5细胞增殖OD值比较((?)+s,n=6)
    2、RNA的质控
    3、贝牡莪消中药复方对FRTL-5细胞Bax基因mRNA表达的影响
    4、贝牡莪消中药复方对FRTL-5细胞Bcl-2基因mRNA表法的影响
讨论
    1、贝牡莪消中药复方治疗甲状腺肿的立方依据
    2、贝牡莪消中药复方方药分析
    3、贝牡莪消中药复方现代药理分析
    4、细胞增殖与甲状腺肿
    5、贝牡莪消中药复方甲状腺细胞增殖抑制作用
    6、细胞凋亡与甲状腺肿
    7、贝牡莪消中药复方诱导甲状腺细胞凋亡的作用机制
    8、问题与展望
结论
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表的论文
个人简历

【参考文献】

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本文编号：2845735