复方苦黄凝胶剂的HPLC指纹图谱研究

发布时间：2020-10-18 03:23

　　 目的建立复方苦黄凝胶剂的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。方法采用Agilent SB-C18(4.6×150 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.5%磷酸为流动相,流速1.0 mL/min,梯度洗脱,检测波长220 nm,柱温30℃,洗脱时间为90 min。指纹图谱相似度评价采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)。结果建立了复方苦黄凝胶剂的HPLC指纹图谱,确立了22个共有峰,4个峰归属到各药味,其中峰1归属为苦参,峰15归属为黄柏,峰20归属为蛇床子,峰11归属为防风。10批样品指纹图谱的整体相似度均在0.9以上。结论所建立的复方苦黄凝胶剂指纹图谱能够为整体控制制剂质量提供参考。
【部分图文】：

将HPLC色谱图导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版”进行分析，制定优化的HPLC指纹图谱，见图1。根据10批供试品溶液的色谱峰生成参照图谱，选择参照图谱中峰面积大于500的峰为共有指纹峰，经过分析确定复方苦黄凝胶剂指纹图谱的22个共有指纹峰，见图2。

根据10批供试品溶液的色谱峰生成参照图谱，选择参照图谱中峰面积大于500的峰为共有指纹峰，经过分析确定复方苦黄凝胶剂指纹图谱的22个共有指纹峰，见图2。详细比较10批复方苦黄凝胶的HPLC色谱图，以升麻素苷为参照物，计算出各特征峰的相对保留时间和相对峰面积见表1、2。

采用DAD检测器进行全波长扫描，结果发现在220 nm的波长下出峰最多，而且峰分离度较好，故选择220 nm作为指纹图谱的检测波长。预试验进行了4种不同的浓度梯度的洗脱效果比较，为了尽可能反应药材的整体特征，排除了出峰过早、有部分峰重叠未分开或出峰太慢、有成分没有洗脱出的条件，选择分离效果较佳、峰形及理论塔板数较好、保留时间适中，且基线相对比较平稳、色谱柱压力适中的现梯度条件作为复方苦黄凝胶特征指纹图谱的洗脱梯度[20-21]。同时按照选择的流动相洗脱梯度，在220 nm波长下洗脱，记录了110 min的色谱图，因为90 min之后无色谱峰出现，故把洗脱时间定为90 min。
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