磷酸川芎嗪通过激活AMPK对HT22细胞在氧糖剥夺损伤中的保护作用

发布时间：2020-10-24 13:09

　　 目的观察磷酸川芎嗪在离体水平对糖氧剥夺(OGD)诱导HT22细胞损伤的保护作用。方法磷酸川芎嗪(5、10、15μg/mL)预处理HT22细胞24 h,OGD处理4 h,HT22细胞分为空白对照组、模型组、5μg/mL磷酸川芎嗪组、10μg/mL磷酸川芎嗪组及15μg/mL磷酸川芎嗪组。CCK-8法检测HT22细胞存活率,荧光显微镜下观察神经元形态改变,利用荧光酶标仪检测各组细胞2-脱氧荧光葡萄糖(2-NBDG)的摄取能力,利用Western blot检测AMPK、p-AMPK蛋白表达。结果从细胞形态学上,磷酸川芎嗪对OGD损伤HT22细胞具有保护用;15μg/mL磷酸川芎嗪保护OGD诱导损伤的活性最大。对2-NBDG摄取量的影响,与剂量呈正相关。AMPK磷酸化随磷酸川芎嗪浓度的增加而增加。结论磷酸川芎嗪可能通过激活AMPK对HT22细胞在氧糖剥夺损伤中发挥重要的保护作用。
【部分图文】：

如图1所示,OGD模型组HT22细胞核固缩,胞体膨胀甚至破裂,细胞膜不完整,折光性差;随着磷酸川芎嗪浓度的增加,HT22细胞胞体变得饱满,边缘逐渐光滑,且有较强折光性;从细胞形态学上,磷酸川芎嗪对OGD损伤HT22细胞具有保护作用。如图2所示,与空白对照组比较,模型组HT22细胞存活率降低(P<0.01),而磷酸川芎嗪预处理后,随着浓度增加,细胞存活率呈升高趋势,其中磷酸川芎(10、15 μg/mL)存活率升高(P<0.05,P<0.01)。图2 磷酸川芎嗪对HT22细胞存活率的影响(n=3)

磷酸川芎嗪对HT22细胞存活率的影响(n=3)

如图3所示,与空白对照组(100±0.26)%相比,经OGD处理后HT22细胞对2-NBDG的摄取能力下降[(45.17±0.92)%,P < 0.01];经5 μg/mL磷酸川芎嗪预处理后,细胞对2-NBDG的摄取能力增加到(75.37±2.08)%;与模型组比较,15 μg/mL磷酸川芎嗪预处理下的HT22细胞对2-NBDG的摄取能力增加到[(108.00±3.02)%,P<0.01]。糖氧剥夺造成HT22细胞活性下降,对2-NBDG的摄取能力显著下降;磷酸川芎嗪预处理可提高HT22细胞对2-NBDG的摄取能力。3.3 磷酸川芎嗪对糖氧剥夺下HT22细胞p-AMPK蛋白表达的影响
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