三七醇提物对秀丽隐杆线虫的降脂作用

发布时间：2020-10-26 02:44

　　 目的研究三七醇提物降低秀丽隐杆线虫脂肪沉积的作用以及可能的分子机制。方法本研究采用秀丽隐杆线虫为模式生物,三七醇提物以不同剂量给药后,观察对线虫的寿命、生殖和抗逆性的影响;采用油红O染色法,观察了线虫体内脂肪沉积的变化;同时,检测了线虫体内的甘油三酯含量和脂肪代谢相关的基因acs-2、pod-2、fat-5的表达水平。结果与对照组比较:三七醇提物不同给药剂量组均能延长线虫的寿命,增强抗逆性,且高剂量组更为显著(P 0.01);对线虫生殖能力没有影响;油红O染色结果显示,三七醇提物可显著降低线虫肠道脂肪沉积(P 0.01);三七醇提物高剂量组还能显著降低甘油三酯的含量(P 0.05),并影响与脂肪代谢相关基因表达水平,其中acs-2 mRNA被上调,pod-2、fat-5mRNA被下调(P 0.05)。结论三七醇提物在不影响线虫生命特征的前提下,可减少线虫体内脂肪沉积,对甘油三酯水平及脂肪代谢相关的基因表达水平有调控作用。
【部分图文】：

将同步化至L4期的线虫给药处理4 d后，破碎虫体,Trizol法提取线虫总RNA，测定总RNA的浓度及纯度后，在逆转录酶催化下合成cDNA，继而进行acs-2mRNA、pod-2 mRNA、fat-5 mRNA的RT-PCR含量测定[14-15]。所用的引物序列：acs-2 mRNA上游引物：5"-AGTGAGACTTGACAGTTCCG-3"，下游引物：5"-CTTGTAAGAGAGGAATGGCTC-3";Pod-2 mRNA上游引物：5"-TATGCGATGCCTGATGACTG-3"，下游引物：5"-TGTCTCCCAAACTGAACATAGC-3";Fat-5 mRNA上游引物：5"-TGAACTGGACCCGAGTATTGA-3"，下游引物：5"-ACAGCCGAACTTCTTGCACT-3"。扩增结束后计算扩增效率，采用2-ΔΔCT法计算相对基因表达。2.9 统计学分析

为了分析三七醇提物对秀丽隐杆线虫抗逆性的影响，分别开展了热应激实验和氧化应激实验。与对照组相比，热应激条件下，不同剂量的三七醇提物均能使线虫生存曲线右移，增强线虫的耐热能力，结果见图3。与对照组相比，三七醇提物0.8 mg/mL剂量组线虫平均寿命增加了25.30%(P<0.05),1.6 mg/mL剂量组线虫平均寿命增加了40.05%(P<0.01）。与对照组相比，氧化应激条件下，不同剂量的三七醇提物均能使线虫生存曲线右移，增强线虫的抗氧化能力，结果见图4。与对照组比较，三七醇提物0.8 mg/mL剂量组线虫平均寿命增加25.77%(P<0.05),1.6 mg/mL剂量组线虫平均寿命增加了35.88%(P<0.01）。由此可知，三七可显著增强线虫对热应激和氧化应激耐受能力，改善线虫的抗逆性。3.4 甘油三酯含量测定

如图6 A所示，油红O将线虫肠道脂肪染为红色，颜色鲜艳并且容易观察，染色效果良好。对图片应用ImageJ软件进行灰度分析，以量化数据。研究结果表明，用三七醇提物处理的线虫的脂肪沉积程度明显低于对照线虫。与对照组相比，阳性对照药1.0 mg/mL绞股蓝总皂苷处理的线虫肠道脂质含量下降了59.41%(P<0.05），用三七醇提物处理的线虫在0.8mg/mL和1.6 mg/mL剂量下的肠道脂质含量分别下降了21.20%和52.83%(P<0.05）；高剂量组与阳性药比较无显著差异，表明两者效果相当（P>0.05）。图4 氧化应激条件下三七对秀丽线虫生存率的影响
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本文编号：2856371