肉苁蓉及其有效成分抗骨质疏松药效学及代谢组学研究

发布时间：2020-10-26 13:11

　　 目的:以宁夏栽培肉苁蓉Cistanche deserticola Y.C.Ma为研究对象,建立肉苁蓉HPLC特征图谱和含量测定方法,用于肉苁蓉粗提物和总苯乙醇苷的定性定量分析;以去卵巢致大鼠(小鼠)骨质疏松为模型,评价肉苁蓉提取物、总苯乙醇苷有效部位及苯乙醇苷有效成分抗骨质疏松的药效作用;以代谢组学为手段,采用UPLC-QTOF分析技术,探讨抗骨质疏松的作用机制。方法:1.以松果菊苷为参照峰,毛蕊花糖苷等5种成分为指标性成分,建立肉苁蓉HPLC-DAD特征图谱。2.以去卵巢致骨质疏松大鼠(小鼠)为模型模拟绝经后妇女骨质疏松的病理状态,口服给予骨质疏松动物肉苁蓉提取物高、中、低剂量组分别是(800、400、200 mg/kg),肉苁蓉总苯乙醇苷有效部位(240、120、60 mg/kg),肉苁蓉苷A高、中、低剂量组(80、40、20 mg/kg),毛蕊花糖苷高、中、低剂量组(80、40、20 mg/kg),2'-乙酰麦角甾苷高、中、低(40、20、10 mg/kg),6'-乙酰麦角甾苷高剂量组(40、20、10 mg/kg)。连续给药12周,通过检测骨密度、骨组织形态、骨形成和骨吸收等指标,探讨肉苁蓉各给药组对去卵巢致骨质疏松大鼠(小鼠)的药效作用。3.以上述各组大鼠(小鼠)血清为分析对象,建立UPLC-QTOF方法,对样本进行正、负离子模式的数据采集;以代谢组学为技术手段,采用PCA和PLS-DA等统计方法,建立各组判别模型,以p0.05值和VIP值1筛选差异性代谢物,经数据库、文献和标准品对照等确定代谢物结构,同时分析各给药组对差异性代谢物的调节作用。结果:1.建立了可以用于肉苁蓉定性分析的HPLC特征图谱。2.肉苁蓉提取物、总苯乙醇苷有效部位和有效成分均显示不同程度的提高去卵巢大鼠(小鼠)骨密度、改善骨微观结构、提高骨形成指标含量和降低骨吸收指标含量的药效作用。3.从正、负离子模式下筛选到并经数据库和文献鉴定了缬氨酸等33个有差异的内源性代谢物,通过标准品对照鉴定了3个代谢物,其余代谢物的结构还需要标准品的进一步确证。与假手术组相比,白三烯F4、PC(22:6/18:1)、PC(40:6)、PI(32:0)、PC(32:1)、溶血磷脂酰胆碱(20:3)、LPE、LPC18:0a、LysPc20:4、磷酸鞘氨醇、牛磺胆酸、SM、L-苯丙氨酸、二油酰磷脂酰胆碱、缬氨酸、N-甲基-氨基异丁酸、吲哚-3-乙酰胺、25-羟基维生素D3、亚麻酸、植物鞘氨醇在模型组大鼠血清中显著性下调,肉碱、2-甲基丙二酸、5-羟基-N-甲酰基鸟嘌呤,甲基丝氨酸、奎宁酸、糖昔脱氧胆3-葡糖苷酸、脱氧腺苷、3-羟基苯乙酸、5-HIAA在大鼠血清中显著性上调,其中肉苁蓉总苯乙醇苷可使白三烯F4、PC(22:6/18:1)、PC(40:6)、PI(32:0)、PC(32:1)、溶血磷脂酰胆碱(20:3)、LPE、磷酸鞘氨醇、牛磺胆酸、SM、L-苯丙氨酸、二油酰磷脂酰胆碱、苯基丙酮酸、缬氨酸、肉碱、2-甲基丙二酸、5-羟基-N-甲酰基鸟嘌呤、甲基丝氨酸、奎宁酸、糖昔脱氧胆3-葡糖苷酸、脱氧腺苷、3-羟基苯乙酸、5-HIAA明显的回调,它的作用机制主要通过干预脂肪酸代谢、氨基酸代谢、磷脂代谢等。结论:1.建立的肉苁蓉HPLC特征图谱可以用于肉苁蓉的定性分析。2.肉苁蓉提取物、总苯乙醇苷有效部位和有效成分具有治疗去卵巢致骨质疏松大鼠(小鼠)的药效作用。3.肉苁蓉总苯乙醇苷可能通过调节缬氨酸等33种代谢物起到抗骨质疏松的药效作用,它的作用机制主要通过干预脂肪酸代谢、氨基酸代谢、磷脂代谢等起到抗骨质疏松的作用。
【学位单位】：宁夏医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2017
【中图分类】：R285.5
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表
前言
第一章 肉苁蓉苯乙醇苷类化合物的制备及特征谱的建立
    第一节 肉苁蓉的提取和总乙醇苷的制备及苯乙醇苷类成分的分离
        仪器与材料
        方法与结果
    第二节 肉苁蓉总苯乙醇苷特征谱的建立
        仪器与材料
        方法与结果
    讨论
    结论
第二章 肉苁蓉提取物和总苯乙醇苷抗骨质疏松实验研究
    仪器与试剂
    方法与结果
    讨论
    结论
第三章 肉苁蓉有效成分抗骨质疏松实验研究
    仪器与试剂
    方法与结果
    讨论
    结论
第四章 肉苁蓉总苯乙醇苷抗骨质疏松代谢组学的研究
    仪器与材料
    方法与结果
    讨论
    结论
论文小结
参考文献
综述
    综述参考文献
致谢
攻读学位期间的学术成果
个人简介

【参考文献】

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本文编号：2857043