人参皂苷Rg1联合人参皂苷Rg3对雄性生殖功能损伤模型小鼠生殖功能的改善作用

发布时间：2020-11-01 01:24

　　 目的:探讨人参皂苷Rg1联合人参皂苷Rg3对邻苯二甲酸二丁酯(DBP)诱导的雄性生殖功能损伤模型小鼠生殖功能的改善作用,阐明人参皂苷Rg1和人参皂苷Rg3对生殖功能保护作用的相关机制,为其深入开发提供实验依据。方法:28只清洁级雄性C57BL/6小鼠随机分为模型组(400mg·kg-1 DBP)、人参皂苷Rg1+DBP组(20mg·kg-1人参皂苷Rg1,400mg·kg-1 DBP)、人参皂苷Rg3+DBP组(20mg·kg-1人参皂苷Rg3,400 mg·kg-1 DBP)和联合组(20 mg·kg-1人参皂苷Rg1,20 mg·kg-1人参皂苷Rg3,400mg·kg-1 DBP),每组7只。DBP溶于玉米油于每天上午灌胃给药,人参皂苷Rg1和人参皂苷Rg3溶于生理盐水于每天下午皮下注射给药,每天各给药1次,连续给药35d。采用WLJY-9000型精子质量检测系统检测各组小鼠的精子密度、精子活力和总畸形率,HE染色观察小鼠睾丸组织病理形态表现,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠血清中睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)水平,采用免疫荧光法检测睾丸组织缝隙连接蛋白43 (Cx43)蛋白表达水平。结果:与模型组比较,联合组小鼠睾丸脏器系数明显升高(P0.05),人参皂苷Rg1+DBP组、人参皂苷Rg3+DBP组和联合组小鼠精子密度和精子活力明显升高(P0.01);与模型组比较,人参皂苷Rg1+DBP组、人参皂苷Rg3+DBP组和联合组小鼠血清中T和LH水平明显升高(P0.01),FSH水平明显降低(P0.01),小鼠睾丸组织中Cx43蛋白表达水平明显升高(P0.05)。HE染色,模型组小鼠睾丸组织生精上皮较薄,管腔中生精细胞严重脱落;与模型组比较,人参皂苷Rg1+DBP组和人参皂苷Rg3+DBP组小鼠睾丸组织生精上皮变厚,管腔中脱落细胞较少;联合组小鼠睾丸组织生精上皮结构完整,各级生精细胞排列规则,腔内精子丰富。析因分析,人参皂苷Rg1联合人参皂苷Rg3可致小鼠精子活力(F=6.704,P=0.016)、血清中T水平(F=4.912,P=0.036)和睾丸组织中Cx43蛋白表达水平(F=6.937,P=0.018)升高。结论:人参皂苷Rg1和人参皂苷Rg3单独使用及人参皂苷Rg1与人参皂苷Rg3联合使用,可提高精子密度和精子活力,使小鼠血清中T和LH水平升高,FSH水平降低,减轻小鼠生殖功能损伤,其作用机制可能与上调Cx43表达水平发挥生精保护作用有关,可抑制DBP所致的生殖功能损伤,且人参皂苷Rg1与Rg3联合使用表现为协同作用。
【部分图文】：

小鼠睾丸组织经HE染色后，光学显微镜400倍下观察生精上皮细胞层次、形态结构、脱落细胞和管腔受损程度。模型组小鼠睾丸组织生精上皮较薄，生精上皮细胞层次紊乱，甚至缺失，数量明显减少，管腔中生精细胞严重脱落，而且管腔内精子数量稀少；与模型组比较，人参皂苷Rg1+DBP组和人参皂苷Rg3+DBP组小鼠睾丸组织生精上皮变厚，生精上皮细胞排列较规则，数量有所增加，管腔中脱落细胞较少，支持细胞结构较完整，腔内精子数量增多；联合组小鼠睾丸组织生精上皮较厚，生精上皮结构完整，各级生精细胞排列规则且数量较多，曲细精管之间排列紧密，腔内精子丰富，在生精小管之间均匀分布间质细胞。见图2（插页二）。2.4 各组小鼠血清中性激素水平

与模型组（0.081 4±0.013 5）比较，人参皂苷Rg1+DBP组、人参皂苷Rg3+DBP组和联合组小鼠睾丸组织中Cx43蛋白表达水平（0.108 6±0.006 9、0.122 9±0.025 0和0.187 1±0.025 6）均明显升高（P<0.05）。见图4（插页二）。联合作用的析因分析结果显示：2条量-效曲线随药物剂量增加而远离（F=6.937,P=0.018），提示人参皂苷Rg1、人参皂苷Rg3联合应用可增加小鼠睾丸组织中Cx43蛋白表达水平，具有协同作用。见图5。

联合作用的析因分析结果显示：2条量-效曲线随药物剂量增加而远离（F=6.937,P=0.018），提示人参皂苷Rg1、人参皂苷Rg3联合应用可增加小鼠睾丸组织中Cx43蛋白表达水平，具有协同作用。见图5。3 讨论
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