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金荞麦片对DSS诱导的小鼠炎症性肠病的改善作用

发布时间:2020-11-02 13:14
   目的:(1)探究金荞麦片对DSS诱导的小鼠炎症性肠病的改善作用;(2)探寻炎症性肠病活动期和缓解期时血常规、C反应蛋白、血沉等数据间的差异。方法:(1)将20只SPF级C57BL/6小鼠随机分成模型组和金荞麦片组,给予两组小鼠自由饮用3%DSS连续7d,同时每日固定时间给予模型组双蒸水、金荞麦片组金荞麦混悬液一次,均连续灌胃给药7d。记录每日小鼠体重、粪便粘稠度、血便情况,计算疾病活动指数,待7d后,禁食24h,然后处死小鼠,解剖并取材,测量结直肠长度、脾重并计算脾脏指数,对结直肠组织HE染色后进行组织病理学评分,运用实时荧光定量PCR检测结直肠组织中炎症细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10以及紧密连接蛋白ZO-1、Occludin的相对表达量,运用鲎试剂法检测血清内毒素含量,运用Ki67免疫组化法测定IECs中增值细胞的占比;(2)通过筛选南通市第三人民医院自2014年01月01日至2018年08月31日期间收住诊治的炎症性肠病相关病例143例,筛选出其中符合标准的94例后,通过改良Mayo评分系统和简化CDAI计算法分为活动期和缓解期两组,然后比较两组病例WBC、NEUT%、HGB、PLT、EO、HCT、PDW、CRP、CRPH和ESR的数值的差异。结果:(1)与模型组相比,金荞麦片组DAI评分在第5d和第6d时显著降低(P0.01),结直肠长度显著增长(P0.05)且脾脏指数显著减小(P0.001),病理组织学评分显著降低(P0.05),金荞麦片组对结直肠中TNF-α、IL-6和IL-1β水平有显著的下调作用(P0.05),对血清内毒素的含量有显著的降低作用(P0.05),并能促进IECs的增殖(P0.05);(2)94例炎症性肠病病例中,相较于缓解期,活动期PLT、CRP、CRPH和ESR显著增大(P0.05),PDW显著减小(P0.05)。结论:(1)预防性的使用金荞麦片,能有效减轻IBD的肠道和全身症状,是通过下调促炎因子的表达从而减轻结直肠组织的炎性损伤及全身炎症反应,并通过促进受损肠黏膜中IECs的增殖来促进黏膜愈合,为后续临床用药提供参考;(2)炎症性肠病患者活动期和缓解期可以通过检验血液中的PLT、PDW、CRP、CRPH和ESR加以区分,为后续临床运用提供思路。
【学位单位】:南京中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位年份】:2019
【中图分类】:R285.5
【部分图文】:

小鼠,粘稠度,粪便,变化率


粘稠度自第2d起大部分出现软便,整个实验过程中均未见腹泻、排稀便或水样便情况发??生。??根据IBD小鼠DAI评分结果可见(图2-1):与模型组相比,整个造模期间金荞麦片??组小鼠的DAI评分均较低,其中第Id至第4d两组间的P>0.05,第5d的DAI评分模型??组为(9.00±1.225)、金荞麦片组为(5.40±1.517),PN).0033<0.01;第?6d?的?DAI?评分模??型组为(10.60士?1.140)、金荞麦片组为(7.40±丨.342)?,?P=0.0036<0.01,说明金荞麦片对??小鼠DAI评分的影响在第5d、第6d有显著性差异。??A?体重变化率评分?B?类便粘稍度评分??si?+?十?_則??+?&养々娜?4.?+?fe冷女i_i‘m?*?*??i"?I?I?I?I?I?〇?^?I?I?T?T?1???0?1?2?3?4?5?6?0?1?2?3?4?5?6??Tinic(davs)?Time(da>5()??C?粪便隐血评分?D?DAI评分??51?设吧纽?12-.?-^松_丨?彳??4?+?丨丨犯?***?J?10???mvm??丨???1?!?1?1?1—?〇i^7?1?1?1?1?1—??0123456?0?1?2?3?4?5?6??Timcdlays)?Timefdavs)??图2-1?IBD小鼠评分结果(n=10,又is)??(A)?IBD小鼠体重变化率评分结果,(B)?IBD小鼠粪便粘稠度评分结果,(C)IBD小??鼠粪便隐血评分结果,(D)?IBD

小鼠,脾脏指数,长度,实验研究


?第二部分实验研究???5.2结直肠长度及脾脏指数??由IBD小鼠结直肠长度及脾脏指数结果可见(图2-2、图2-3、表2-3):(丨)与模型??组相比,金荞麦片组小鼠结直肠长度显著增长(P=0.0230<0.05)?;?(2)与模型组相比,??金荞麦片组小鼠脾脏指数显著减小00.00070.001)。?_??

染色切片,小鼠,病理组织学,隐窝


注:与模型组相比,*P<〇.〇5,?**P<0.01,?***P<0.001,?****尸<0.0001??5.3病理组织学评分??从IBD小鼠结直肠HE染色显示(图2-4),模型组小鼠结直肠黏膜层及黏膜下层结??构不完整,伴局部上皮坏死脱落,大量隐窝结构改变甚至缺失,并有大量炎症细胞的浸润;??金荞麦片组小鼠黏膜层及黏膜下层结构尚完整,可见肠绒毛短缩,部分隐窝有隐窝炎或隐??窝脓肿。根据病理组织学半定量分析显示(图2-5),模型组病理组织学评分为??(13.45±2.875),金荞麦片组病理组织学评分为(8.85±2.479)。相较于模型组,金荞麦??片组结直肠病理组织学评分显著减小(P=0.0267<0.05)。??10X?20?X?40?X??_?P?_??图2-4?IBD小鼠结直肠HE染色切片图??25??
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本文编号:2867097

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