荔枝核多糖的水提醇沉工艺优化及其对α-葡萄糖苷酶的抑制活性研究

发布时间：2020-11-04 00:02

　　 目的:优化荔枝核多糖的水提醇沉工艺,并评价其体外降糖的活性。方法:采用苯酚-硫酸比色法测定多糖含量,并计算多糖提取率。采用单因素试验和响应面法,以料液比、提取次数、提取时间为因素,多糖提取率为指标,对水提工艺进行优化;采用单因素试验对醇沉工艺中水提液的浓缩体积和醇沉浓度进行筛选,并进行验证。以阿卡波糖为对照,采用4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷法考察荔枝核多糖对α-葡萄糖苷酶的体外抑制活性。结果:荔枝核多糖水提醇沉的最优工艺为料液比1∶19(g/mL),煎煮3次,每次1 h,水提液浓缩至原体积的40%,加乙醇醇沉至含醇量80%,经Sevage法除蛋白后得荔枝核粗多糖。3次验证试验结果显示,多糖提取率分别为7.61%、7.89%、7.99%,平均提取率为7.83%(RSD=2.52%,n=3);多糖含量分别为55.57%、55.83%、56.66%,平均含量为56.02%(RSD=1.81%,n=3)。荔枝核多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制活性有随浓度升高而增强的趋势,其半数抑制浓度为0.056 mg/mL,低于阳性对照阿卡波糖的0.196 mg/mL。结论:优化的荔枝核多糖水提醇沉工艺稳定、可行。荔枝核多糖对α-葡萄糖苷酶具有明显的体外抑制作用,且活性强于阿卡波糖。
【部分图文】：

按“2.3.2”项下最优工艺制得荔枝核水提液，均分为4份，分别浓缩至原体积的20%、30%、40%、50%后，均加乙醇醇沉至含醇量80%，静置，以4 000 r/min离心10 min，取沉淀，干燥，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.2”项下方法计算LP提取率。结果，当浓缩至原体积的30%～40%时，LP提取率较高，详见图3A。综合考虑乙醇消耗量和LP提取率，本研究最终选择将水提液浓缩至原体积的40%。图3 浓缩体积、醇沉浓度对荔枝核水提液LP提取率的影响

浓缩体积、醇沉浓度对荔枝核水提液LP提取率的影响

取荔枝核药材，粉碎，精密称取粉末5.0 g，置于烧杯中，采用水煎煮法以不同料液比[1∶5、1∶10、1∶15、1∶20、1∶25,g/mL（下同）]、提取时间（0.5、1、1.5、2、2.5 h）和提取次数（1、2、3、4、5次）提取，每次仅变动1个因素，以LP提取率为指标，对各因素进行考察。（1）料液比：随提取液用量的增加，LP提取率逐渐升高；当料液比达1∶15时，LP提取率趋于稳定，详见图1A。（2）提取时间：当煎煮时间为0.5～2.5 h时，LP提取率呈波浪形变化，并于1.5 h时达到最高，详见图1B。当煎煮时间超过1.5 h后，LP提取率反而下降，这可能是由于煎煮时间过长，多糖结构被部分破坏所致。故综合考虑，本研究选择提取时间0.5、1、1.5 h进行后续研究。（3）提取次数：当提取次数≤3次时，LP提取率随着提取次数的增加而升高；但当继续增加提取次数时，LP提取率反而略有下降，详见图1C。故综合考虑LP提取率和提取效率，本研究选择提取次数2、3、4次进行后续研究。故综合考虑，本研究选择料液比1∶10、1∶15、1∶20进行后续试验。2.3.2 响应面试验
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本文编号：2869296