活血通督汤对大鼠急性脊髓损伤的修复作用及机制

发布时间：2020-11-05 22:07

　　 目的观察活血通督汤对大鼠急性脊髓损伤后肢功能的恢复及检测损伤区脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)和胶质胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响,以探讨该方的作用机制。方法将96只成年雌性SD大鼠按随机数字法分为假手术组、模型组和活血通督汤组,每组32只,每组中再分为术后1d、3d、5d、7d四个亚组,每个亚组8只,造模前、后7d连续灌胃,活血通督汤组灌服活血通督汤,余两组灌服等量生理盐水,一日2次,假手术组只切开椎板显露脊髓,余两组采用改良Allen' s法制备脊髓损伤模型,术后8h、1d、3d、5d、7d行为学评分后,处死大鼠取材,采用尼氏染色法观察脊髓及神经元形态改变、免疫荧光法检测脊髓损伤区BDNF、NGF和GFAP阳性细胞的表达、Western blot法和PCR法检测损伤区BDNF、NGF和GFAP的表达情况。结果1、实验动物行为学评分:脊髓损伤后模型组和活血通督汤组感觉和运动功能较假手术组差(P0.01),与模型组比较,术后5-7d,活血通督汤组感觉及运动功能的恢复较好(P0.05 或 P0.01);2、实验动物形态学观察:假手术组脊髓结构完整,灰白质界限清楚呈蝴蝶状,神经细胞内可见虎斑样尼氏体,与模型组比较,活血通督汤组脊髓瘀血灶小,神经细胞肿胀较轻,神经元形态较好,未见空泡样改变;3、实验动物检测结果:①与假手术组比较,模型组和活血通督汤组免疫荧光检测BDNF、NGF和GFAP表达较高(P0.01),与模型组比较,活血通督汤组BDNF、NGF阳性细胞数表达较高(P0.01),GFAP阳性表达较低(P0.01);②脊髓损伤后BDNF、NGF和GFAP蛋白均有不同程度表达,在相同时间点,术后3-7d,模型组和活血通督汤组表达量较假手术组高(P0.01),与模型组比较,活血通督汤组BDNF、NGF蛋白表达较高(P0.05或P0.01),而GFAP蛋白表达较模型组低(P0.01);③PCR结果显示,脊髓损伤后,BDNF mRNA、NGF mRNA和GFAP mRNA相对表达量均有不同程度升高,在相同时间点,术后3-7d,其表达量较假手术组高(P0.05或P0.01),与模型组比较,活血通督汤组GFAPmRNA相对表达量较低(P0.05或P0.01),余两个指标表达量较高,差异具有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论1、活血通督汤能促进急性脊髓损伤早期后肢感觉及运动功能的恢复;2、活血通督汤通过促进NGF、BDNF的分泌、抑制GFAP的表达,减少胶质瘢痕形成,从而有利于急性脊髓损伤的修复。
【学位单位】：福建中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R285.5
【部分图文】：

２实验结果??２．?１感觉Ｒｅｕｔｅｒ评分和运动ＢＢＢ评分??脊髓损伤后的行为学评分方法包括运动ＢＢＢ评分法、斜板实验评分法、感觉功能??Ｒｅｕｔｅｒ评分法、改良Ｔａｒｌｏｖ评分法以及联合评分法，其中感觉Ｒｅｕｔｅｒ评分和运动ＢＢＢ??评分是研究脊髓损伤后常用的评分方法，国内外学者多采用该方法对脊髓损伤后功能恢??复进行评估，可初步观察到受伤雌性大鼠功能恢复的一般状况。成年雌性实验大鼠急性??脊髓损伤后，因假手术组只摘除椎板，脊髓未受打击损伤，其后肢感觉及运动功能正常，??基本不受手术创伤影响，而其余两组实验大鼠后肢均出现不同程度的感觉和运动功能障??碍；在脊髓损伤后的相同时间点与假手术组比较，模型组和活血通督汤组大鼠后肢感觉??及运动功能障碍差异明显（Ｐ＜０．０１），与模型组比较，术后５ｄ和术后７ｄ活血通督汤组??感觉及运动功能的恢复较为明显（Ｐ＜〇．〇５或Ｐ＜０．０１），详见下表。??Ｉ??

成空泡样结构，而用活血通督汤进行灌胃治疗后，该组的脊髓横断面内表现为瘀血面积??较小、神经元水肿较轻以及神经元形态较好、未见空泡样改变等特点，而在脊髓神经细??胞受损修复过程中，仍可见部分脊髓神经细胞核肿大以及核仁消失等表现。（见图２）??１５??

少（Ｐ＜０．０１），与实验大鼠中的模型组比较，用活血通督汤治疗组脑源性神经营养因子??和神经生长因子阳性细胞数表达高于模型组，在数目上有明显差异（Ｐ＜０．０１），但活血??通督汤组胶质纤维酸性蛋白阳性细胞表达数量比模型组低（Ｐ＜〇．〇ｌ）。（详见下图３、图??４）??１６??
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本文编号：2872252