丹皮酚通过上调SIRT1减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤

发布时间：2020-11-06 13:07

　　 目的:检测丹皮酚对于大鼠心肌缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)的保护作用并探究其作用机制。方法:使用Sprague Dawley (SD)大鼠建立心肌缺血再灌注损伤模型。Western blot检测大鼠心肌组织中沉默信息调控因子1(sirtuin1,SIRT1)表达水平。2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFDA)试剂盒检测大鼠心肌组织中活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量。ELISA法检测大鼠心肌组织氧化应激标志物丙二醛(malondialdehyde,MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)表达水平及大鼠血浆中心肌损伤标志物乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)含量。超声心动系统检测大鼠心脏功能和心室重构情况。结果:丹皮酚显著减少了大鼠心脏组织中活性氧的含量,下调了MDA、LDH和CK的表达,并上调了SOD的表达水平。此外,超声心动图的结果说明丹皮酚还具有提高大鼠心脏功能和逆转大鼠心室重构的作用。丹皮酚的预处理显著增强了大鼠心肌组织中SIRT1的表达水平。进一步的研究表明,下调SIRT1逆转了上述所有丹皮酚的作用。结论:丹皮酚通过上调SIRT1的表达,减轻了缺血再灌注导致的大鼠心肌组织氧化应激和心肌损伤,并因此改善了心脏功能和心室重构情况。
【部分图文】：

通过western blot，首先检测了大鼠心脏组织中SIRT1的表达情况。我们发现I/R损伤导致了SIRT1表达的显著下调，丹皮酚则显著增强了SIRT1的表达，SIRT1敲低组中SIRT1表达水平确实显著降低了(图1)。2.2 丹皮酚减轻了大鼠心肌氧化应激和心肌损伤:

我们初步探究了丹皮酚对受到缺血再灌注损伤的SD大鼠心脏的作用。DCFDA试剂盒的检测结果显示，与假手术组相比，I/R组大鼠心肌组织中ROS水平明显增8.8mm。80.4mm(+69.2mm,96.2mm)〗高，丹皮酚则下调了ROS的含量(图1A)。通过ELISA，我们进一步检测了大鼠心肌组织中氧化应激标志物和心肌损伤标志物含量，结果发现，在I/R处理后，MDA表达水平显著增高，SOD则显著减少，丹皮酚的预处理逆转了I/R的作用(图1B,C)。此外，心肌损伤标志物LDH和CK也因I/R处理而显著增多，并同样可以被丹皮酚预处理逆转(图1D,E)。此外，与丹皮酚组相比，SIRT1组大鼠心肌组织中氧化应激反应更强、心脏受损更严重(图1A-E)。我们的发现提示丹皮酚显著抑制了缺血再灌注后发生的氧化应激和心肌损伤，且至少在一定程度上是通过SIRT1发挥作用的。2.3丹皮酚改善了大鼠心脏重塑、提高了心脏功能:

我们通过超声心动图进一步检测了丹皮酚对于大鼠心脏功能的影响。我们观察到与I/R组相比，丹皮酚组中大鼠心脏左室缩短分数(FS)、左室射血分数(EF)和左室收缩压(LVSP)显著增高(图3A-C)，左室舒张末期压(LVEDP)则显著降低(图3D)。在敲低SIRT1后，与丹皮酚组相比，虽然FS无显著性差异，但EF和LVSP显著降低，LVEDP显著升高(图3A-D)。结合前文的实验结果，我们认为丹皮酚至少在一定程度上通过上调SIRT1增强了大鼠心肌缺血再灌注后的心脏功能，显著改善了心室重构情况。3讨论

本文编号：2873175