神农香菊茎多糖提

发布时间：2020-11-08 13:28

　　 神农香菊(Dendranthema indicum var.aromaticum)系菊科菊属的一个新变种植物,其花、叶有清热解毒之疗效,常用于治疗感冒、咽喉肿痛、目赤肿痛等。国内外学者已从其花、茎、叶中分离出挥发油类、黄酮类、萜类等有效成分,有抗菌、抗氧化和抗炎等活性。然而,对神农香菊茎中多糖的相关研究报道甚少。本文以恩施神农架地区神农香菊茎为原料,对神农香菊茎多糖的提取、纯化、结构及体外抗氧化性进行研究,以期为我国神农香菊茎资源的综合利用提供新的方向和参考依据,主要研究内容如下:(1)比较热水浸提和超声辅助提取法提取神农香菊茎多糖的提取率。热水浸提法最佳工艺条件:料液比1∶40(g/mL),浸提温度90℃,浸提时间2h,多糖的提取率为5.735%;超声辅助提取法最佳工艺条件:料液比1∶40(g/mL),超声时间60min,醇沉浓度70%,多糖的提取率为11.385%,较热水浸提法提高了1.99倍。超声提取法的优点是提高产率,明显缩短提取时间,设备条件较简单。(2)以多糖脱色率和回收率为评价指标,比较活性炭、大孔树脂和DEAE-52纤维素3种方法对超声制得神农香菊茎粗多糖的脱色效果。结果显示:当使用的活性炭量为4%、脱色温度为60℃、脱色时间为45min时,多糖的脱色率达到最大为81.586%,但多糖回收率仅有20.445%。静态实验筛选7种大孔吸附树脂,D301树脂其脱色率为91.736%,多糖回收率仅有34.759%。通过DEAE-52纤维素使用不同洗脱剂对粗多糖液进行洗脱,其中A_(450)nm(蒸馏水)0.002,无色素吸收,该段脱色率较高;A_(490)nm(蒸馏水)5.5,多糖含量较高,多糖的回收率较高。故DEAE-52对神农香菊茎多糖的脱色效果最佳。神农香菊茎粗多糖固体呈灰褐色,经DEAE-52脱色后的多糖为白色海绵状固体。(3)利用离子交换层析技术对神农香菊茎多糖进一步分离纯化,比较不同离子型(OH~-、Cl~-、HCO_3~-)的DEAE-52对多糖的纯化效果。结果表明HCO_3~-型的纯化效果最好,分辨率较高,洗脱峰数量最多。经HCO_3~-型DEAE-52层析得到四个级分:DILP-1、DILP-2、DILP-3、DILP-4。(4)HPLC对四个组分的均一性进行测定,确定以DILP-1为检测对象。进一步采用紫外扫描、HPLC、~1H-NMR、~(13)C-NMR等现代分析手段对神农香菊茎纯化多糖DILP-1的结构进行了初步分析。UV检测结果显示,DILP-1不含蛋白质及核酸。多角度激光散射测定,DILP-1重均分子量为2.182*10~4Da。DILP-1的单糖组成分析结果表明DILP-1由葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、果糖4种单糖组成,其摩尔比为1∶1.992∶1.577∶2.379。通过~1H-NMR、~(13)C-NMR图谱分析,进一步确定DILP-1为多糖。(5)研究热水浸提法与超声提取法得到的神农香菊茎多糖(DILWP、DILUP)对DPPH和ABTS自由基清除能力及总还原能力,结果表明,DILWP、DILUP均有体外抗氧化活性,在一定浓度范围内,呈剂量依赖性。DILUP的抗氧化能力强于DILWP。
【学位单位】：武汉轻工大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R284.2
【部分图文】：

图 2.1 葡萄糖标准曲线Fig.2.1 The standard curve of glucose密度试验果可知，RSD 值为 0.940%，符合相关质量标准要求，说明实。表 2.5 精密度试验数据（n=6）Tab.2.5 Data of the precision test（n=6）1 2 3 4 5 6 RS0.459 0.465 0.457 0.461 0.453 0.465 定性试验果可知，RSD 值为 1.197%，小于 2%，符合相关质量标准要茎多糖溶液的测定在 150min 内稳定性良好。表 2.6 稳定性试验数据Tab.2.6 Data of the stability test1 2 3 4 5 6 RS

图 2.2 料液比对多糖得率的影响g.2.2 Effect of the ratio of material to liquid on the yield of polysacchar时间对多糖得率的影响见图 2.3。浸提时间在 0.5~2h 内随着浸提时间的延长神农持续递增，在浸提时间 2h 时多糖的提取率达 5.452%。多h 后增长较为缓慢。处理时间太短，多糖不能充分溶解；、黄酮等物质会被提取出来，另外因糖苷键断裂而转变成寡糖，醇沉时有所损失，皆导致提取率降低。故选取浸提

图 2.2 料液比对多糖得率的影响Fig.2.2 Effect of the ratio of material to liquid on the yield of polysaccharide提时间对多糖得率的影响结果见图 2.3。浸提时间在 0.5~2h 内随着浸提时间的延长神农香取率持续递增，在浸提时间 2h 时多糖的提取率达 5.452%。多糖取 2h 后增长较为缓慢。处理时间太短，多糖不能充分溶解；时间白质、黄酮等物质会被提取出来，另外因糖苷键断裂而转变成可糖、寡糖，醇沉时有所损失，皆导致提取率降低。故选取浸提时
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本文编号：2874849