拜颤停复方对帕金森病转基因模型小鼠脑内多巴胺及病理变化的作用研究

发布时间：2020-11-08 16:05

　　 目的:对帕金森病(PD)转基因模型小鼠脑内多巴胺和大脑病理样本进行检测,探讨拜颤停复方对PD模型脑功能异常的治疗作用及神经保护作用机制。方法:运用爬杆和自主活动实验分析转基因模型小鼠行为学改变,UPLC-MS串联三重四级杆方法检测脑内多巴胺含量,TUNEL法检测大脑黑质区病理变化,运用方差分析进行组间比较。结果:与正常对照组比较,模型对照组爬杆时间显著增加(P0.05),自主活动次数显著减少(P0.05),多巴胺含量显著降低(P0.05),细胞呈典型的凋亡形态学改变,如细胞变小、变圆、核固缩,细胞凋亡率显著升高(P0.05);与模型对照组比较,拜颤停复方95.8 mg/kg组多巴胺含量明显升高(P0.05);拜颤停复方181.5 mg/kg组爬杆时间明显减少(P0.05),多巴胺含量明显升高(P0.05),细胞凋亡率明显下降(P0.05);拜颤停复方363 mg/kg组爬杆时间明显减少(P0.05),自主活动次数明显增加(P0.05),多巴胺含量明显升高(P0.05),细胞凋亡率明显下降(P0.05)。结论:拜颤停复方通过改善转基因PD模型小鼠脑功能,如减少爬杆时间、增加自主活动次数和脑内多巴胺含量,同时改善脑细胞病理变化治疗PD。
【部分图文】：

精密量取对照品溶液,按3.2项下“色谱条件”和“质谱条件”进行检测,得到各多巴胺色谱峰的保留时间一致,无杂质干扰,峰型良好,如图1。1.5.3.4 线性关系考察与定量下限

标准曲线平行做5条,每条标准曲线选取6个浓度点,不包括原点。采用加权的(W=1/x2)最小二乘法进行线性回归。最低定量限为S/N≥10,精密度和准确度的相对标准偏差均应在±20%内。取多巴胺标准品用甲醇溶液溶解,分别配制浓度为1.28、2.56、6.4、32、160、800 ng/ml标准品溶液,以进样浓度为基准,横坐标为时间,纵坐标为峰面积,绘制标准曲线,如图2。1.5.3.5 重现性实验

结果如图3,正常对照组蓝色着染较浅,模型对照组蓝色着染细胞数量增多,同时被染上蓝色的细胞呈典型的凋亡形态学改变,如细胞变小、变圆、核固缩。与模型对照组比较,随拜颤停复方浓度升高,各给药组蓝色着染变浅,尤以拜颤停复方181.5 mg/kg组、拜颤停复方363 mg/kg组染色最浅,同时细胞形态趋于正常。凋亡率结果如表4,与正常对照组比较,模型对照组凋亡率明显升高(P<0.05);与模型对照组比较,拜颤停复方181.5 mg/kg、363 mg/kg组细胞凋亡率明显下降(P<0.05)。表4 拜颤停复方对帕金森病转基因小鼠模型黑质区细胞凋亡的影响 ( x ˉ ±s,n=5) 组别 剂量/(mg/kg) 凋亡率(%) 正常对照 8.6±1.4* 模型对照 34.6±8.1 拜颤停复方 95.8 30.6±3.1 拜颤停复方 181.5 23.0±4.6* 拜颤停复方 363 19.2±4.5*
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本文编号：2875009