华重楼化学成分研究及其主成分在初加工过程中的变化研究

发布时间：2020-11-10 02:26

　　 华重楼Paris polyphylla Smith var.chinensis(Franch.)Hara,即七叶一枝花,为百合科重楼属植物,与云南重楼P.polyphylla Smith var.yunanensis(Franch.)Hara-Mazz一同作为中药重楼的法定基原植物收载于2015版《中国药典》一部。重楼具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊之功效,用于疔疮痈肿、咽喉肿痛、蛇虫咬伤、跌扑伤痛和惊风抽搐等。是云南白药、宫血宁胶囊、抗病毒颗粒等多种中成药的重要原料之一。重楼属植物为多年生,因其生长周期长,药用部位根茎达到入药要求一般需要7~8年,每年地上部分植株枯萎时产生大量的农业废弃物被丢弃,造成资源浪费。因此,明确重楼属植物地上部分的化学组成,科学评估其利用价值,对于资源的综合利用与开发具有重要意义。以往的研究多集中在云南重楼地上部分的化学成分研究和活性评价,对于华重楼地上部分的研究相对较少。为了明确华重楼地上部分化学组成及其与根茎的化学差异,本研究以75%乙醇对华重楼根茎和地上部分进行提取,利用HPD100大孔吸附树脂柱色谱对提取物进行粗分,采用UPLC-QTOF/MS对各部位进行化学成分指认,并比较了地上部分与根茎的化学差异性。在此基础上,通过硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱及半制备型HPLC等多种方法,导向性地从地上部分30%乙醇洗脱部位分离鉴定了12个非皂苷类成分,基于光谱数据鉴定了各化合物的结构,分别为corchionoside C(1),β-蜕皮甾酮(2),coronatasterone(3),山奈酚3-O-β-D-吡喃半乳糖苷(4),紫云英苷(5),异鼠李素3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(6),山奈酚3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(l→2)-β-D-吡喃半乳糖苷(7),异鼠李素3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(l→2)-β-D-吡喃半乳糖苷(8),山奈酚3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(l→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(9),异鼠李素3-O-β-D-吡喃半乳糖-(l→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(10),异鼠李素3-O-龙胆双糖苷(11),6-(9-羟基丁基)-1,1,5-三甲基-2-羟基-4-环己烯-3-酮9-O-β-D-葡萄糖(1→6)葡萄糖苷(12)。其中,化合物12为新化合物,化合物1和3-11为首次从华重楼中分离得到,化合物1,3-5和8-10为首次从该属植物中分离得到。采收和产地初加工是中药材品质形成的重要环节。确定最佳采收期、规范产地初加工方法是构建中药材、饮片和中成药全产业链标准化体系的重要内容。为明确华重楼根茎的最佳采收年限和采收季节,采用HPLC法测定了不同移栽时间样品中主成分(重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ和Ⅶ)的含量,结果表明:不同移栽年限和采收时间根茎中主成分含量差异较大,4-6月份采收的样品含量相对较高。为明确产地初加工方法对根茎主成分的影响,采用HPLC法测定了根茎不同部位主成分的含量,比较了不同干燥方式对主成分的影响,采用UPLC-QTOF/MS对变化成分进行了结构鉴定。结果表明:根茎尾部主成分含量高于芽头部位;50℃烘干样品主成分含量高于晾干样品;晾干过程中存在螺甾皂苷(重楼皂苷Ⅶ、3-O-葡萄糖(1-3)[鼠李糖(1-2)]葡萄糖偏诺皂苷和重楼皂苷H)向呋甾皂苷的转化,其原因可能与植物体内存在的26位葡萄糖转移酶有关。因此,建议华重楼根茎的初加工方式为采收后趁鲜除去须根,洗净,烘干。烘干能够有效地抑制植物体内的酶活性,阻止偏诺皂苷F环的开环与26位羟基的苷化。
【学位单位】：河南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R284
【部分图文】：

L·hr-1，检测电压 400 V。MSE模式：低能量 4.7 eV，高能量 15.0 eV，碰撞电压 25-50 eV，扫描范围 m/z 50-2000。3 结果3.1 华重楼地上部分提取物大孔树脂不同洗脱部位的成分分析在对照物质重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ和Ⅶ以及薯蓣皂苷和纤细薯蓣皂苷质谱裂解规律的基础上，结合在线紫外吸收和精确分子量信息，分别对华重楼地上部分大孔树脂 30%、50%及 70%乙醇洗脱部位进行指认，结果见图 1-1、1-2、1-3 及表 1-1、1-2、1-3。

脂 30%、50%及 70%乙醇洗脱部位进行指认，结果见图 1-1、1-2、1-3 及表 1-1、1-2、1-3。图 1-1 地上部分提取物 30%乙醇洗脱部位 BPI 图（色谱条件：WatersACQUITY UPLC BEH C18（2.1 mm×100 mm，1.8 μm），流动相：乙腈（A）和 0.1%的甲酸水溶液（B），梯度洗脱：0-7 min，8%A-18%A；7-16 min，18%A-25%A；16-17 min，25%A-28%A；流速 0.2 mL·min-1，进样量 1 μL，柱温 35℃。）1：TOF MS ES+BPI1：TOF MS ES-BPI

图 1-3 地上部分提取物 70%乙醇洗脱部位 BPI 图（色谱条件：WatersACQUITY UPLC BEH C18（2.1 mm×100 mm，1.8 μm），流动相：乙腈（A）和 0.1%的甲酸水溶液（B），梯度洗脱：0-20 min，20%A-62%A；流速 0.2 mL·min-1，进样量 1 μL，柱温 35℃。）表 1-1 地上部分提取物 30%乙醇洗脱部位质谱指认结果tR/min[M+HCOO]-[M-H]-ppm [M+H]+[M+Na]+MSMS 结构式 分子量 鉴定的化合物7.89 977.4627 931.4567 3.5 933.468 955.4492 915、769、623、461、443、425 C45H72O20932 去岩藻基的padelaosides7.59 Nd 625.1401 -0.6 627.1527 Nd 465、303 C27H29O17626槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(l→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷8.89 Nd 609.1453 -0.7 611.1613 Nd 449、287 C27H30O16610山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(l→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷9.26 Nd 639.1561 0 641.1717 663.1572 479、317 C28H32O17640异鼠李素 3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(l→2)-β-D-吡喃半乳糖苷9.78 Nd 639.1563 0.3 641.1721 663.1577 479、317 C28H32O17640异鼠李素 3-O-β-D-吡喃半乳糖-(l→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷10.06 Nd 639.155 -0.8 641.1719 663.1577 479、317 C28H32O17640 异鼠李素3-O-龙胆双糖苷10.64 961.4677 915.4636 5.2 917.4739 939.4543 917、899、753、607、445、427、409 C45H72O19916 parisvietnasideA11.22 1269.5414 1223.5358 1.8 1225.5797 1247.5292 1079、1061、1043、897、765、603、441 C56H88O291224 Parisyunnanoside I11.06 1107.4858 1061.4829 2.8 1063.4998 1085.4751 1045、899、767、605、459、441 C50H78O241062 Parisyunnano
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本文编号：2877325