不同浓度石榴皮多酚软膏对皮脂及其成分亚油酸、胆固醇的影响

发布时间：2020-11-11 01:42

　　 目的:探讨石榴皮中有效成分石榴皮多酚制成软膏后对皮脂及其成分亚油酸、胆固醇的影响,以期为石榴皮多酚软膏外用治疗痤疮提供更多的理论依据,更好的应用于临床。方法:第一步:本实验将石榴皮有效成分石榴皮多酚制成不同浓度软膏制剂,然后选取SPF级雄性大鼠40只,随机挑选30只,根据尹艳茹~([1])等人的方法,连续2周给予10mg/kg L-arginine灌胃,使SD大鼠皮脂腺发育增殖,皮脂分泌旺盛,待造模成功后分为6组:正常对照组、模型组、软膏基质组、高、中、低石榴皮多酚软膏组,每组5只。低、中、高剂量组使用0.9%、2.4%、10%石榴皮多酚软膏外涂大鼠背部剃毛区,基质组则使用软膏基质外涂,正常组及模型组给予同体积蒸馏水,每日两次。给药3周后,采用有机溶剂萃取直接称重法,测量皮脂分泌率;第二步:建立合适的高效液相色谱法HPLC,利用标准品算出各自的标准曲线,测量方法回收率以及精密度实验。利用此高效液相色谱法(HPLC),分离并测量皮脂中亚油酸(LA)与胆固醇(CHO)含量。结果:(1)日常观察:各组动物,药物外涂期间,未见大鼠死亡,各组大鼠活动较灵活,毛发较润泽,大便大致成形为椭圆形粒状,涂药部位无脱屑、角化过度、红肿、皮肤出现裂纹等现象,三周内重量变化差别无统计学意义。(2)不同浓度石榴皮多酚软膏对皮脂的影响:各组皮脂分泌率表示如下:正常对照组:(0.3426±0.1417)g/cm~2.min;模型组:(0.7886±0.1756)g/cm~(2.)min;基质组:(0.7808±0.1229)g/cm~2.min;低剂量组:(0.8148±0.1356)g/cm~2.min;中剂量组:(0.7098±0.2389)g/cm~2.min,高剂量组(0.4383±0.1273)g/cm~2.min,高剂量组与模型组相比,差异具有统计学意义(P0.05),低、中、基质组与模型组比,差异无统计学意义(P0.05);模型组与空白组比差异有统计学意义(P0.05)。(3)本研究建立的高效液相色谱法(HPLC):色谱柱为Supersil ODS色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);当流动相为乙腈(A)-0.1%磷酸水(C)(等梯度洗脱,起始,A:C(95:5))、流速为等梯度洗脱、1.0ml/min、波长为210nm、柱温为30℃时可分离亚油酸与胆固醇。(4)不同浓度石榴皮多酚软膏对亚油酸含量的影响:正常对照组:(0.75±0.078)%;模型组:(0.47±0.049)%;基质组:(0.48±0.110)%;低剂量组:(0.44±0.121)%;中剂量组:(0.43±0.121)%,高剂量组(0.68±0.168)%,高剂量组与模型组相比,差异具有统计学意义(P0.05),基质组、低剂量组、中剂量组与模型组无统计学意义(P0.05)。(5)不同浓度石榴皮多酚软膏对胆固醇含量的影响:正常对照组:(3.39±0.443)%;模型组:(3.69±0.790)%;基质组:(3.73±0.32)%;低剂量组:(3.47±0.334)%;中剂量组:(3.84±0.520)%,高剂量组(3.39±0.441)%,各组差异不具有统计学意义(P0.05)。结论:1.石榴皮多酚软膏剂型在使用3周内,无明显刺激性。2.本文中建立HLPC可以分离亚油酸与胆固醇,敏感度高,操作简单,为皮脂中其他成分的分离提供了更多的基础。3.高浓度石榴皮多酚软膏具有降皮脂和升高亚油酸的作用,但不能认为石榴皮多酚软膏对皮脂中胆固醇有影响,为石榴皮多酚制成软膏外用治疗痤疮提供了更多的理论依据。
【学位单位】：湖南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R285.5
【部分图文】：

人每日摄入石榴皮多酚的含量应为 0.75~2.25g/d。规定人的标60kg，由此可知，每 kg 人每日所需的石榴皮多酚含量为 0.0125~0.03算得到 12.5~37.5mg/Kg，如图 1，根据徐淑云《药理实验方法学》规定准体重的大鼠和人之间的换算系数为 0.018，由此可得，每只大鼠每日榴皮多酚含量为 70* 0.0125~0.0375g/kg*0.018/0.2kg=0-07875~0.236每只老鼠的的标准体重为 200g，可知，一只标准体重的大鼠的每日所需酚用量为 15.75~47.25mg/只/天。规定涂抹面积 3*4cm,外用药厚度不超一般为 1.5mm,故涂抹一次用量为 1.8ml。按一天涂抹两次，则得到平均剂量为：15.75~47.25mg mg/1.8ml=8.75~26.25mg/ml，根据既往实验经软膏约为 1g，故可以选择的浓度为 0.875%-2.625%之间，因此选择 0.9为低中浓度。同时，根据本课题组既往实验，高浓度石榴皮多酚，抑菌效故选用浓度为 10%为高剂量组。第二步，在恒温水浴锅保持在 70℃温度软膏基质搅拌融化，然后加入石榴皮多酚药粉搅拌至常温，配成相应的

D.石榴皮低剂量组E.石榴皮中剂量组F 石榴皮高剂量组2.3.2 实验分组即给药：空白组与模型组每日给予 1.8ml 生理盐水外涂背部剃毛区，基质组给予 1.8ml 软膏基质外涂相同区域，石榴皮低剂量组给予 1.8ml浓度 0.9%石榴皮多酚软膏外涂剃毛区，石榴皮中剂量组给予 1.8ml 浓度 2.4%石榴皮多酚软膏外涂剃毛区，石榴皮高剂量组给予 1.8ml10%石榴皮多酚软膏外涂剃毛区，每日两次，连续处理 3 周。

采用 SPSS17.0 统计软件进行，计量资料满足正态分布与方差齐性，t 检验，多样本则采用单因素方差分析与 SNK-q 检验比较各组差异，反本采用秩和检验，多样本则采用 Kruskal-WallisH 检验及秩和检验，设为统计显著水平。4．结果4.1 检测造模是否成功4.1.1 灌胃 2 周后，大鼠未见死亡，模型组与空白组大鼠外观无明精神状况良好，行动敏捷、灵活，四肢强壮有力,模型组大鼠剃毛区出现潮湿油腻感，而空白组相对偏干燥（图 3），但都未见尹艳茹[1]等所述背被毛明显油腻~黄染等现象。病理切片（图 4）显示，模型组皮脂腺腺体明显增大，数目较丰富，皮脂腺细胞较空白组胞浆明显丰富；功能处于状态，符合尹艳茹等述 10mg/kgL-精氨酸灌胃可致大鼠皮脂腺明显增生因此可以认为模型组动物较空白组动物，皮脂分泌更旺盛。
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本文编号：2878575