基于伏气学说的新加升降散干预放射性肺损伤研究

发布时间：2020-11-12 17:53

　　 目的:明确新加升降散对放射性肺损伤生物学效应及作用机制,为临床治疗本病提供更多的手段和方法,阐释火郁发之的治法内涵,为伏气学说治疗温热病证提供实证依据。方法:选取128只体重为200±20g的SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、阳性组、治疗组,每组32只。除空白组外,其余各组均采用直线加速器6MV-X线单次全胸照射14GY。造模24h后给予对应药物:空白组与模型组,灌服生理盐水;阳性组灌服强的松水溶液,治疗组灌服新加升降散免煎颗粒水溶液。各组分别于第1、3、5、7月随机抽取8只大鼠,进行心尖采血,处死,收集动脉血及肺组织。行HE、Masson染色法观察肺组织损伤程度;ELISA法检测不同时段大鼠血清中IL-17A、IL-6、IL-13、CTGF、HYP含量;Western Blot法测定肺组织中IL-12和IFN-γ水平;免疫组化法测肺组织TGF-β1的表达。结果:放疗后第1、3、5、7月空白对照组大鼠肺组织结构清晰,未见明显形态学改变;与空白对照组相比,模型组、阳性组以及治疗组大鼠的肺泡结构均有不同程度的破坏,有炎性细胞浸润以及胶原纤维增生;与模型组相比,阳性组以及治疗组的肺泡炎及肺纤维化程度在不同时间点均有不同程度的改善(p0.01)。模型组大鼠血清中IL-6、CTGF、HYP及肺组织中TGF-β1强表达,显著高于空白组(P0.01)。与模型组比较,各时间点阳性组和治疗组大鼠血清中HYP、IL-6、CTGF、肺组织中TGF-β1含量有显著差异(P0.01);与阳性组相比,第1月、3月治疗组具有显著性差异(P0.05),第5、7月治疗组无明显差异(P0.05)。与空白组比较,各时间点模型组大鼠血清中IL-17A、IL-13的表达升高(P0.01),肺组织中IL-12表达降低(P0.05)、IFN-γ表达降低(P0.01);与模型组比较,阳性组和治疗组在各个时间点大鼠血清中IL-17A、IL-13表达降低(P0.01),肺组织中IL-12表达升高(P0.05),IFN-γ表达升高(P0.01);与阳性组相比,第3月治疗组具有显著性差异(P0.05),第5、7月治疗组无明显差异(P0.05)。结论:14Gy单次全胸照射,可成功制备大鼠放射性肺损伤大鼠模型;新加升降散能够减缓大鼠放射性肺损伤的发生;新加升降散能够降低大鼠血清中炎性以及纤维化指标IL-6、IL-17A、IL-13、CTGF、HYP含量的浓度值及肺组织中TGF-β1的表达,升高肺组织中IL-12、IFN-γ表达;新加升降散能够通过IL-17A上调Th1相关细胞因子IL-12、IFN-γ表达并抑制Th2相关细胞因子IL-13的过度表达,证实新加升降散能够干预IL-17A通路调控Th1、Th2平衡,这可能是新加升降散干预RILI的关键机制。
【学位单位】：成都中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2017
【中图分类】：R285.5
【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
缩略词表
前言
基于伏气学说的放射性肺损伤理论研究
    1.放射性损伤中医研究现状
        1.1 RILI的中医病因病机
        1.2 放射性肺损伤的中医治法
    2.伏气学说与放射性损伤
    3.放射性肺损伤进程的病机与治法
    4.伏气学说与升降散、新加升降散
        4.1 升降散与伏气学说
        4.2 新加升降散方证
        4.3 新加升降散干预放射性肺损伤
实验一 大鼠放射性肺损伤模型的建立
    1.实验材料
        1.1 实验动物
        1.2 实验试剂
        1.3 实验仪器
    2.实验方法
        2.1 动物分组
        2.2 动物造模
        2.3 标本采集及处理
    3.肺损伤评价及检测方法
        3.1 —般情况
        3.2 肉眼观察肺组织形态
        3.3 观察肺炎症及纤维化程度
        3.4 统计分析
    4.结果
        4.1 一般情况
        4.2 肉眼观察肺组织形态
        4.3 肺组织病理形态学改变
    小结
实验二 新加升降散干预大鼠放射性肺损伤效应研究
    1.实验材料
        1.1 实验动物
        1.2 实验药物
        1.3 实验试剂
        1.4 实验仪器
    2.实验方法
        2.1 动物分组
        2.2 模型制备
        2.3 给药方法
        2.4 标本采集及处理
        2.5 检测指标与方法
        2.6 统计分析
    3.实验结果
        3.1 一般情况观察
        3.2 肺组织肉眼观察
        3.3 肺组织病理形态学改变
        3.4 新加升降散对放射性肺损伤过程中细胞因子、胶原蛋白的影响
    小结
实验三 新加升降散干预放射性肺损伤信号通路的机制研究
    1.实验材料
        1.1 实验动物
        1.2 实验药物
        1.3 实验试剂
        1.4 实验仪器
    2.实验方法
        2.1 动物分组
        2.2 模型制备
        2.3 给药方法
        2.4 标本采集及处理
        2.5 检测指标与方法
        2.6 采用酶联免疫法（ELISA法）、WesternBlot法操作步骤
        2.7 统计分析
    3.实验结果
        3.1 Th1相关细胞因子不同时间点大鼠肺组织IL-12、IFN-γ含量的检测结果
        3.2 Th2相关细胞因子不同时间点大鼠血清IL-13的含量检测结果
        3.3 Th17相关细胞因子不同时间点大鼠血清IL-17A含量的检测结果
    小结
讨论
    1.关于放射性肺损伤模型
        1.1 动物模型的建立与评价
        1.2 放疗剂量的选择
    2.RILI病因病机射线伏毒是关键
    3.新加升降散干预放射性肺损伤的科学性
    4.新加升降散的有效性
    5.新加升降散的作用机制
    6.放射性肺损伤的病机与关键治法
        6.1 正虚热伏
        6.2 热毒内伏
        6.3 痰瘀化热
        6.4 伏毒化火
结论
创新性与特色
问题与展望
致谢
参考文献
附件1：附图
附件2：综述 放射性肺损伤的研究进展
    参考文献
附件3：在读期间公开发表的学术论文、著作及科研成果

【参考文献】

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本文编号：2881048