葛根素对臂丛根性撕脱伤大鼠脊髓前角GFAP、iNOS、CGRP蛋白表达的影响

发布时间：2020-11-15 11:43

　　 目的:探讨中药葛根提取物葛根素对大鼠臂丛神经根性撕脱伤(brachial plexus root avulsion injury,BPRAI)脊髓前角GFAP、iNOS、CGRP蛋白表达及血清iNOS表达的影响。方法:50只成年雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、葛根素低、中、高剂量治疗组,每组10只。采用椎管内撕脱大鼠右侧脊髓C_5-C_7脊神经前根、同时剪断C_5-C_7后根的方法进行BPRAI造模。术后低、中、高剂量治疗组进行葛根素腹腔注射给药,剂量分别为50 mg·kg~(-1)·d~(-1)、100 mg·kg~(-1)·d~(-1)、200 mg·kg~(-1)·d~(-1),正常组、模型组注射等体积生理盐水,连续给药4w。尼氏染色法检测大鼠脊髓前角α-运动神经元(α-motorneurons,α-MNs)的存活率,免疫荧光化学方法检测脊髓前角GFAP、p-Akt1/2/3蛋白表达,比色法测定血清iNOS和总NOS的含量,免疫印迹方法检测损伤侧脊髓GFAP、iNOS、CGRP的蛋白表达。结果:1.尼氏染色结果显示:与正常组相比,模型组损伤侧脊髓前角α-MNs存活率显著降低(P0.01);与模型组比较,中、高剂量的葛根素治疗可显著提高α-MNs的存活率(P0.01)。2.免疫荧光化学结果显示:与正常组相比,模型组损伤侧脊髓前角GFAP蛋白表达升高(P0.01);与模型组相比,中、高剂量葛根素治疗组GFAP蛋白表达降低(P0.01);与低剂量组相比,中、高剂量葛根素治疗组GFAP蛋白表达降低(P0.05或P0.01)。与正常组相比,模型组损伤侧脊髓前角胶质细胞大量表达p-Akt1/2/3(P0.01);与模型组相比,低、中、高剂量葛根素均可抑制胶质细胞表达p-Akt1/2/3(P0.05或P0.01);与低剂量组相比,高剂量葛根素均可抑制胶质细胞表达p-Akt1/2/3(P0.05)。3.血清生化检测结果显示:与模型组相比,低、中剂量组的iNOS、总NOS表达升高(P0.05或P0.01);与低剂量组相比,高剂量组的总NOS表达下降(P0.05)。4.免疫印迹实验结果显示:与模型组相比,高剂量组损伤侧脊髓iNOS蛋白表达下降(P0.05);与低剂量组相比,高剂量组损伤侧脊髓iNOS蛋白表达下降(P0.05)。与正常组相比,模型组GFAP蛋白表达增加(P0.05);与模型组相比,低、中、高剂量组GFAP蛋白表达均下降(P0.05)。与正常组相比,模型组CGRP蛋白表达下降(P0.05);与模型组相比,高剂量组CGRP蛋白表达上升(P0.05)。结论:葛根素可提高臂丛根性撕脱后脊髓前角运动神经元的存活率,其机制可能与其抑制脊髓前角星形胶质细胞活化以及iNOS、GFAP蛋白表达,促进CGRP蛋白表达有关,并且可能有p-Akt信号通路的参与。此外,其治疗作用呈现剂量依赖性,中、高剂量疗效最优。
【学位单位】：湖北民族大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R285.5
【部分图文】：

俯卧位置于小动物简易固定台，碘伏消毒（所用器械均已高压灭菌）。（1）手术刀于后颈部纵行切开皮肤2.0cm，分离筋膜、肌肉，暴露脊柱椎板，以胸2棘突作为骨性标志确定脊柱节段（见图2-1A）。使用椎板咬骨钳进行右侧半椎板切除术，打开C4-T1节段脊髓以暴露C5-C7脊神经，解剖显微镜下打开硬脊膜，使用眼科剪剪断右侧C5-C7的后根，弯钩撕脱相应的前根（见图2-1B），过程中可观察到脑脊液从撕脱处流出，并切除撕脱远端2mm以防止神经再生（见图2-1C）。使用2.5%庆大霉素冲洗手术部位，并纱布蘸干，蚕丝线逐层缝合颈后肌群、皮肤

Terzis梳理实验图示

脊髓前角 -MNs 大量减少，差异具有统计学意义（P＜0.01）；与模型组相比，葛根素中、高剂量组损伤侧脊髓前角 -MNs 数量显著增加，差异均具有统计学意义（P＜0.01）（见图 2-3）。
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本文编号：2884719