荭草抗肿瘤活性提取物质量标志物的初步研究

发布时间：2020-11-15 12:21

　　 目的基于质量标志物(Q-marker)理论,分析具有抗肿瘤活性的荭草醋酸乙酯提取物的成分,研究其质量控制方法。方法首先使用UPLC-ESI-HRMS对该提取物进行成分鉴定;再使用HPLC进行成分的定量测定,同时建立其定量测定方法,并对鉴定出的化合物进行药理作用分析,初步预测Q-marker;最后采用人非小细胞肺癌A549细胞模型,研究荭草醋酸乙酯提取物及6种候选成分混合物对A549肿瘤细胞生长及迁移的影响。结果通过UPLC-ESI-HRMS结果指认出12个化合物,其中,HPLC未检出原儿茶酸、儿茶素、山柰素和芹菜素,异牡荆素和木犀草素质量分数低于0.01mg/g,不纳入Q-marker候选物之列。结合药理作用分析,最终选择了6种成分没食子酸、异荭草苷、荭草苷、牡荆素、木犀草苷和槲皮苷作为其潜在Q-marker。各样品中均能检测出这6个成分,且6个成分总量超过10%。荭草醋酸乙酯提取物及等剂量6成分混合物均能显著抑制A549细胞的增殖与迁移,并诱导其凋亡,且两组之间效果无显著性差异。结论没食子酸、异荭草苷、荭草苷、牡荆素、木犀草苷和槲皮苷作为具有抗肿瘤活性的荭草醋酸乙酯提取物中的潜在Q-marker具有科学合理性;建立的荭草醋酸乙酯提取物的HPLC定量测定方法准确、稳定。
【部分图文】：

UPLC-ESI-HRMS鉴定发现POEa中含有没食子酸、原儿茶酸、儿茶素、牡荆素、槲皮苷、山柰素、木犀草素、芹菜素、异荭草苷、荭草苷、异牡荆素、木犀草苷12种成分，见图1和表1。以荭草苷为例，该化合物在供试品中的保留时间为12.64 min，一级质谱信息显示其在负离子模式下响应较正离子好，并得到m/z 447.093 0的准分子离子峰[M-H]-，经Xcalibar软件拟合后推测其分子式为C21H20O11，该化合物的二级离子碎片信息主要有m/z 357.061 7、m/z 327.051 1、分别对应[M-H-C3H6O3]-、[M-H-C4H8O4]-；推测其裂解途径符合黄酮类化合物的裂解规律，结合文献分析[15]，最终确定该化合物为荭草苷。

没食子酸、异荭草苷、荭草苷、牡荆素、木犀草苷及槲皮苷质量分数RSD分别为0.8%、1.3%、0.9%、1.0%、0.7%、0.8%，表明该方法重复性良好。3.2.6 加样回收率试验结果

本研究应用刘昌孝院士[11]提出的“质量标志物”（Q-marker）的理论，通过UPLC-ESI-HRMS结合对照品指认了12种成分；再通过化合物与抗肿图4 POEa和混合物对A549细胞凋亡率的影响
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本文编号：2884754