青蒿素对脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞NF-κB信号通路激活和NO合成的影响

发布时间：2020-11-18 02:37

　　 目的:研究青蒿素对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞中核因子-κB(NF-κB)信号通路激活和NO合成的影响。方法:将小鼠巨噬细胞Raw264.7分成5组。LPS组细胞以含有1 mg/L LPS的细胞培养液培养;青蒿素20、40、80 mg/L组细胞分别以含有1 mg/L LPS和20、40、80 mg/L青蒿素的细胞培养液培养;空白对照组以不含LPS和青蒿素的细胞培养液培养。细胞培养24 h后,ELISA法检测培养上清中TNF-α、IL-1β含量,Griess试剂法检测培养上清中NO含量,Western blot法检测细胞中Toll样受体4(TLR4)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、IκB-α蛋白,细胞质和细胞核中NF-κB p65蛋白的表达。结果:与空白对照组比较,LPS组细培养上清中TNF-α、IL-1β、NO含量升高(P0.05),细胞中TLR4、iNOS蛋白表达水平增加,IκB-α蛋白表达水平降低,细胞质中NF-κB p65蛋白表达水平降低,细胞核中NF-κB p65蛋白表达水平升高(P0.05)。与LPS组比较,各浓度青蒿素组TNF-α、IL-1β、NO含量降低,TLR4、iNOS蛋白表达水平降低, IκB-α蛋白表达水平增加,细胞质中NF-κB p65蛋白表达水平增加,细胞核中NF-κB p65蛋白表达水平降低(P0.05);青蒿素80 mg/L组上述改变更显著(P0.05)。结论:青蒿素可抑制LPS诱导的小鼠巨噬细胞NF-κB信号通路的激活和NO的合成。
【部分图文】：

见图1和表3。与空白对照组比较,LPS组细胞中TLR4蛋白表达水平升高,IκB-α蛋白表达水平降低(P<0.05)。与LPS组比较,各青蒿素处理组细胞中TLR4蛋白表达水平降低,IκB-α蛋白表达水平升高(P<0.05);且青蒿素80 mg/L组细胞中TLR4蛋白表达水平最低,IκB-α蛋白水平最高P<0.05)。表2 5组巨噬细胞NO分泌量和iNOS表达水平的比较 组别 n c(NO)/(μmol/L) iNOS 空白对照组 3 6.52±0.84 0.15±0.01 LPS组 3 36.20±2.58 0.95±0.12 青蒿素20 mg/L组 3 19.35±1.23 0.76±0.06 青蒿素40 mg/L组 3 14.27±1.10 0.58±0.05 青蒿素80 mg/L组 3 10.36±1.37 0.30±0.06 F 167.708 66.242 P <0.001 <0.001 组间两两比较，P均<0.05

见图2、表4。与空白对照组比较,LPS组胞质中NF-κB p65蛋白表达水平降低,胞核中NF-κB p65蛋白表达水平升高(P<0.05)。与LPS组比较,各青蒿素处理组胞质中NF-κB p65蛋白表达水平升高,胞核中NF-κB p65蛋白表达水平降低(P<0.05);且青蒿素80 mg/L组的变化最显著(P<0.05)。表4 5组巨噬细胞胞质和胞核中NF-κB p65表达水平的比较 组别 n 胞质NF-κB p65 胞核NF-κB p65 空白对照组 3 0.87±0.09 0.16±0.02 LPS组 3 0.26±0.05 0.73±0.05 青蒿素20 mg/L组 3 0.39±0.04 0.58±0.06 青蒿素40 mg/L组 3 0.60±0.05 0.39±0.03 青蒿素80 mg/L组 3 0.79±0.08 0.22±0.01 F 47.467 115.060 P <0.001 <0.001 组间两两比较，P均<0.05
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