中药提取物对饥饿应激果蝇胰岛素代谢和细胞自噬的影响

发布时间：2020-11-18 18:48

　　 胰岛素抵抗是由于胰岛β细胞所分泌的胰岛素不能发挥正常作用而引起的代谢紊乱。胰岛素信号通路是调节胰岛素代谢的直接途径。研究表明,通过自噬清除受损的细胞器以及错误折叠的蛋白质等,对调节β细胞的数量及结构起到关键性作用。因此,由于饥饿应激条件下造成的代谢紊乱以及细胞自噬之间的关系成为研究热点。果蝇的胰岛素信号通路通过营养条件调控细胞的增殖与生长,并最终实现细胞代谢和细胞大小的相互统一,营养均衡吸收会促进合成代谢、细胞生长、细胞循环;反之,饥饿则会引起相反的作用。中药具有来源广泛、历史悠久、作用范围较大、价格较低廉等优点。为了探究中药对饥饿诱导的果蝇胰岛素信号的影响,本实验通过对果蝇的爬行能力、生长速度以及饥饿生存率分析,从150种中药中筛选了五味子、元胡、茵陈、竹茹、降香、菖蒲、杜仲、山慈菇、女贞子、白鲜皮10种效果明显的中药。为了进一步探究这10种中药对胰岛素信号通路以及细胞自噬的影响,分析了喂食中药后饥饿条件下的脂滴大小、细胞核面积、p62的积累水平、mCherry-Atg8a的表达量、PH3+细胞数量以及Chico~1/CyO、Akt1/Q/TM3.Sb两种胰岛素通路突变体的生存率。实验结果表明在饥饿诱导的条件下,五味子、元胡、茵陈、降香、竹茹、菖蒲能够显著增加脂肪油滴面积;五味子、元胡、茵陈、竹茹、降香、菖蒲、山慈菇、白鲜皮增加p62的积累并降低mCherry-Atg8a表达量;五味子、元胡、茵陈、竹茹、杜仲增加PH3阳性细胞的数量。另外,五味子、元胡、茵陈、降香、竹茹、菖蒲、杜仲、山慈菇、女贞子、白鲜皮能够显著提高Chico~1/CyO和Akt_1Q/TM3.Sb胰岛素通路突变体果蝇饥饿后的生存率。因此,我们筛选的10种中药在一定程度上能够缓解饥饿诱导果蝇的胰岛素代谢紊乱和细胞自噬的影响,此结果能够为中药的综合开发与利用提供理论基础。
【学位单位】：东北林业大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R285.5
【部分图文】：

草、白蔹、艾叶、郁金、海金沙、地骨皮、白茅根、仙鹤草、夏枯草、枸杞子、紫苑、??紫花地丁、荔枝核、远志、玉竹、诃子、黄芩、薤白、桂枝、百部、黄连、马齿苋、决??明子、败酱草、白花蛇舌草、通草、桃仁、玄参（图３－１）。??Ａ??１００?，…??▲?＊?▲?■对照??絜?８０．?＾?，，?Ａ?－?＾——，▲中药??Ｓ６０／?ｄ，?＊．＊?４?＊?、七‘??爿?▲、?Ｖ?‘?＊?▲?▲??益?４０?＊?＊?＊?＊?４?＼??Ｓ?？?＂?▲?▲?＊??２０?＊?＊?▲?▲??＿?▲?▲??０????????１?＊?４??０?３０?６０?９０?１２０?１５０??中药编号??图３－１?１５０种中药对果蝇的爬行能力的影响??Ｆｉｇ．３－１?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?１５０?ｋｉｎｄｓ?ｏｆ?Ｃｈｉｎｅｓｅ?ｈｅｒｂａｌ?ｏｎ?ｃｌｉｍｂｉｎｇ?ａｂｉｌｉｔｙ．??３．２对生存率的影响??野生型果蝇ｗ／／／ｓ分别喂食１５０种中药，羽化后的果蝇进行饥饿处理，分别检测饥??饿后果蝇的生存率。对照组果蝇饥饿６４ｈ后的生存率大约是１０％

照组早２４ｈ－４８ｈ的中药共有２１种，分别是杜仲、元胡、女贞子、降香、瞿麦、红花、??连翘、厚朴、地骨皮、桃仁、菟丝子、豆蔻、何首乌、生地、荆芥、草乌、龙胆草、猪??苓、土茯苓、蒲公英、川牛膝（图３－３）。??－１１－??

此为进一步探索在饥饿条件下脂肪体中脂肪的积累情况以及喂食中药后对机体脂肪的贮??存的影响，本实验对果蝇的三龄幼虫的脂肪油滴面积进行了?ＢＯＤＩＰＹ染色分析。??结果如图３－４?（Ａ－Ａ”）所示，在ｍ／＾果蝇喂食正常培养基的条件下，与饥饿Ｏｈ相??比较，饥饿２４ｈ后，脂肪油滴几乎没有变化（Ｐ＞（？．０５）；和正常喂食和饥饿２４ｈ相比，??在饥饿４８ｈ后，脂肪油滴面积显著减小３３．４％。结果表明：在饥饿时间延长的情况下，??机体会消耗体内的脂肪来维持自身的稳态。??结果如图３－４?（Ａ－Ｋ）所示，与饥饿０ｈ、喂食正常培养基相比，喂食五味子后脂肪??油滴面积显著增加５９．６％?洲／），竹茹稍有增加１３．４％?（户＜０．〇７），喂食白鲜皮后??脂肪油滴面积显著减小４０．８３％?杜仲、山慈菇稍微减小（Ｐ＜Ｔ）．０／），其余??中药没有显著变化（Ｚ５＞０．０５）；结果如图３－４?（Ａ＇－Ｋ＇）所示，与对照组饥饿２４ｈ相比，??喂食五味子、茵陈后脂肪油滴面积显著增加４３．１％、３２．３％，喂食白鲜皮后脂肪油滴面??积显著减小４０．８２％
【参考文献】

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本文编号：2889069