CyclinD1、E在COPD大鼠气道重塑中的作用机制及复方血栓通胶囊干预的研究

发布时间：2020-11-18 23:27

　　目的:本课题采用烟熏的方法建立COPD大鼠模型,选用具有活血化瘀功效的中成药-复方血栓通胶囊进行干预,通过观察实验前后大鼠肺组织的形态学改变及CyclinD1、CyclinE在mRNA水平及蛋白水平表达的变化,研究CyclinD1、CyclinE在COPD气道重塑中的作用机制及中医活血化瘀法对COPD大鼠气道重塑的干预作用,探讨延缓甚至逆转COPD气道重塑进程的有效机制,为复方血栓通胶囊预防、治疗COPD气道重塑的临床应用提供科学证据。方法:1.建立COPD大鼠模型:采用反复烟熏的方法,可成功制备大鼠COPD模型。2.通过灌胃的方式给药对大鼠进行干预,制作大鼠肺组织石蜡切片,行HE染色后观察支气管、肺泡以及血管的相关变化,并进行分析讨论;应用实时荧光定量(Real-time)PCR技术、酶联免疫吸附法、免疫组化法,检测CyclinD1、CyclinE在mRNA水平及蛋白水平表达变化并进行统计学分析。结果:1.症状学改变COPD模型组大鼠出现不同程度的呼吸加快、喘息、口鼻分泌物增多、烦躁不安、毛发干枯、神情倦怠、活动明显减少或俯伏不动,甚至腹肌抽搐、呼吸困难等表现,表明造模成功。泼尼松组、复方血栓通高剂量组、复方血栓通中剂量组、复方血栓通低剂量组大鼠上述表现均有不同程度减轻,其中高剂量组减轻明显,但仍比泼尼松组差,正常对照组未见异常变化。2.肺组织病理学改变分别取各组大鼠右上肺组织,行HE染色,可见:COPD模型组大鼠支气管黏膜上皮脱落,杯状细胞增多,管壁及周围可见炎症细胞浸润;肺泡结构紊乱,肺泡壁断裂,肺泡融合,形成肺大泡;胶原纤维显著增多,平滑肌细胞过度增殖、细胞排列紊乱,平滑肌层增厚,管腔变窄,血管管壁增厚,以上均符合COPD的病理表现,提示造模成功。泼尼松组、复方血栓通高、中、低剂量干预组大鼠病理结果有不同程度减轻,高剂量组减轻明显但仍比泼尼松组差,正常对照组大鼠支气管、肺泡及血管的结构清晰可见,胶原纤维无明显增多。3.大鼠肺组织中CyclinD1、CyclinE的表达(1)与正常组相比,COPD模型组大鼠肺组织中CyclinD1、CyclinE表达明显上调;(2)泼尼松、复方血栓通胶囊均下调大鼠肺组织中CyclinD1、CyclinE表达水平,与模型组比较,差异有统计学意义(P0.05),高剂量组下调明显,但仍低于泼尼松组。结论:1.在COPD大鼠中CyclinD1、CyclinE表达明显增多,与气道重塑程度(支气管平滑肌厚度)呈正相关,从而推测在COPD气道重塑的形成过程中,CyclinD1、CyclinE起着重要的调节作用。2.复方血栓通胶囊能在一定程度上改善COPD大鼠肺泡、支气管及血管周围炎性细胞浸润。3.复方血栓通胶囊可降低COPD大鼠气道重塑中肺组织CyclinD1、CyclinE的表达,降解胶原的合成,减少气道平滑肌增殖,减缓COPD气道重塑病理学改变。4.祖国传统医学的活血化瘀法可使COPD大鼠气道重塑中相关因子CyclinD1、CyclinE的表达量减少,从而阻止气道平滑肌细胞及胶原的病理性增生,干预COPD气道结构重塑。
【学位单位】：山东中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2017
【中图分类】：R285.5
【部分图文】：

理变,血管,支气管,泼尼松

高剂量组症状减轻最显著，但仍较泼尼松组略差（图 4、5、6）。以 NTS-Elements F 图像分析系统进行测量并作出相关分析，适当调整软件参数，分别对支气管壁内周长（Pi）、支气管管壁面积（WAt）、气道平滑肌肌层面积（WAm）进行测量，用 Pi 对测量结果进行标准化，降低测量误差。用 WAt/Pi 的比值代表支气管管壁厚度、WAm/Pi 的比值代表平滑肌肌层厚度（表 3）。

肺泡,血管,支气管,泼尼松