HPLC-一测多评法结合色差原理分析不同生长年限北苍术药材的质量

发布时间：2020-11-20 13:09

　　 目的:建立同时测定北苍术中白术内酯Ⅱ、β-桉叶醇、苍术素、苍术酮含量的方法,并结合色差原理评价不同生长年限北苍术药材的质量。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法进行测定,色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18,流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长分别为208 nm(白术内酯Ⅱ、β-桉叶醇)、340 nm(苍术素)和220 nm(苍术酮),进样量为15μL。以苍术素为内参物,采用一测多评法建立白术内酯Ⅱ、β-桉叶醇、苍术酮的相对校正因子,并计算不同生长年限北苍术药材中各成分的含量;同时,采用外标法测定上述成分含量,并与一测多评法结果进行比较。基于色差原理对不同生长年限北苍术药材粉末进行颜色测定,采用Pearson相关分析法对苍术药材中上述4种成分含量与其颜色进行相关性分析。结果:白术内酯Ⅱ、β-桉叶醇、苍术素、苍术酮的分离度均大于1.5,检测质量浓度线性范围分别为1.01～10.10、3.30～33.00、4.40～44.00、5.34～53.40μg/mL,精密度、重复性、稳定性试验的RSD均小于2%,平均加样回收率为101.34%～104.67%(RSD1.5%,n=6);以苍术素为内参物,白术内酯Ⅱ、β-桉叶醇、苍术酮的平均校正因子分别为3.896 7、5.928 2、9.727 9,RSD分别为0.35%、2.89%、0.36%(n=6)。采用一测多评法与外标法测得的24批北苍术药材中3种成分(除苍术素外)含量的相对偏差在0.03%～1.45%之间,表明2种方法测定结果一致,且各成分含量随药材生长年限的增加而升高。北苍术药材中白术内酯Ⅱ、β-桉叶醇、苍术素、苍术酮与其颜色亮度(L~*)、色差值(E~*ab)呈显著负相关(P0.01),与红绿色度(a~*)、黄蓝色度(b~*)呈显著正相关(P0.01)。结论:HPLC-一测多评法可用于北苍术药材中白术内酯Ⅱ、β-桉叶醇、苍术素、苍术酮的含量测定;药材生长年限越长,各成分含量越高;药材颜色与各成分含量显著相关,且颜色偏暗黄棕色的北苍术药材的有效成分含量较高。
【部分图文】：

取“2.1.2”和“2.1.3”项下混合对照品溶液、供试品溶液（编号：S8）和空白溶剂（甲醇），按“2.1.1”项下色谱条件进行测定。结果，各待测成分均达到基线分离，白术内酯Ⅱ、β-桉叶醇、苍术素、苍术酮的理论板数均大于10 000，与各相邻峰间分离度均大于1.5，且溶剂无干扰（图略）。高效液相色谱图见图1。2.1.5 线性关系考察
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