基于蛇足石杉内生真菌生物转化作用的石杉碱甲衍生物制备及活性评价

发布时间：2020-11-20 10:51

　　 微生物转化是天然产物结构修饰的有效手段,开发新的微生物资源是实现转化反应类型和转化产物结构新颖多样化的有力保障。本论文尝试从植物内生真菌中挖掘具有宿主化学成分转化能力的微生物资源,以期拓展宿主化学成分的结构多样性。论文第一章为绪论,对石杉碱甲及其类似物的结构修饰研究进展,以及微生物(包括植物内生真菌)转化在天然产物结构修饰方面的研究进展进行了综述。论文第二章以药用植物蛇足石杉(Huperzia serrata)为研究对象,从不同产地来源的植株中分离得到了120株内生真菌,通过筛选获得了两株具有石杉碱甲和石杉碱乙转化能力的菌株ZJUT-HS28和ZJUT-HS39,经分子生物学鉴定,两菌株分别为Bjerkandera sp.和Irpex lacteus。论文第三章研究了筛选获得的两株菌Bjerkandera sp.ZJUT-HS28和Irpex lacteus ZJUT-HS39对石杉碱甲和石杉碱乙的转化作用。综合运用现代色谱和波谱技术,从Irpex lacteus ZJUT-HS39的转化体系中分离鉴定了2个化合物1和2;其中,化合物1和2互为非对映异构体,均为首次报道的新颖结构石杉碱甲转化产物。从Bjerkandera sp.ZJUT-HS28的转化体系中分离鉴定了5个化合物3-7,其中,化合物3为转化产物8?,15?-环氧化石杉碱乙,为新化合物;化合物4为转化产物8?,15?-环氧化石杉碱甲,该化合物仅有两例报道,均为微生物转化石杉碱甲所得,其中一例为蛇足石杉内生真菌转化石杉碱甲所得。论文第四章对分离得到的转化产物进行了抗神经细胞炎症活性的初步研究。结果显示化合物1和化合物2具有较强的抗炎活性,能够显著提高LPS诱导的星形胶质细胞存活率,为进一步探究石杉碱甲的神经保护作用研究奠定了基础。本论文研究结果提示,利用内生真菌开展宿主植物化学成分的生物转化,能够获得结构新颖的转化产物,为植物来源天然产物的结构修饰提供一种新的方法。
【学位单位】：浙江工业大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R284
【部分图文】：

-2 A 阴沟外侧部位 Hup A 与酶的催化示意图; B HupA 与胆碱酯酶结合部位放大re 1-2 A Catalysis of Hup A and Enzyme in the Outside of the Crypt; B amplified mHupA and cholinesterase binding sites碱甲的化学结构修饰碱甲的结构修饰主要从结构简化、C10、吡啶酮环、脂桥环、环外双等方面着手。在已合成的大量类似物中，只有少部分活性优于天然于石杉碱甲是一个具有三环结构的刚性分子，其特有的桥环和氨基构改造带不少的困难，因此其化学结构改造也具有一定的局限性[10]简化纪 90 年代，何煦昌等[11]通过计算机模拟研究推测石杉碱甲分子结构 2 ( 1 H ) 吡啶酮结构可能是其药效部分，设计并合成了石杉碱甲类

图 2-1 部分蛇足石杉内生真菌Figure 2-1 Endophytic fungi isolated from Huperzia serrata在本节中，利用 PDA 平板培养基分离内生真菌，一共从药用植物蛇足石杉(H.serrata)中分离获得内生真菌 120 株，其中茎中最多，叶中次之，根部最少。在分离过程中，随着分离次数的增加，分离所得内生真菌的重复率也越高，因此，要根据菌株的菌落形态，颜色，大小，生长速率，质地以及菌丝体和孢子的形态特征进行区分，以减少重复率。由于在分离和组织培养中较易染菌，可在灭菌后的培养基中加入 100 mg/L 的青霉素和 200 mg/L 的链霉素即可，以确保所分菌株为内生真菌。

检测 (A 为 Hup A 转化组，-HS28 (A: transformation gro验 TLC 图谱(碘化铋钾显 检测(A 为 Hup A 转化组，-HS39 (A: transformation gro20株内生真菌中初步筛选
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本文编号：2891312