人参蛋白质的提取及其对乳腺癌MCF-7细胞的抗肿瘤作用研究
发布时间：2020-12-05 16:26
目的:为了选出人参蛋白质最佳的提取方法,并对比不同生长年份对人参蛋白质含量的影响;研究人参蛋白质对人乳腺癌MCF-7细胞的抗肿瘤作用及作用机制。方法:分别采用丙酮沉淀法、聚乙二醇6000沉淀法、聚乙二醇20000沉淀法、酚提取法、Trizol提取法提取人参水溶性蛋白质;并对3年、4年、5年生人参的蛋白质含量进行对比,采用Bradford方法测定蛋白质含量,SDS-PAGE电泳鉴定蛋白分子量;分别采用不同浓度人参蛋白质作用于人乳腺癌细胞MCF-7,利用CCK-8方法测定细胞增殖活性,PI染色及流式细胞术检测细胞周期的变化,显微镜下常光观察及DAPI染色法观察细胞的凋亡形态,Annexin V/FITC双染法进一步检测细胞的凋亡情况,采用QPCR及Western Blot实验检测基因及蛋白水平的影响,并通过细胞划伤愈合实验及Transwell趋化小室实验检测细胞迁移情况,研究人参蛋白质的作用机制。结果:采用丙酮沉淀法提取得到的人参蛋白质纯度最高,电泳条带最清晰完整,且通过对3、4、5年人参蛋白质含量的对比,发现3年生人参的蛋白质含量最低,5年生人参的蛋白质含量最高;活性研究结果表明,人参蛋...
【文章来源】：长春中医药大学吉林省
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
蛋白质定量分析标准曲线
图 2 不同提取方法得到蛋白质的提取率及纯度分析AGE 电泳分析不同人参蛋白质提取方法的影响方法提取蛋白SDS-PAGE电泳结果见图3。由图可见，人参5~70kDa之间，主要包括分子量大约为64kDa，29kDa，27k
图 2 不同提取方法得到蛋白质的提取率及纯度分析3.1.3 SDS-PAGE 电泳分析不同人参蛋白质提取方法的影响不同提取方法提取蛋白SDS-PAGE电泳结果见图3。由图可见，人参蛋白质分子量主要分布在15~70kDa之间，主要包括分子量大约为64kDa，29kDa，27kDa，21kDa，18kDa，15kDa的蛋白
【参考文献】：
期刊论文
[1]人参多糖药理活性国内研究新进展[J]. 高笑一,鲍建才,管丽娜,黄志桓,冯雪,黄建军. 人参研究. 2018(05)
[2]人参皂苷CK对MCF-7细胞增殖、凋亡、上皮间质转化、PI3K/Akt信号通路的影响[J]. 姜爽,任艳平,魏琳,孙晓琦,武天琦,郭焱,刘智,宋伍. 中成药. 2018(09)
[3]人参多糖化学的国内研究新进展[J]. 高笑一,鲍建才,黄建军. 人参研究. 2018(04)
[4]人参蛋白质不同提取方法及含量的比较[J]. 任雨贺,刘淑莹,万茜淋. 安徽农业科学. 2018(11)
[5]人参理化及临床研究新进展[J]. 岳晓莉. 中国处方药. 2018(04)
[6]人参化学成分及药理作用研究[J]. 姚梦杰,吕金朋,张乔,张辉,孙佳明. 吉林中医药. 2017(12)
[7]人参皂苷Rg3联合顺铂对肝癌小鼠体内肿瘤的作用[J]. 买二辉,李四桥,雷霆,户平安,査中明,张树交. 临床与病理杂志. 2017(11)
[8]人参多糖与奥沙利铂联合作用对肝癌细胞的生物学行为的影响[J]. 李安,路欣,郭海英. 解放军预防医学杂志. 2017(08)
[9]siRNA-DAD1联合人参皂苷Rh2对肝癌SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响[J]. 罗良,师振予,陈晨,段小辉,向彩岭,毛先海. 肿瘤药学. 2017(04)
[10]人参皂苷Rg1热裂解产物对H22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用[J]. 王梓,许兴月,李琼,蔡恩博,李月茹,李伟,张连学. 中国药学杂志. 2017(15)
博士论文
[1]中药新药低极性人参皂苷ALK抗结直肠癌的作用及机制研究[D]. 孙馨.浙江大学 2018
[2]人参皂苷Rh2通过下调Notch1信号通路调控前列腺癌干细胞生物学行为的实验研究[D]. 王学谦.北京中医药大学 2017
[3]人参皂苷Rg3抗黑色素瘤作用机制的研究[D]. 单秀.大连医科大学 2015
[4]人参多糖免疫活性及抗肿瘤作用[D]. 倪维华.东北师范大学 2010
[5]人参鹿茸中蛋白多肽的纯化及活性研究[D]. 严铭铭.长春中医药大学 2007
硕士论文
[1]人参皂苷Rh2调控白血病细胞凋亡及组蛋白乙酰化修饰的机制研究[D]. 陈益.重庆医科大学 2018
[2]人参皂苷Rg5对人食管癌细胞促凋亡及联合顺铂抗肿瘤作用的研究[D]. 张道明.吉林大学 2018
[3]人参皂苷S-Rh2诱导卵巢癌SKOV3细胞自噬作用及机制的实验研究[D]. 刘洋.吉林大学 2017
[4]不同产区人参中营养成分及有效成分的研究[D]. 陈金鸾.吉林大学 2016
[5]人参活性成分蛋白质、氨基酸、有机酸及核苷类成分研究[D]. 张浩.吉林大学 2016
[6]人参有效成分糖类、挥发油及无机元素的研究[D]. 王庆喜.吉林大学 2016
[7]复方人参挥发油气雾剂抗心肌缺血机制及对血液流变学影响的研究[D]. 张玉.长春中医药大学 2016
[8]1、人参皂苷Rb1对神经干细胞分化的影响2、VPA对神经损伤保护机制的研究[D]. 陈娜娜.东北师范大学 2013
[9]人参蛋白、多肽的提取分离及性质研究[D]. 幺宝金.长春中医药大学 2009
[10]人参蛋白的分离纯化工艺及热稳定性研究[D]. 张巍.长春中医药大学 2007
本文编号：2899742
【文章来源】：长春中医药大学吉林省
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
蛋白质定量分析标准曲线
图 2 不同提取方法得到蛋白质的提取率及纯度分析AGE 电泳分析不同人参蛋白质提取方法的影响方法提取蛋白SDS-PAGE电泳结果见图3。由图可见，人参5~70kDa之间，主要包括分子量大约为64kDa，29kDa，27k
图 2 不同提取方法得到蛋白质的提取率及纯度分析3.1.3 SDS-PAGE 电泳分析不同人参蛋白质提取方法的影响不同提取方法提取蛋白SDS-PAGE电泳结果见图3。由图可见，人参蛋白质分子量主要分布在15~70kDa之间，主要包括分子量大约为64kDa，29kDa，27kDa，21kDa，18kDa，15kDa的蛋白
【参考文献】：
期刊论文
[1]人参多糖药理活性国内研究新进展[J]. 高笑一,鲍建才,管丽娜,黄志桓,冯雪,黄建军. 人参研究. 2018(05)
[2]人参皂苷CK对MCF-7细胞增殖、凋亡、上皮间质转化、PI3K/Akt信号通路的影响[J]. 姜爽,任艳平,魏琳,孙晓琦,武天琦,郭焱,刘智,宋伍. 中成药. 2018(09)
[3]人参多糖化学的国内研究新进展[J]. 高笑一,鲍建才,黄建军. 人参研究. 2018(04)
[4]人参蛋白质不同提取方法及含量的比较[J]. 任雨贺,刘淑莹,万茜淋. 安徽农业科学. 2018(11)
[5]人参理化及临床研究新进展[J]. 岳晓莉. 中国处方药. 2018(04)
[6]人参化学成分及药理作用研究[J]. 姚梦杰,吕金朋,张乔,张辉,孙佳明. 吉林中医药. 2017(12)
[7]人参皂苷Rg3联合顺铂对肝癌小鼠体内肿瘤的作用[J]. 买二辉,李四桥,雷霆,户平安,査中明,张树交. 临床与病理杂志. 2017(11)
[8]人参多糖与奥沙利铂联合作用对肝癌细胞的生物学行为的影响[J]. 李安,路欣,郭海英. 解放军预防医学杂志. 2017(08)
[9]siRNA-DAD1联合人参皂苷Rh2对肝癌SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响[J]. 罗良,师振予,陈晨,段小辉,向彩岭,毛先海. 肿瘤药学. 2017(04)
[10]人参皂苷Rg1热裂解产物对H22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用[J]. 王梓,许兴月,李琼,蔡恩博,李月茹,李伟,张连学. 中国药学杂志. 2017(15)
博士论文
[1]中药新药低极性人参皂苷ALK抗结直肠癌的作用及机制研究[D]. 孙馨.浙江大学 2018
[2]人参皂苷Rh2通过下调Notch1信号通路调控前列腺癌干细胞生物学行为的实验研究[D]. 王学谦.北京中医药大学 2017
[3]人参皂苷Rg3抗黑色素瘤作用机制的研究[D]. 单秀.大连医科大学 2015
[4]人参多糖免疫活性及抗肿瘤作用[D]. 倪维华.东北师范大学 2010
[5]人参鹿茸中蛋白多肽的纯化及活性研究[D]. 严铭铭.长春中医药大学 2007
硕士论文
[1]人参皂苷Rh2调控白血病细胞凋亡及组蛋白乙酰化修饰的机制研究[D]. 陈益.重庆医科大学 2018
[2]人参皂苷Rg5对人食管癌细胞促凋亡及联合顺铂抗肿瘤作用的研究[D]. 张道明.吉林大学 2018
[3]人参皂苷S-Rh2诱导卵巢癌SKOV3细胞自噬作用及机制的实验研究[D]. 刘洋.吉林大学 2017
[4]不同产区人参中营养成分及有效成分的研究[D]. 陈金鸾.吉林大学 2016
[5]人参活性成分蛋白质、氨基酸、有机酸及核苷类成分研究[D]. 张浩.吉林大学 2016
[6]人参有效成分糖类、挥发油及无机元素的研究[D]. 王庆喜.吉林大学 2016
[7]复方人参挥发油气雾剂抗心肌缺血机制及对血液流变学影响的研究[D]. 张玉.长春中医药大学 2016
[8]1、人参皂苷Rb1对神经干细胞分化的影响2、VPA对神经损伤保护机制的研究[D]. 陈娜娜.东北师范大学 2013
[9]人参蛋白、多肽的提取分离及性质研究[D]. 幺宝金.长春中医药大学 2009
[10]人参蛋白的分离纯化工艺及热稳定性研究[D]. 张巍.长春中医药大学 2007
本文编号：2899742
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