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岩藻聚糖硫酸酯吸收机制和组织分布研究

发布时间:2020-12-05 16:57
  岩藻聚糖硫酸酯主要存在于褐藻和某些海洋无脊椎动物中,是一种带负电荷的大分子水溶性硫酸杂多糖,主要成分为岩藻糖,具有抗炎、抗肿瘤、抗氧化、降血脂、抗血栓、抗病毒和提高免疫力等药理活性,但要将其开发为口服的海洋创新药物,目前尚缺少有力的口服吸收机制和体内组织分布等方面的理论基础。这主要有两个原因:一通常认为大分子多糖很难经口服被机体吸收利用;二多糖复杂的分子结构使其检测尤其是生物样品中的检测存在一定困难。为解决上述问题,本课题拟用FITC标记不同分子量的岩藻聚糖硫酸酯,通过Caco-2细胞Transwell小室7天快速培养模型,研究不同分子量岩藻聚糖硫酸酯的吸收机制,并初步探讨岩藻聚糖硫酸酯在小鼠体内的组织分布,为岩藻聚糖硫酸酯的开发利用提供实验支持。具体包括以下几个方面:(1)FITC荧光标记高、低分子量岩藻聚糖硫酸酯用FITC分别对高分子量岩藻聚糖硫酸酷(HMWF)和低分子量岩藻聚糖硫酸酯(LMWF)进行荧光标记得其衍生物FITC-HMWF、FITC-LMWF,检测标记前后HMWF中岩藻糖含量分别为38.44%和41.56%,硫酸根含量分别为19.54%和20.97%;LMWF中岩藻糖... 

【文章来源】:山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:71 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

岩藻聚糖硫酸酯吸收机制和组织分布研究


图2?MTT法检测嘌呤霉素对Caco-2细胞的毒性??Fig.2The?cytotoxicity?of?puromycin?(MTT?assay)??

细胞,荧光黄,毒性,膜通透性


图3Caco-2细胞不同密度下TEER值(n*cm2)对比??Fig.3?TEER?comparison?at?different?concentration?of?Caco-2?cell?density??p>0.05?shows?no?difference;?*?p<0.05?shows?a?difference:??3.1.2.Caco-2细胞单层膜通透性实验??3.1.2.1.MTT法检测荧光黄和FITC在Caco-2细胞中的毒性??细胞单层膜不透过标志物荧光黄和FITC对Caco-2细胞的毒性结果如图4??所示,250?pg/mL的浓度下,荧光黄和FITC均不会抑制Caco-2细胞的增殖,与??空白相比,无差异&>〇.〇5),故在检测荧光黄和FITC透过率实验中荧光黄和FITC??采用250?pg/mL的作用浓度。??

荧光黄,细胞毒性,毒性


3.1.2.Caco-2细胞单层膜通透性实验??3.1.2.1.MTT法检测荧光黄和FITC在Caco-2细胞中的毒性??细胞单层膜不透过标志物荧光黄和FITC对Caco-2细胞的毒性结果如图4??所示,250?pg/mL的浓度下,荧光黄和FITC均不会抑制Caco-2细胞的增殖,与??空白相比,无差异&>〇.〇5),故在检测荧光黄和FITC透过率实验中荧光黄和FITC??采用250?pg/mL的作用浓度。??32??

【参考文献】:
期刊论文
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硕士论文
[1]岩藻聚糖硫酸酯的肠吸收及其药代动力学初步研究[D]. 褚福龙.山东大学 2017



本文编号:2899781

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