灵芝属多糖对肾上腺酮诱导神经细胞凋亡的保护作用
发布时间:2020-12-05 17:40
[目的]筛选和评价灵芝属多糖对肾上腺酮(CORT)诱导神经损伤的保护作用,为灵芝在抗抑郁功能方面的开发奠定基础。[方法]以CORT诱发神经细胞发生损伤后给予灵芝属多糖提取物,分别通过MTT法、乳酸脱氢酶(LDH)胞外释放法、总DNA定量分析法以及荧光标记法确定细胞毒性以及对损伤细胞的保护作用。[结果]结果显示灵芝属多糖在低作用浓度下对PC12细胞不具有毒性,在100μg/mL的作用浓度下灵芝孢子粉多糖(PGL)可以显著提高损伤细胞存活率的比例为22%,减少LDH的释放比例为11.08%,增加胞内总DNA含量14.65%,是所有待测多糖中作用最佳的。[结论]PGL对细胞具有低毒的特点,显著改善CORT对细胞的损伤作用,具有明显的神经保护作用,可作为抗抑郁药物进行研究和开发。
【文章来源】:生物技术. 2020年03期 第269-274页
【文章页数】:6 页
【部分图文】:
灵芝属多糖提取物的细胞毒性检测
通过检测受损神经细胞胞外乳酸脱氢酶(LDH)的活性也可以体现灵芝属多糖的保护作用。其结果与细胞存活(MTT)检测结果相一致。与对照组相比较CORT可以显著增加LDH的胞外释放,释放率为22.29%(图3),说明CORT能够使细胞发生裂解,导致胞内LDH的流出。灵芝属多糖可以保护细胞的完整性,减少LDH的向外释放,其中PGL的效果最显著,可以使释放率降低到11.21%,接近于正常对照组的释放量。其次PLE、PLU和PSI处理组的释放量分别为12.89%、15.96%和16.36%。结果证明灵芝属多糖对神经损伤细胞具有显著的保护作用。图3 灵芝属多糖提取物减少LDH释放的保护作用
图2 灵芝属多糖提取物对损伤神经的保护作用为了进一步证明灵芝属多糖的神经保护作用,定量检测细胞中总DNA的含量可以直观地反映出细胞的数量。荧光燃料标记DNA,通过荧光强度可以定量的地分析完整DNA的含量从而反映活细胞的数量。总DNA检测结果如图4所示,从结果中可以发现CORT可以使细胞内DNA的数量明显下降,仅为对照组的86.57%,与模型组相比较PGL和PLE处理组可以提高受损细胞的存活,保持细胞DNA的结构,总DNA的含量分别可以提高14.65%和6.8%,而PSI和PLU的处理组虽然可以提高总DNA的含量,但是提升效果与模型对照组未达到显著性差异的程度。定量分析结果说明PGL和PLE的效果优于PSI和PLU。
【参考文献】:
期刊论文
[1]灵芝多糖的结构及其表征方法研究进展[J]. 张汇,聂少平,艾连中,夏永军,熊智强,王光强. 中国食品学报. 2020(01)
[2]灵芝防治高血压的研究进展[J]. 赵顺菊,付立忠. 食用菌. 2019(06)
[3]赤芝、紫芝和鹿角灵芝醇提物的活性成分及生物活性研究[J]. 陈建飞,周爱珠,程萱,童文彬,刘玉柱,张海燕,胡玉梅,练明姿,周晶,吕国英,张作法. 食药用菌. 2019(04)
[4]西藏白肉灵芝段木栽培技术[J]. 何焕清,陈淑娟,黄育江,肖自添,刘明,徐江,邱远辉. 中国食用菌. 2019(05)
[5]紫芝子实体活性多糖的纯化和结构解析[J]. 应一君,刘艳芳,张劲松,唐庆九,杨焱,周帅,颜梦秋,张忠,韩伟. 食品与生物技术学报. 2019(01)
[6]灵芝多糖对脂多糖诱导的巨噬细胞TLR4/NF-κB通路调控及下游炎症因子的影响[J]. 杨燕燕,谢金东,周建华,林玮,王训立. 实验动物与比较医学. 2018(06)
[7]灵芝的扶正固本及对“亚健康”者的保健作用[J]. 李卫东,林志彬. 食药用菌. 2016(01)
[8]不同生长期灵芝子实体三萜酸和多糖含量测定[J]. 李保明,华正根,王洪庆,刘超,李晔,陈若芸. 食药用菌. 2016(01)
本文编号:2899836
【文章来源】:生物技术. 2020年03期 第269-274页
【文章页数】:6 页
【部分图文】:
灵芝属多糖提取物的细胞毒性检测
通过检测受损神经细胞胞外乳酸脱氢酶(LDH)的活性也可以体现灵芝属多糖的保护作用。其结果与细胞存活(MTT)检测结果相一致。与对照组相比较CORT可以显著增加LDH的胞外释放,释放率为22.29%(图3),说明CORT能够使细胞发生裂解,导致胞内LDH的流出。灵芝属多糖可以保护细胞的完整性,减少LDH的向外释放,其中PGL的效果最显著,可以使释放率降低到11.21%,接近于正常对照组的释放量。其次PLE、PLU和PSI处理组的释放量分别为12.89%、15.96%和16.36%。结果证明灵芝属多糖对神经损伤细胞具有显著的保护作用。图3 灵芝属多糖提取物减少LDH释放的保护作用
图2 灵芝属多糖提取物对损伤神经的保护作用为了进一步证明灵芝属多糖的神经保护作用,定量检测细胞中总DNA的含量可以直观地反映出细胞的数量。荧光燃料标记DNA,通过荧光强度可以定量的地分析完整DNA的含量从而反映活细胞的数量。总DNA检测结果如图4所示,从结果中可以发现CORT可以使细胞内DNA的数量明显下降,仅为对照组的86.57%,与模型组相比较PGL和PLE处理组可以提高受损细胞的存活,保持细胞DNA的结构,总DNA的含量分别可以提高14.65%和6.8%,而PSI和PLU的处理组虽然可以提高总DNA的含量,但是提升效果与模型对照组未达到显著性差异的程度。定量分析结果说明PGL和PLE的效果优于PSI和PLU。
【参考文献】:
期刊论文
[1]灵芝多糖的结构及其表征方法研究进展[J]. 张汇,聂少平,艾连中,夏永军,熊智强,王光强. 中国食品学报. 2020(01)
[2]灵芝防治高血压的研究进展[J]. 赵顺菊,付立忠. 食用菌. 2019(06)
[3]赤芝、紫芝和鹿角灵芝醇提物的活性成分及生物活性研究[J]. 陈建飞,周爱珠,程萱,童文彬,刘玉柱,张海燕,胡玉梅,练明姿,周晶,吕国英,张作法. 食药用菌. 2019(04)
[4]西藏白肉灵芝段木栽培技术[J]. 何焕清,陈淑娟,黄育江,肖自添,刘明,徐江,邱远辉. 中国食用菌. 2019(05)
[5]紫芝子实体活性多糖的纯化和结构解析[J]. 应一君,刘艳芳,张劲松,唐庆九,杨焱,周帅,颜梦秋,张忠,韩伟. 食品与生物技术学报. 2019(01)
[6]灵芝多糖对脂多糖诱导的巨噬细胞TLR4/NF-κB通路调控及下游炎症因子的影响[J]. 杨燕燕,谢金东,周建华,林玮,王训立. 实验动物与比较医学. 2018(06)
[7]灵芝的扶正固本及对“亚健康”者的保健作用[J]. 李卫东,林志彬. 食药用菌. 2016(01)
[8]不同生长期灵芝子实体三萜酸和多糖含量测定[J]. 李保明,华正根,王洪庆,刘超,李晔,陈若芸. 食药用菌. 2016(01)
本文编号:2899836
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