和厚朴酚抑制白色念珠菌的作用机制
发布时间：2020-12-05 21:55
近年来,由于抗生素的滥用,癌症治疗时放疗和化疗的使用,导管等器械对人体的应用等,以白色念珠菌(Candida albicans)为主的真菌感染患病人数,及由此引发的系统性感染的死亡人数不断升高。临床上使用的传统抗真菌药物以唑类、多烯类和棘白菌素类等抗生素为主,因为对人体的毒性大,且真菌易对其产生耐药,所以从天然产物中找寻新的抗真菌药物成为当今研究的热点。传统中药作为中华民族的瑰宝,有几千年应用的历史,具有作用位点多样、毒性低和不易产生耐药等优点,是一个理想的抗真菌药物的来源。和厚朴酚(honokiol)是我国传统中药厚朴的有效成分之一,具有抗菌、抗炎、抗肿瘤、肌肉松弛和抗氧化等广泛的药理作用。已有的研究证明了和厚朴酚对白色念珠菌有较强的抑制作用,但具体的作用机制还不清楚。本文以白色念珠菌ATCC 10231为供试菌株,研究了和厚朴酚对其的抑制作用及具体的作用机制,结果如下:(1)和厚朴酚有广谱的抗菌活性,对白色念珠菌、革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌均有抑制作用;(2)和厚朴酚对白色念珠菌的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度分别为16μg/m L和64μg/m L;(3)和厚朴酚对白色念珠菌的细...
【文章来源】：辽宁师范大学辽宁省
【文章页数】：44 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
和厚朴酚的结构式Fig.1.1Theconstitutionalformulaofhonokiol
图 2.1 和厚朴酚对白色念珠菌的时间-杀菌曲线Fig. 2.1 The time-kill curve of honokiol against Candida albican2.4 小结本实验通过滤纸片法证明了和厚朴酚对白色念珠菌和 7 种细菌都有抑制作用。提和厚朴酚具有广谱抑菌活性。其中，对白色念珠菌的抑制作用最好，其次为金黄色葡球菌等革兰氏阳性菌，而对大肠杆菌等革兰氏阴性菌的抑制作用略差。通过微量稀释法测定了和厚朴酚对白色念珠菌的 MIC80和 MFC，分别为 16 μg/mL 和 64 μg/mL。时间杀菌曲线显示，16 μg/mL 的和厚朴酚对白色念珠菌只有抑制作用，而不能完全杀死菌体而 64 μg/mL 的和厚朴酚作用 2 h 后，即可杀菌体。
图 3.1 蛋白质标准曲线Fig. 3.1 Protein standard curve3.3 和厚朴酚对白色念珠菌麦角甾醇影响的测定为了检测和厚朴酚对真菌细胞膜固醇类的影响，参照[67]的方法，在培养基中加醇进行测定。制备麦角甾醇母液：将麦角甾醇单体晶体用研钵研磨成粉末状，称取 40 mg 的粉末，用 0.5 mL DMSO 溶解，再将其溶解在 1 mL 的吐温 80（Tween 80）中匀的、颗粒细小的乳浊液，将其加入到 100 mL RPMI 1640 培养液中，过滤除。 按 2.3.2 的方法测定培养基中加入麦角甾醇后，和厚朴酚对白色念珠菌的 M性霉素 B 作为阳性对照，用培养液中不加麦角甾醇的实验组为阴性对照。.4 DCFH-DA 染色法检测和厚朴酚对白色念珠菌活性氧积累的影响采用 DCFH-DA 染色法测定和厚朴酚对白色念珠菌细胞内活性氧积累影响1.2 的方法活化白色念珠菌菌株后，用 YEPD 培养液调整菌液浓度至 5×106CFU活性氧检测试剂盒的说明，用 PBS 按 1:1000 稀释 DCFH-DA，使 DCFH-DA 终
【参考文献】：
期刊论文
[1]唑类抗真菌药物耐药机制的研究进展[J]. 刘潇,龙腾腾,郭春丽. 广东医学. 2016(08)
[2]和厚朴酚抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物被膜形成[J]. 乔瑞红,谢鲲鹏,谢明杰. 微生物学报. 2016(08)
[3]白假丝酵母菌临床菌株对氟康唑耐药性及其与CAP1基因相关性研究[J]. 谈潘莉,汪浙炯,赵金方. 中国人兽共患病学报. 2015(04)
[4]和厚朴酚对HL-60细胞增殖抑制作用及其相关机制研究[J]. 范佳鑫,曾英坚,翁光样,吴建伟,李章球,李元明,郑荣,郭坤元. 中国实验血液学杂志. 2014(06)
[5]和厚朴酚对哮喘小鼠气道重构及VEGF表达水平干预作用的研究[J]. 滕鸿,胡敏,刘跃建. 中医临床研究. 2014(27)
[6]超临界流体色谱同时测定厚朴中厚朴酚和和厚朴酚(英文)[J]. 邓亮,郭亚东,杨敏,沈志强,徐文秀. 天然产物研究与开发. 2013(12)
[7]白色念珠菌致病机制及治疗研究进展[J]. 杨丰帅,周厚吾. 现代医药卫生. 2013(22)
[8]和厚朴酚对人肝癌HepG2细胞增殖及NF-kB mRNA表达的影响[J]. 张玉碧,张辉,吕林华,贺小平. 齐齐哈尔医学院学报. 2012(12)
[9]和厚朴酚抑制CFP-10、ESAT-6诱导的人肺泡Ⅱ型上皮细胞炎症因子表达[J]. 沈颖,王叶萍,程林芳,姚航平. 浙江医学. 2012 (08)
[10]和厚朴酚通过抑制脑MPTP开放和调节PARP-1活性保护全脑缺血的作用研究[J]. 杨爽,刘晓岩,胡振宇,陈世忠,王银叶. 中国药理学通报. 2012(02)
本文编号：2900156
【文章来源】：辽宁师范大学辽宁省
【文章页数】：44 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
和厚朴酚的结构式Fig.1.1Theconstitutionalformulaofhonokiol
图 2.1 和厚朴酚对白色念珠菌的时间-杀菌曲线Fig. 2.1 The time-kill curve of honokiol against Candida albican2.4 小结本实验通过滤纸片法证明了和厚朴酚对白色念珠菌和 7 种细菌都有抑制作用。提和厚朴酚具有广谱抑菌活性。其中，对白色念珠菌的抑制作用最好，其次为金黄色葡球菌等革兰氏阳性菌，而对大肠杆菌等革兰氏阴性菌的抑制作用略差。通过微量稀释法测定了和厚朴酚对白色念珠菌的 MIC80和 MFC，分别为 16 μg/mL 和 64 μg/mL。时间杀菌曲线显示，16 μg/mL 的和厚朴酚对白色念珠菌只有抑制作用，而不能完全杀死菌体而 64 μg/mL 的和厚朴酚作用 2 h 后，即可杀菌体。
图 3.1 蛋白质标准曲线Fig. 3.1 Protein standard curve3.3 和厚朴酚对白色念珠菌麦角甾醇影响的测定为了检测和厚朴酚对真菌细胞膜固醇类的影响，参照[67]的方法，在培养基中加醇进行测定。制备麦角甾醇母液：将麦角甾醇单体晶体用研钵研磨成粉末状，称取 40 mg 的粉末，用 0.5 mL DMSO 溶解，再将其溶解在 1 mL 的吐温 80（Tween 80）中匀的、颗粒细小的乳浊液，将其加入到 100 mL RPMI 1640 培养液中，过滤除。 按 2.3.2 的方法测定培养基中加入麦角甾醇后，和厚朴酚对白色念珠菌的 M性霉素 B 作为阳性对照，用培养液中不加麦角甾醇的实验组为阴性对照。.4 DCFH-DA 染色法检测和厚朴酚对白色念珠菌活性氧积累的影响采用 DCFH-DA 染色法测定和厚朴酚对白色念珠菌细胞内活性氧积累影响1.2 的方法活化白色念珠菌菌株后，用 YEPD 培养液调整菌液浓度至 5×106CFU活性氧检测试剂盒的说明，用 PBS 按 1:1000 稀释 DCFH-DA，使 DCFH-DA 终
【参考文献】：
期刊论文
[1]唑类抗真菌药物耐药机制的研究进展[J]. 刘潇,龙腾腾,郭春丽. 广东医学. 2016(08)
[2]和厚朴酚抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物被膜形成[J]. 乔瑞红,谢鲲鹏,谢明杰. 微生物学报. 2016(08)
[3]白假丝酵母菌临床菌株对氟康唑耐药性及其与CAP1基因相关性研究[J]. 谈潘莉,汪浙炯,赵金方. 中国人兽共患病学报. 2015(04)
[4]和厚朴酚对HL-60细胞增殖抑制作用及其相关机制研究[J]. 范佳鑫,曾英坚,翁光样,吴建伟,李章球,李元明,郑荣,郭坤元. 中国实验血液学杂志. 2014(06)
[5]和厚朴酚对哮喘小鼠气道重构及VEGF表达水平干预作用的研究[J]. 滕鸿,胡敏,刘跃建. 中医临床研究. 2014(27)
[6]超临界流体色谱同时测定厚朴中厚朴酚和和厚朴酚(英文)[J]. 邓亮,郭亚东,杨敏,沈志强,徐文秀. 天然产物研究与开发. 2013(12)
[7]白色念珠菌致病机制及治疗研究进展[J]. 杨丰帅,周厚吾. 现代医药卫生. 2013(22)
[8]和厚朴酚对人肝癌HepG2细胞增殖及NF-kB mRNA表达的影响[J]. 张玉碧,张辉,吕林华,贺小平. 齐齐哈尔医学院学报. 2012(12)
[9]和厚朴酚抑制CFP-10、ESAT-6诱导的人肺泡Ⅱ型上皮细胞炎症因子表达[J]. 沈颖,王叶萍,程林芳,姚航平. 浙江医学. 2012 (08)
[10]和厚朴酚通过抑制脑MPTP开放和调节PARP-1活性保护全脑缺血的作用研究[J]. 杨爽,刘晓岩,胡振宇,陈世忠,王银叶. 中国药理学通报. 2012(02)
本文编号：2900156
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