猴腿蹄盖蕨提取物体内外抗炎作用研究
发布时间：2020-12-08 11:13
蕨类植物在中草药领域应用广泛。一段时期以来,全球各地对新药的开发工作越来越得到众人的重视,对药用蕨类植物更是青睐有加。在众多的蕨类植物中,猴腿蹄盖蕨作为生长在长白山地区的中草药,是能够同时满足药用和食用两方面需求的重要蕨类植物。相关研究显示,该种药用蕨类植物能够起到抗氧化以及抑制细菌增长等作用,然而国内外尚无有关蕨类植物-猴腿蹄盖蕨抗炎作用及其机制的系统研究。本文为探讨猴腿蹄盖蕨乙醇提取物对LPS刺激诱导的小鼠肺损伤的抗炎功效和对LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞的影响,借助信号转导通路平台,探析其对相关的关键蛋白分子以及炎性因子蛋白表达的作用,研究猴腿蹄盖蕨乙醇提取物对小鼠体内外抗炎作用,对猴腿蹄盖蕨的抗炎免疫功效给出科学合理的解释,为猴腿蹄盖蕨的开发与利用提供可靠的理论参考。本文采用MTT方法,深入分析猴腿蹄盖蕨乙醇提取物对小鼠腹腔巨噬细胞的毒害影响;借助ELISA方法,探讨猴腿蹄盖蕨乙醇提取物对LPS引发的TNF-α以及IL-6分泌情况的作用;结合Western blot方法,研究炎症信号通路中相关的关键蛋白分子的影响。通过仔细的研究发现:当猴腿蹄盖蕨乙醇提取物的浓度处于0-200.0...
【文章来源】：延边大学吉林省 211工程院校
【文章页数】：99 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２．?ＡＭ提取物对于经ＬＰＳ所刺激之后的ＮＯ小鼠腹腔巨噬细胞的分泌的具体??影响??
的ＰＧＥ２究竟有无相应的抑制作用加以明确，使用ＬＰＳ刺激细胞并用不同浓度??ＡＭ提取物分别处理细胞２４?ｈ，采纳ＥＬＩＳＡ法来针对细胞上清液之中所具的??ＰＧＥ２含量加以检测，详情见图３。一经ＬＰＳ的具体处理之后，在细胞上清液之??中的ＰＧＥ２其具体含量显著攀升（６０ｐｇ／ｍＬ），在己被ＡＭ提取物经正式处理之??后，其实际含量显见地降低且具特定程度的浓度依赖性，ＰＧＥ２受到来自于最高??剂量组之中的ＡＭ提取物所施以的抑制，而此抑制率具体达５９％。??８０－．??ｌｌｉｌｌ??ＬＰＳ?（０．１?＾ｉｇ／ｍＬ）?－?＋?？?＋?＋?＋??ＡＭ?（＾ｉｇ／ｍＬ）?０?０?１００?２５?５０?１００??图３．经ＬＰＳ的刺激之后小鼠腹腔巨噬细胞的ＰＧＥ２分泌受ＡＭ提取物的影响的??不意图??注：和?ｌｐｓ?组加以比较，＊＊＊／７＜０．洲／??Ｆｉｇ?３．?Ａｔｈｙｒｉｕｍ?ｍｕｌｔｉｄｅｎｔａｔｕｍ?ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ?ｔｈｅ?ｓｅｃｒｅｔｉｏｎｏｆ?ＰＧＥ２ｉｎ?ＬＰＳ－ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ?ｍｏｕ??ｅ?ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ?ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ??Ｎｏｔｅ：?Ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ＬＰＳ?ｇｒｏｕｐ，?＊ｐ＜０．０５ｙ?＊＊ｐ＜０．０１，?＊＊＊ｐ＜０．００１??３．２．２ＡＭ提取物对ＬＰＳ刺激诱导ｉＮＯＳ、ＣＯＸ－２蛋白表达的影??响??见下图（图４）可知，较之于正常的细胞来讲，ＬＰＳ给了?ＰＭ细胞以特定的??刺激后这显见地加大了?ｉＮＯＳ的分泌量，并且对细胞的总的活力并未有影响。但??是用ＡＭ提取物加以处理之后
Ｎｏｔｅ：＊ｐ＜０．０５，?０１，?＾＾＜０．００１??３．３．２人１＾提取物对￡１１１＜：、卩－￡１１１＜蛋白表达的影响??如图９所示，经ＬＰＳ诱导后，ＰＭ细胞的ＥＲＫ磷酸化明显增加。但是经ＡＭ??提取物的事先预处理之后，相较与单纯的ＬＰＳ组而言，这种ＥＲＫ磷酸化水平明??显增加的现象发生显见地减弱，并且还表现出一定程度的剂量依赖性。所说明的??是ＡＭ提取物对ＬＰＳ效应中的ＥＲＫ途径有抑制作用。Ｉｍａｇｅｎ?Ｊ软件分析结果也??提示，ＡＭ在抑制ＬＰＳ的至炎作用中，对ｐ－ＥＲＫ蛋白的表达抑制作用在高剂量??组甚至可以达到６５％。??４６??
【参考文献】：
期刊论文
[1]青蒿素:从中国传统药方到全球抗疟良药[J]. 黎润红,张大庆. 中国科学院院刊. 2019(09)
[2]不同品系小鼠腹腔巨噬细胞对LPS的反应性初步比较研究[J]. 陈伟,马瑞,张腾腾,张涵,李艳茹,李太元. 延边大学农学学报. 2017(01)
[3]针刺治疗脑缺血再灌注损伤机制研究[J]. 王娇,周国平,吴春晓,许秀洪. 中医学报. 2017(01)
[4]金丝桃苷预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤作用与PI3K/Akt信号通路的关系[J]. 韩军,宣佳利,胡浩然,陈志武. 中国中药杂志. 2015(01)
[5]急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征基础及临床研究进展[J]. 施卉,任成山. 中华肺部疾病杂志(电子版). 2013(04)
[6]艾灸对类风湿性关节炎家兔滑膜细胞JAK-STAT通路负反馈调节家族细胞因子信号抑制因子的影响[J]. 杨馨,刘旭光,王月,杨慎峭,金荣疆. 针刺研究. 2013(02)
[7]急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征发病机制的研究进展[J]. 马李杰,李王平,金发光. 中华肺部疾病杂志(电子版). 2013(01)
[8]急性肺损伤的诊治研究现状及进展[J]. 金发光. 中华肺部疾病杂志(电子版). 2013(01)
[9]肝脓肿并发多器官功能衰竭1例治疗分析[J]. 俞晓燕,姜国伟,易清清,倪祖德,周品伟,朱蓓德. 现代医药卫生. 2013(02)
[10]银杏叶提取物对阿尔茨海默病大鼠认知功能的影响及其作用机制[J]. 王暖,耿德勤,黄红莉,周昊,杨秀华,邵丽. 神经损伤与功能重建. 2012(04)
博士论文
[1]蒲公英甾醇对LPS诱导的乳腺炎抗炎作用及调节机制研究[D]. 伞治豪.吉林大学 2014
[2]PI3K/Akt/mTOR通路抑制剂影响乳腺癌干细胞对内分泌治疗和靶向治疗耐药性的研究[D]. 刘艳.天津医科大学 2014
[3]多拉菌素的抗炎作用及其对相关信号转导通路的调控[D]. 闫姝含.吉林大学 2013
[4]氟非尼酮抗炎作用机制研究[D]. 黄玲.中南大学 2013
[5]白花前胡素类化合物抗炎活性以及分子作用机制的研究[D]. 喻鹏久.南方医科大学 2013
[6]维生素A营养对儿童抗手足口病免疫力的影响[D]. 陈思源.复旦大学 2013
[7]红景天苷的抗炎作用及其对炎症信号转导通路的调控[D]. 关爽.吉林大学 2011
[8]沃尼妙林的抗炎作用及对炎症信号转导通路的调控[D]. 陈志宝.吉林大学 2011
[9]复叶耳蕨和金星蕨化学成分及生物活性的研究[D]. 周道年.华中科技大学 2009
硕士论文
[1]芹菜素对LPS诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用[D]. 王玉明.吉林大学 2016
[2]短命植物小拟南芥全长cDNA文库的构建、测序及EST分析[D]. 赵云霞.石河子大学 2014
[3]基于“肾痿”假说的糖肾平对DKD大鼠肾脏保护作用及PI3K/AKT信号转导通路影响的研究[D]. 王颖超.北京中医药大学 2014
[4]中药方“蒲和饮”对小鼠的抗炎效果及抗炎机制研究[D]. 肖蓉.西南大学 2014
[5]中药方剂香芪汤对RAW264.7巨噬细胞炎症信号通路的调节机制研究[D]. 宋舟.吉林大学 2013
[6]连翘酯苷对鸡胸腺组织中炎症因子及抗氧化的作用[D]. 吴悦.东北农业大学 2013
[7]雪胆素甲对脂多糖活化的巨噬细胞RAW264.7的炎症反应的影响及其机制研究[D]. 何健.暨南大学 2013
[8]鬼针草总黄酮的抗炎作用及部分机制研究[D]. 林梅英.安徽医科大学 2013
[9]TLR2、TLR4及相关细胞因子在军团菌感染作用机制的体外实验研究[D]. 高向东.山西医科大学 2012
[10]柴胡多糖对巨噬细胞免疫功能的调节及对TLR4信号通路的影响[D]. 武剑.复旦大学 2012
本文编号：2904995
【文章来源】：延边大学吉林省 211工程院校
【文章页数】：99 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２．?ＡＭ提取物对于经ＬＰＳ所刺激之后的ＮＯ小鼠腹腔巨噬细胞的分泌的具体??影响??
的ＰＧＥ２究竟有无相应的抑制作用加以明确，使用ＬＰＳ刺激细胞并用不同浓度??ＡＭ提取物分别处理细胞２４?ｈ，采纳ＥＬＩＳＡ法来针对细胞上清液之中所具的??ＰＧＥ２含量加以检测，详情见图３。一经ＬＰＳ的具体处理之后，在细胞上清液之??中的ＰＧＥ２其具体含量显著攀升（６０ｐｇ／ｍＬ），在己被ＡＭ提取物经正式处理之??后，其实际含量显见地降低且具特定程度的浓度依赖性，ＰＧＥ２受到来自于最高??剂量组之中的ＡＭ提取物所施以的抑制，而此抑制率具体达５９％。??８０－．??ｌｌｉｌｌ??ＬＰＳ?（０．１?＾ｉｇ／ｍＬ）?－?＋?？?＋?＋?＋??ＡＭ?（＾ｉｇ／ｍＬ）?０?０?１００?２５?５０?１００??图３．经ＬＰＳ的刺激之后小鼠腹腔巨噬细胞的ＰＧＥ２分泌受ＡＭ提取物的影响的??不意图??注：和?ｌｐｓ?组加以比较，＊＊＊／７＜０．洲／??Ｆｉｇ?３．?Ａｔｈｙｒｉｕｍ?ｍｕｌｔｉｄｅｎｔａｔｕｍ?ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ?ｔｈｅ?ｓｅｃｒｅｔｉｏｎｏｆ?ＰＧＥ２ｉｎ?ＬＰＳ－ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ?ｍｏｕ??ｅ?ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ?ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ??Ｎｏｔｅ：?Ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ＬＰＳ?ｇｒｏｕｐ，?＊ｐ＜０．０５ｙ?＊＊ｐ＜０．０１，?＊＊＊ｐ＜０．００１??３．２．２ＡＭ提取物对ＬＰＳ刺激诱导ｉＮＯＳ、ＣＯＸ－２蛋白表达的影??响??见下图（图４）可知，较之于正常的细胞来讲，ＬＰＳ给了?ＰＭ细胞以特定的??刺激后这显见地加大了?ｉＮＯＳ的分泌量，并且对细胞的总的活力并未有影响。但??是用ＡＭ提取物加以处理之后
Ｎｏｔｅ：＊ｐ＜０．０５，?０１，?＾＾＜０．００１??３．３．２人１＾提取物对￡１１１＜：、卩－￡１１１＜蛋白表达的影响??如图９所示，经ＬＰＳ诱导后，ＰＭ细胞的ＥＲＫ磷酸化明显增加。但是经ＡＭ??提取物的事先预处理之后，相较与单纯的ＬＰＳ组而言，这种ＥＲＫ磷酸化水平明??显增加的现象发生显见地减弱，并且还表现出一定程度的剂量依赖性。所说明的??是ＡＭ提取物对ＬＰＳ效应中的ＥＲＫ途径有抑制作用。Ｉｍａｇｅｎ?Ｊ软件分析结果也??提示，ＡＭ在抑制ＬＰＳ的至炎作用中，对ｐ－ＥＲＫ蛋白的表达抑制作用在高剂量??组甚至可以达到６５％。??４６??
【参考文献】：
期刊论文
[1]青蒿素:从中国传统药方到全球抗疟良药[J]. 黎润红,张大庆. 中国科学院院刊. 2019(09)
[2]不同品系小鼠腹腔巨噬细胞对LPS的反应性初步比较研究[J]. 陈伟,马瑞,张腾腾,张涵,李艳茹,李太元. 延边大学农学学报. 2017(01)
[3]针刺治疗脑缺血再灌注损伤机制研究[J]. 王娇,周国平,吴春晓,许秀洪. 中医学报. 2017(01)
[4]金丝桃苷预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤作用与PI3K/Akt信号通路的关系[J]. 韩军,宣佳利,胡浩然,陈志武. 中国中药杂志. 2015(01)
[5]急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征基础及临床研究进展[J]. 施卉,任成山. 中华肺部疾病杂志(电子版). 2013(04)
[6]艾灸对类风湿性关节炎家兔滑膜细胞JAK-STAT通路负反馈调节家族细胞因子信号抑制因子的影响[J]. 杨馨,刘旭光,王月,杨慎峭,金荣疆. 针刺研究. 2013(02)
[7]急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征发病机制的研究进展[J]. 马李杰,李王平,金发光. 中华肺部疾病杂志(电子版). 2013(01)
[8]急性肺损伤的诊治研究现状及进展[J]. 金发光. 中华肺部疾病杂志(电子版). 2013(01)
[9]肝脓肿并发多器官功能衰竭1例治疗分析[J]. 俞晓燕,姜国伟,易清清,倪祖德,周品伟,朱蓓德. 现代医药卫生. 2013(02)
[10]银杏叶提取物对阿尔茨海默病大鼠认知功能的影响及其作用机制[J]. 王暖,耿德勤,黄红莉,周昊,杨秀华,邵丽. 神经损伤与功能重建. 2012(04)
博士论文
[1]蒲公英甾醇对LPS诱导的乳腺炎抗炎作用及调节机制研究[D]. 伞治豪.吉林大学 2014
[2]PI3K/Akt/mTOR通路抑制剂影响乳腺癌干细胞对内分泌治疗和靶向治疗耐药性的研究[D]. 刘艳.天津医科大学 2014
[3]多拉菌素的抗炎作用及其对相关信号转导通路的调控[D]. 闫姝含.吉林大学 2013
[4]氟非尼酮抗炎作用机制研究[D]. 黄玲.中南大学 2013
[5]白花前胡素类化合物抗炎活性以及分子作用机制的研究[D]. 喻鹏久.南方医科大学 2013
[6]维生素A营养对儿童抗手足口病免疫力的影响[D]. 陈思源.复旦大学 2013
[7]红景天苷的抗炎作用及其对炎症信号转导通路的调控[D]. 关爽.吉林大学 2011
[8]沃尼妙林的抗炎作用及对炎症信号转导通路的调控[D]. 陈志宝.吉林大学 2011
[9]复叶耳蕨和金星蕨化学成分及生物活性的研究[D]. 周道年.华中科技大学 2009
硕士论文
[1]芹菜素对LPS诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用[D]. 王玉明.吉林大学 2016
[2]短命植物小拟南芥全长cDNA文库的构建、测序及EST分析[D]. 赵云霞.石河子大学 2014
[3]基于“肾痿”假说的糖肾平对DKD大鼠肾脏保护作用及PI3K/AKT信号转导通路影响的研究[D]. 王颖超.北京中医药大学 2014
[4]中药方“蒲和饮”对小鼠的抗炎效果及抗炎机制研究[D]. 肖蓉.西南大学 2014
[5]中药方剂香芪汤对RAW264.7巨噬细胞炎症信号通路的调节机制研究[D]. 宋舟.吉林大学 2013
[6]连翘酯苷对鸡胸腺组织中炎症因子及抗氧化的作用[D]. 吴悦.东北农业大学 2013
[7]雪胆素甲对脂多糖活化的巨噬细胞RAW264.7的炎症反应的影响及其机制研究[D]. 何健.暨南大学 2013
[8]鬼针草总黄酮的抗炎作用及部分机制研究[D]. 林梅英.安徽医科大学 2013
[9]TLR2、TLR4及相关细胞因子在军团菌感染作用机制的体外实验研究[D]. 高向东.山西医科大学 2012
[10]柴胡多糖对巨噬细胞免疫功能的调节及对TLR4信号通路的影响[D]. 武剑.复旦大学 2012
本文编号：2904995
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