芹菜素抗非酒精性脂肪肝作用的机制研究
发布时间：2020-12-10 15:38
由于人们生活习惯和饮食结构的改变,非酒精性脂肪肝（NAFLD）的发病率呈现逐年上升的趋势。NAFLD是除外酒精和其他明确因素所致肝损伤的一种临床病理综合征,以肝细胞内脂质过度沉积和脂肪变性为主要特征。NAFLD严重者可发生肝纤维化,肝硬化等,严重危及生命健康。到目前为止,NAFLD还没有批准的治疗药物。本实验通过高脂饮食的方法建立NAFLD小鼠模型和棕榈酸诱导L-02细胞的非酒精性脂肪变性经典模型,通过体内体外实验探讨芹菜素抗非酒精性脂肪肝作用及机制。目的通过离体细胞实验和整体动物实验研究芹菜素抗非酒精性脂肪肝的作用及机制。方法细胞实验:人正常肝细胞系L-02细胞,常规方法进行细胞的复苏、消化、传代和冻存。选取对数生长期细胞进行造模及用药,观察细胞内脂质沉积情况,检测细胞内甘油三酯（TG）含量;蛋白免疫印迹法检测JAK2/STAT3介导的信号通路相关蛋白表达;动物实验:随机将60只健康的雄性C57小鼠分为正常组、模型组、芹菜素组,每组各20只。其中正常组小鼠给予基础饲料喂养,模型组和芹菜素组给予高脂饮食建立小鼠非酒精性脂肪肝模型。饲养8周后,每天对各组小鼠给予相应的药物灌胃,连续给药1...
【文章来源】：河南科技大学河南省
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
第1章 绪论
1.1 非酒精性脂肪肝概述
1.2 非酒精性脂肪肝的流行病学及发病机制
1.2.1 非酒精性脂肪肝的流行病学
1.2.2 非酒精性脂肪肝的发病机制
1.2.3 非酒精性脂肪肝的治疗
1.3 芹菜素
1.3.1 芹菜素药理学作用
1.3.2 国内外研究现状
1.4 JAK2/STAT3 介导的炎症通路与非酒精性脂肪肝
第2章 芹菜素改善棕榈酸诱导的L-02细胞非酒精性脂肪变性作用及机制
2.1 前言
2.2 实验材料
2.2.1 细胞株
2.2.2 试剂
2.2.3 药品
2.2.4 实验仪器
2.2.5 试剂配制
2.3 实验方法
2.3.1 细胞培养
2.3.2 PA诱导的L-02 细胞高脂模型的建立
2.3.3 油红O检测PA诱导的L-02 细胞脂质沉积
2.3.4 PA诱导的L-02 细胞甘油三酯的检测
2.3.5 Western Blot检测JAK2/STAT3 通路相关因子蛋白的表达情况
2.4 统计学方法
2.5 实验结果
2.5.1 芹菜素改善L-02 细胞脂质的贮存
2.5.2 芹菜素改善L-02 细胞TG的贮存
2.5.3 芹菜素抑制JAK2/STAT3 介导的信号通路
第3章 芹菜素改善高脂饮食诱导小鼠非酒精性脂肪肝作用及机制..
3.1 前言
3.2 实验材料
3.2.1 实验动物
3.2.2 实验仪器
3.2.3 实验试剂
3.2.4 试剂配方
3.3 实验方法
3.3.1 非酒精性脂肪肝小鼠模型的建立、分组及药物治疗
3.3.2 血清样品制备
3.3.3 血清生化指标检测
3.3.4 口服葡萄糖耐量检测（Oral glucose tolerance,OGTT）
3.3.5 肝指数的计算
3.3.6 蜡块包埋组织切片制作
3.3.7 HE染色观察肝组织病理学变化
3.3.8 油红O染色观察肝组织脂滴
3.3.9 酶标法检测肝组织甘油三酯
3.3.10 qRT-PCR法检测肝组织IL-6,TNF-α、Fas、srebf-1 mRNA转录水平
3.3.11 蛋白免疫印迹法检测肝组织P-Jak2/Jak2、P-stat3/stat3 蛋白的表达
3.4 实验数据的统计学分析
3.5 结果
3.5.1 芹菜素改善小鼠糖脂代谢
3.5.2 芹菜素改善小鼠口服糖耐量
3.5.3 芹菜素降低小鼠肝脏指数
3.5.4 芹菜素改善肝脏病变
3.5.5 芹菜素降低肝脏组织TG含量
3.5.6 芹菜素改善小鼠肝功能
3.5.7 芹菜素降低小鼠肝组织炎症因子IL-6,TNF-α和脂代谢因子Fas、srebf-1 mRNA的表达
3.5.8 芹菜素对JAK2/STAT3 通路的抑制作用
第4章 讨论
第5章 结论
参考文献
缩略语词汇表
致谢
攻读学位期间的研究成果
【参考文献】：
期刊论文
[1]Nonalcoholic fatty liver disease: Evolving paradigms[J]. Amedeo Lonardo,Fabio Nascimbeni,Mauro Maurantonio,Alessandra Marrazzo,Luca Rinaldi,Luigi Elio Adinolfi. World Journal of Gastroenterology. 2017(36)
[2]非酒精性脂肪肝C57BL/6小鼠模型的建立[J]. 潘磊,张金彪,崔荣岗,赵保辉,李华,张忠勇,王旭初. 中国组织工程研究. 2016(40)
[3]芹菜素的研究进展[J]. 黄佳颖,杨悦,李玉荣,王星. 江苏科技信息. 2015(04)
[4]芹菜素对非酒精性脂肪肝大鼠的保护作用研究[J]. 席建军,庄让笑,王福根,潘红英,柯云玲,方红英,蔡兆斌. 中华中医药学刊. 2013(11)
[5]芹菜素药理作用的研究进展[J]. 林丽文,辛勤. 中国热带医学. 2012(08)
[6]同等剂量槲皮素、芹菜素对高尿酸血症大鼠的影响及其机制研究[J]. 姚芳芳,张锐,傅瑞娟,陈姜,何伟. 现代预防医学. 2012(06)
[7]非酒精性脂肪肝流行病学的研究进展[J]. 朱科伦,朱郇悯,曾文铤,梁建新. 广州医药. 2011(04)
[8]芹菜素抗氧化作用研究进展[J]. 孙秀琴,李荣华,唐涛. 中国现代医生. 2009(27)
[9]Nonalcoholic fatty liver disease: An overview of current insights in pathogenesis, diagnosis and treatment[J]. Tim CMA Schreuder,Bart J Verwer,Carin MJ van Nieuwkerk,Chris JJ Mulder. World Journal of Gastroenterology. 2008(16)
博士论文
[1]芹菜素调控IKK-β介导的NF-κB活化并抑制胰腺癌细胞生长[D]. 吴定国.第三军医大学 2016
硕士论文
[1]化合物P7C3-A20在非酒精性脂肪肝中的治疗作用及机制[D]. 华夏.中国人民解放军海军军医大学 2018
[2]护肝清脂片治疗非酒精性脂肪肝病的药效学研究及机制探讨[D]. 唐外姣.南方医科大学 2013
本文编号：2908947
【文章来源】：河南科技大学河南省
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
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摘要
abstract
第1章 绪论
1.1 非酒精性脂肪肝概述
1.2 非酒精性脂肪肝的流行病学及发病机制
1.2.1 非酒精性脂肪肝的流行病学
1.2.2 非酒精性脂肪肝的发病机制
1.2.3 非酒精性脂肪肝的治疗
1.3 芹菜素
1.3.1 芹菜素药理学作用
1.3.2 国内外研究现状
1.4 JAK2/STAT3 介导的炎症通路与非酒精性脂肪肝
第2章 芹菜素改善棕榈酸诱导的L-02细胞非酒精性脂肪变性作用及机制
2.1 前言
2.2 实验材料
2.2.1 细胞株
2.2.2 试剂
2.2.3 药品
2.2.4 实验仪器
2.2.5 试剂配制
2.3 实验方法
2.3.1 细胞培养
2.3.2 PA诱导的L-02 细胞高脂模型的建立
2.3.3 油红O检测PA诱导的L-02 细胞脂质沉积
2.3.4 PA诱导的L-02 细胞甘油三酯的检测
2.3.5 Western Blot检测JAK2/STAT3 通路相关因子蛋白的表达情况
2.4 统计学方法
2.5 实验结果
2.5.1 芹菜素改善L-02 细胞脂质的贮存
2.5.2 芹菜素改善L-02 细胞TG的贮存
2.5.3 芹菜素抑制JAK2/STAT3 介导的信号通路
第3章 芹菜素改善高脂饮食诱导小鼠非酒精性脂肪肝作用及机制..
3.1 前言
3.2 实验材料
3.2.1 实验动物
3.2.2 实验仪器
3.2.3 实验试剂
3.2.4 试剂配方
3.3 实验方法
3.3.1 非酒精性脂肪肝小鼠模型的建立、分组及药物治疗
3.3.2 血清样品制备
3.3.3 血清生化指标检测
3.3.4 口服葡萄糖耐量检测（Oral glucose tolerance,OGTT）
3.3.5 肝指数的计算
3.3.6 蜡块包埋组织切片制作
3.3.7 HE染色观察肝组织病理学变化
3.3.8 油红O染色观察肝组织脂滴
3.3.9 酶标法检测肝组织甘油三酯
3.3.10 qRT-PCR法检测肝组织IL-6,TNF-α、Fas、srebf-1 mRNA转录水平
3.3.11 蛋白免疫印迹法检测肝组织P-Jak2/Jak2、P-stat3/stat3 蛋白的表达
3.4 实验数据的统计学分析
3.5 结果
3.5.1 芹菜素改善小鼠糖脂代谢
3.5.2 芹菜素改善小鼠口服糖耐量
3.5.3 芹菜素降低小鼠肝脏指数
3.5.4 芹菜素改善肝脏病变
3.5.5 芹菜素降低肝脏组织TG含量
3.5.6 芹菜素改善小鼠肝功能
3.5.7 芹菜素降低小鼠肝组织炎症因子IL-6,TNF-α和脂代谢因子Fas、srebf-1 mRNA的表达
3.5.8 芹菜素对JAK2/STAT3 通路的抑制作用
第4章 讨论
第5章 结论
参考文献
缩略语词汇表
致谢
攻读学位期间的研究成果
【参考文献】：
期刊论文
[1]Nonalcoholic fatty liver disease: Evolving paradigms[J]. Amedeo Lonardo,Fabio Nascimbeni,Mauro Maurantonio,Alessandra Marrazzo,Luca Rinaldi,Luigi Elio Adinolfi. World Journal of Gastroenterology. 2017(36)
[2]非酒精性脂肪肝C57BL/6小鼠模型的建立[J]. 潘磊,张金彪,崔荣岗,赵保辉,李华,张忠勇,王旭初. 中国组织工程研究. 2016(40)
[3]芹菜素的研究进展[J]. 黄佳颖,杨悦,李玉荣,王星. 江苏科技信息. 2015(04)
[4]芹菜素对非酒精性脂肪肝大鼠的保护作用研究[J]. 席建军,庄让笑,王福根,潘红英,柯云玲,方红英,蔡兆斌. 中华中医药学刊. 2013(11)
[5]芹菜素药理作用的研究进展[J]. 林丽文,辛勤. 中国热带医学. 2012(08)
[6]同等剂量槲皮素、芹菜素对高尿酸血症大鼠的影响及其机制研究[J]. 姚芳芳,张锐,傅瑞娟,陈姜,何伟. 现代预防医学. 2012(06)
[7]非酒精性脂肪肝流行病学的研究进展[J]. 朱科伦,朱郇悯,曾文铤,梁建新. 广州医药. 2011(04)
[8]芹菜素抗氧化作用研究进展[J]. 孙秀琴,李荣华,唐涛. 中国现代医生. 2009(27)
[9]Nonalcoholic fatty liver disease: An overview of current insights in pathogenesis, diagnosis and treatment[J]. Tim CMA Schreuder,Bart J Verwer,Carin MJ van Nieuwkerk,Chris JJ Mulder. World Journal of Gastroenterology. 2008(16)
博士论文
[1]芹菜素调控IKK-β介导的NF-κB活化并抑制胰腺癌细胞生长[D]. 吴定国.第三军医大学 2016
硕士论文
[1]化合物P7C3-A20在非酒精性脂肪肝中的治疗作用及机制[D]. 华夏.中国人民解放军海军军医大学 2018
[2]护肝清脂片治疗非酒精性脂肪肝病的药效学研究及机制探讨[D]. 唐外姣.南方医科大学 2013
本文编号：2908947
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