从AMPK/PKC信号通路探讨盐酸药根碱促进NCI-H716细胞分泌GLP-1的作用机制

发布时间：2020-12-22 11:41

　　目的研究盐酸药根碱（JAT）对NCI-H716细胞分泌GLP-1的促进作用,并初步阐明JAT恢复内源性GLP-1分泌作用与AMPK/PKC信号通路相关。方法采用CCK-8法检测不同浓度JAT（6、30、60、90、150、300μmol/L）对NCI-H716细胞活性的影响,筛选150μmol/L JAT作为本实验基本浓度。分别选择JAT低、中、高浓度（100、150、200μmol/L）、150μmol/L JAT+不同浓度抑制剂Dorsomorphin（2、10、50μmol/L）、150μmol/L JAT+不同浓度抑制剂Chelerythrine（2、10μmol/L）对NCI-H716细胞进行干预,采用CCK-8方法检测细胞活性,酶联免疫吸附法（ELISA）测定GLP-1含量,RT-PCR法检测GLP-1mRNA水平,Western blot法检测GLP-1蛋白表达。结果 JAT可促进NCIH716细胞分泌GLP-1（P<0.05）;AMPK通路抑制剂Dorsomorphin和PKC通路抑制剂Chelerythrine均可抑制JAT的作用（P<0.05）,且抑制剂... 

【文章来源】：中西医结合研究. 2020年03期

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

不同浓度JAT对细胞活性的影响

采用CCK-8方法检测细胞活性，不同处理间细胞活性比较，差异无统计学意义（P>0.05），可视为同等条件。见图2。2.3 不同抑制剂对药根碱促进NCI-H716细胞分泌GLP-1的影响

Western blot法检测GLP-1蛋白的表达结果显示，药根碱可明显促进NCI-H716细胞GLP-1表达，且150μmol/L的药根碱效果最好，而Dorsomorphin可抑制药根碱的作用，且浓度越高，抑制作用越明显。见图3及图4。图4 药物对NCI-H716细胞GLP-1蛋白表达的影响

【参考文献】：
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本文编号：2931703