半夏泻心汤对过表达IL-12基因BMSCs靶向治疗胃癌的增效作用研究
发布时间：2020-12-22 17:57
目的构建慢病毒介导过表达IL-12基因的BMSCS,观察IL-12基因转染的BMSCs对胃癌移植瘤模型裸鼠的抑瘤作用,探讨半夏泻心汤与IL-12基因转染BMSCs联合对胃癌移植瘤模型裸鼠的抑瘤作用是否有协同增效作用。方法1、无菌条件下取裸鼠股骨,充分冲洗骨髓腔,加入适量含10%胎牛血清的低糖DMEM,离心5～10 min弃上清,加完全培养基培养。当细胞汇合达90%以上时0.25%胰酶-EDTA消化传代。取融合良好的P3代BMSCs,消化、离心,弃上层液体,加入一抗、二抗,孵育,重悬细胞后上FCM检测。2、采用LV5空载慢病毒及IL-12过表达LV5慢病毒转染BMSCs细胞,48h及72小时后,用倒置荧光显微镜观察BMSCs细胞转染的情况,计算慢病毒转染BMSCs的效率。经嘌呤霉素加压筛选,并用荧光定量PCR检测BMSCs细胞中IL-12的表达,建立稳定过表达IL-12基因的BMSCs细胞。3、取SPF级健康BALB/C裸鼠,于裸鼠腋窝皮下接种人胃癌BCG-823细胞,建立人胃癌移植瘤裸鼠模型。4、将人胃癌移植瘤裸鼠随机分为成瘤组（模型组）、LV5空载慢病毒转染BMSCs组（空载组）、L...
【文章来源】：甘肃中医药大学甘肃省
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
裸鼠BMSCs的形态学观察（倒置相差显微镜,×100）
图 2 流式细胞仪鉴定裸鼠 BMSCs 细胞.2 荧光显微镜观察 LV5-IL-12 转染 BMSCs 的效率结果见图 3、图 4。MOI 值为 50 转染的细胞，在细胞转染 48h 以后，普通光镜下胞形态规则，生长良好，荧光显微镜下 LV5 空载慢病毒转染的 BMSCs 和 LV5-IL-12染的 BMSCs 绿色荧光强度增强。72h 以后细胞融合现象明显，绿色荧光强度达到最，转染效率可达 90%。
荧光显微镜观察 LV5-IL-12 转染 BMSCs 的效率结果见图 3、图 4。MOI 值为 50 转染的细胞，在细胞转染 48h 以后，普通光形态规则，生长良好，荧光显微镜下 LV5 空载慢病毒转染的 BMSCs 和 LV5的 BMSCs 绿色荧光强度增强。72h 以后细胞融合现象明显，绿色荧光强度达转染效率可达 90%。转染 48h 自然光（×100） 转染 72h 自然光（×100）
【参考文献】：
期刊论文
[1]复方苦参注射液在晚期胃癌化疗中的应用效果观察[J]. 尹建宏. 北方药学. 2019(02)
[2]6种中药注射液联合SOX化疗方案治疗胃癌的网状Meta分析[J]. 吉跃进,李红晓,陆为民. 中成药. 2019(01)
[3]复元和中汤联合SOX化疗方案对胃癌患者外周血Th1/Th2的影响[J]. 高磊,刘寒松,胡扬喜,李英,胡德升,张磊. 中医学报. 2019(01)
[4]新辅助化疗联合腹腔镜手术对进展期胃癌疗效的meta分析[J]. 李上,张义胜,赵海远. 现代医药卫生. 2019(01)
[5]益气健脾化积方对胃癌化疗患者的疗效及对免疫功能影响[J]. 龚艳青,胡林飞,张博成,张梅庆. 临床医药实践. 2019(01)
[6]微RNA在胃癌中的相关机制及诊断治疗的研究进展[J]. 张弛,张雷. 医学综述. 2019(01)
[7]基于数据挖掘的抗胃癌植物类中药组方设计[J]. 蒋先仲,郭红莲. 中国药房. 2018(24)
[8]我国不同手术方式治疗早期胃癌的经济学指标评价[J]. 朱晓芸,马如超,于红刚. 中国肿瘤. 2019(01)
[9]胃癌中幽门螺旋杆菌感染对DNA甲基化影响的研究进展[J]. 魏晓东,唐艳萍. 中国中西医结合外科杂志. 2018(06)
[10]合理饮食在胃癌术后治疗的作用与中医食疗的应用前景[J]. 刘磊,洪裕玲,刘国彦. 世界华人消化杂志. 2018(35)
本文编号：2932174
【文章来源】：甘肃中医药大学甘肃省
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
裸鼠BMSCs的形态学观察（倒置相差显微镜,×100）
图 2 流式细胞仪鉴定裸鼠 BMSCs 细胞.2 荧光显微镜观察 LV5-IL-12 转染 BMSCs 的效率结果见图 3、图 4。MOI 值为 50 转染的细胞，在细胞转染 48h 以后，普通光镜下胞形态规则，生长良好，荧光显微镜下 LV5 空载慢病毒转染的 BMSCs 和 LV5-IL-12染的 BMSCs 绿色荧光强度增强。72h 以后细胞融合现象明显，绿色荧光强度达到最，转染效率可达 90%。
荧光显微镜观察 LV5-IL-12 转染 BMSCs 的效率结果见图 3、图 4。MOI 值为 50 转染的细胞，在细胞转染 48h 以后，普通光形态规则，生长良好，荧光显微镜下 LV5 空载慢病毒转染的 BMSCs 和 LV5的 BMSCs 绿色荧光强度增强。72h 以后细胞融合现象明显，绿色荧光强度达转染效率可达 90%。转染 48h 自然光（×100） 转染 72h 自然光（×100）
【参考文献】：
期刊论文
[1]复方苦参注射液在晚期胃癌化疗中的应用效果观察[J]. 尹建宏. 北方药学. 2019(02)
[2]6种中药注射液联合SOX化疗方案治疗胃癌的网状Meta分析[J]. 吉跃进,李红晓,陆为民. 中成药. 2019(01)
[3]复元和中汤联合SOX化疗方案对胃癌患者外周血Th1/Th2的影响[J]. 高磊,刘寒松,胡扬喜,李英,胡德升,张磊. 中医学报. 2019(01)
[4]新辅助化疗联合腹腔镜手术对进展期胃癌疗效的meta分析[J]. 李上,张义胜,赵海远. 现代医药卫生. 2019(01)
[5]益气健脾化积方对胃癌化疗患者的疗效及对免疫功能影响[J]. 龚艳青,胡林飞,张博成,张梅庆. 临床医药实践. 2019(01)
[6]微RNA在胃癌中的相关机制及诊断治疗的研究进展[J]. 张弛,张雷. 医学综述. 2019(01)
[7]基于数据挖掘的抗胃癌植物类中药组方设计[J]. 蒋先仲,郭红莲. 中国药房. 2018(24)
[8]我国不同手术方式治疗早期胃癌的经济学指标评价[J]. 朱晓芸,马如超,于红刚. 中国肿瘤. 2019(01)
[9]胃癌中幽门螺旋杆菌感染对DNA甲基化影响的研究进展[J]. 魏晓东,唐艳萍. 中国中西医结合外科杂志. 2018(06)
[10]合理饮食在胃癌术后治疗的作用与中医食疗的应用前景[J]. 刘磊,洪裕玲,刘国彦. 世界华人消化杂志. 2018(35)
本文编号：2932174
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